Effects of acute handling stress on liver tissue and oxidative stress of juvenile Eleutheronema tetradactylum
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摘要:
为探究急性操作胁迫对四指马鲅(Eleutheronema tetradactylum)幼鱼肝脏组织结构以及氧化应激的影响, 该研究在离水操作胁迫后不同时间取样, 观察肝脏显微结构的变化, 并检测相关抗氧化酶活性。结果显示, 随着离水胁迫时间的延长, 肝脏组织损伤程度呈现先上升后下降的趋势, 胁迫第24小时肝脏基本结构与对照组相似。超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)有相同的变化趋势, 胁迫后第2小时显著增加(P < 0.05)并达到最高值, 然后开始下降, 最后其值显著低于对照组(P < 0.05);丙二醛(MDA)含量在胁迫第2~第12小时呈现先升高后下降的变化趋势, 第12小时后又有所上升; 还原型谷胱甘肽(GSH)含量胁迫2 h没有显著变化(P > 0.05), 之后呈先下降后上升的趋势, 但其含量仍显著低于对照组(P < 0.05);总抗氧化能力(T-AOC)胁迫第2小时显著上升(P < 0.05), 之后下降, 实验结束时显著低于对照组(P < 0.05)。结果表明离水操作胁迫对四指马鲅幼鱼肝脏组织结构以及抗氧化酶产生一定的影响, 但随着胁迫时间的延长, 其组织结构以及抗氧化能力都有一定的恢复趋势。
Abstract:To understand the effects of acute handling stress on liver tissue and oxide stress of juvenile Eleutheronema tetradactylum, we sampled at different time after handling stress out of water and then observed the change of liver tissue and detected the activities of antioxidant enzymes.The results show that with prolongation of time of water stress, the degree of liver tissue injury appeared a trend of rising and then decreasing, and the basic structure of liver was similar with that of the control group at 24th hour.The SOD and CAT had the same changing trend, i.e., increased at 2nd hour significantly after the stress (P < 0.05), reaching the maximum value, and then began to drop until they were significantly lower than those in the control group (P < 0.05).The MDA content increased at first and then decreased at 2nd~12th hour during the stress, and increased after 12th hour.The GSH content had no significant change in the first two hours (P > 0.05), followed by a decreasing-increasing trend, but its content was still lower than that in the control group significantly (P < 0.05).During the first two hours of acute handling stress, the T-AOC activity increased significantly (P < 0.05), then decreased gradually, significantly lower than that of the control group (P < 0.05).It is concluded that the handling stress out of water did have some effects on the liver tissue and antioxidant enzymes of E.tetradactylum, but with extension of stress time, the tissue structure and antioxidant activity had certain recovery.
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Keywords:
- Eleutheronema tetradactylum /
- handling stress /
- tissue section /
- antioxidant enzymes
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四指马鲅(Eleutheronema tetradactylum)俗称午鱼、章跳、午笋、鲤后等, 隶属于鲻形目、马鲅科、四指马鲅属[1], 主要分布于澳大利亚[2-3]以及亚洲沿海国家和地区的海域, 其在中国以东海、南海等海域为主分布[4]。四指马鲅以肉质鲜美、生长速度快、抗病性强受到广大消费者以及养殖户的欢迎, 具有极高的经济价值和发展前景。目前, 其人工繁育技术已经突破, 对四指马鲅胚胎发育、盐度耐受性、消化道结构和功能细胞的发育等也进行了系统研究[5-7], 其苗种的大规模生产技术已经初步成熟。随着四指马鲅苗种繁育问题的解决, 研究增强苗种抗应激能力的方法, 对提高种苗成活率有积极实际意义。
应激是机体对外界或内部的各种异常刺激所产生的非特异性全身反应, 是生物体在长期进化中形成的一种适应性和防御性功能。由于生活在水中, 鱼类极易受到水环境以及其他外界环境的影响从而产生应激反应, 对鱼类健康造成不利影响, 尤其是近年来水污染严重, 生态环境不断恶化, 人工捕捞加剧等更是造成渔业资源锐减。鱼类的人工养殖管理过程中一些不可避免的操作同样会对养殖对象造成一定的胁迫, 从而使养殖对象产生一系列相应的生理生化反应[8]。孙鹏等[9]研究表明, 长期的应激胁迫会降低云纹石斑鱼(Epinephelus moara)的生长速率以及免疫力等。目前国内外有关环境因子对鱼类胁迫的报道相对较多, 主要涉及盐度胁迫[10-13]、温度胁迫[14-17]、重金属有毒物质胁迫[18-23]、酸碱度胁迫[24-26]以及有害微生物浸染[27-29]等, 有关人为操作对鱼类的影响也主要集中在虹鳟(Oncorhynchus mykiss)[30]、刀鲚(Coilia ectenes)[31-34]等, 对四指马鲅的研究相对较少见到, 由于其抗应激能力较差, 意味着对其养殖管理的操作要求也较高。为解决这一问题, 该研究对比离水操作胁迫前后以及不同时间段四指马鲅幼鱼肝脏显微结构和抗氧化酶活性的变化, 探究四指马鲅应对离水胁迫时的应答规律, 为其规模化养殖提供理论依据。
1. 材料与方法
1.1 实验材料
实验所用的四指马鲅由笔者于2015年6月至8月人工繁殖培育所得, 体长(6.00±0.21)cm, 体质量(4.00±0.15)g。实验开始前先暂养使其适应环境, 暂养期间, 每天换水1次, 每次换水量1/2左右, 连续充气。暂养1周后, 随机挑选体色正常、健康的240尾幼鱼进行实验。
1.2 实验设计
在水温25 ℃、pH 8.0±0.2、溶解氧(DO)为(6.0±0.5)mg · L-1条件下, 采用拉网捕捉的方式对四指马鲅进行急性操作胁迫, 每次先将四指马鲅全部聚拢在操网内拥挤胁迫5 s, 然后捞起暴露于空气中5 s, 再放入水中3 min, 重复以上操作共持续10个循环。
实验将四指马鲅分为3个平行组, 在胁迫结束后的第2、第6、第12和第24小时以及各时间点的对照组, 分别取样15尾, 采集前先用MS-222麻醉实验鱼2~3 min, 解剖鱼体, 采集肝组织样品, 用作组织切片观察的样品固定于4%多聚甲醛溶液中; 测量酶活的样品置于液氮中保存以备后续实验使用。
1.3 样品测定
组织切片观察, 采用区又君等[35]的研究方法, 取多聚甲醛固定的肝脏, 经过流水冲洗、乙醇脱水、二甲苯透明、包埋等处理后用Leica切片机制作成厚度5~6 μm的组织切片, 采用HE染色之后用中性树脂封片, 最后在显微镜下观察结果。
肝脏抗氧化酶活性测定, 取经液氮固定的肝脏样品, 冰浴条件下制作成组织匀浆, 按质量(g) :体积(mL)=1 :9, 加入9倍生理盐水, 250 r ·min-1离心10 min, 取上清液(10%的组织匀浆液)。按照南京建成公司订购的试剂盒说明书分别测定酶活, 以BCA法测定蛋白含量。总抗氧化能力(T-AOC)通过520 nm波长37 ℃条件下, 每分钟每毫克组织蛋白使反应体系的吸光度(OD)每增加0.01时为1个总抗氧化能力单位来测定; 过氧化氢酶(CAT)活性通过405 nm波长处测定过氧化氢(H2O2)减少量来测定, 单位定义为每毫克组织蛋白每秒分解1 μmol H2O2的酶量; 超氧化物歧化酶(SOD)活性单位定义为某反应体系中SOD达到50%的抑制率条件下, 所对应的酶量作为1个活性单位(U); 过氧化脂质降解产物丙二醛(MDA)通过TBA法来测定, 其测定原理为酸性条件下硫代巴比妥酸(TBA)分子与丙二醛分子共热将生成粉红色复合物, 其在532 nm的波长处有最大吸收峰; 还原型谷胱甘肽(GSH)可与二硫代二硝基甲酸(DTNB)反应, 生成一种黄色化合物, 可在405 nm波长处进行比色定量测定还原型谷胱甘肽含量。
1.4 数据分析
利用Excel 2003和SPSS 22.0软件对研究结果进行方差分析, 用Duncan氏检验进行显著性分析和多重比较, P < 0.05表示数据之间有显著性差异。经实验结果测量得到的数据均以“平均值±标准差(X ±SD)”表示。由于各时间点对照组与未处理组之间酶活性无明显差异, 故作图时将其全部归于未处理组。
2. 结果
2.1 对肝脏组织形态的影响
光镜下对照组肝脏肝板结构清晰, 排列规则, 肝细胞形态近圆形, 细胞核位于中央, 其中肝细胞之间分布少量的空泡(图 1-a); 在胁迫第2小时, 肝脏基本结构并无明显的异常, 肝小叶内空泡相对增多使肝板结构不清晰(图 1-b); 胁迫第6小时肝小叶整体结构比较完整, 而中央静脉区域可见放射状的肝板结构轻微的混乱, 肝板之间的血窦间隙增宽、增多, 肝脏空泡相对减少, 细胞核位于肝细胞的一侧(图 1-c); 胁迫第12小时肝脏组织以血窦扩张、空泡持续减少为特点; 至胁迫第24小时, 肝脏组织结构和常态相似, 有恢复的趋势。
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图 1 离水操作胁迫对四指马鲅肝脏组织结构的影响a.肝脏(对照组); b.肝脏(胁迫第2小时); c.肝脏(胁迫第6小时); d.肝脏(胁迫第12小时); e.肝脏(胁迫第24小时); VS.空泡; BV.血管; CV.中央静脉; LC.肝细胞; HP.肝板; HS.肝血窦; PC.胰腺细胞Figure 1. Effects of acute handling stress out of water on histological structure of liver of E.tetradactyluma.liver structure in control group; b.liver structure at 2nd hour of handling stress; c.liver structure at 6th hour of handling stress; d.liver structure at 12th hour of handling stress; e.liver structure at 24th hour of handling stress; VS.vacuole structure; BV.blood vessel; CV.central vein; LC.liver cells; HP.hepatic plate; HS.hepatic sinusoid; PC.pancreatic cells2.2 对肝脏多种抗氧化酶的影响
2.2.1 对SOD活性的影响
与对照组相比, 离水胁迫第2小时四指马鲅肝脏SOD活性显著升高(P < 0.05), 达到峰值之后显著下降(图 2-A); 至第12小时以后达到一个平衡状态, 且SOD活性显著低于处理前水平(P < 0.05)。
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图 2 急性操作胁迫对四指马鲅幼鱼肝脏氧化应激的影响不同小写字母表示组间存在明显差异Figure 2. Effects of acute handling stress on oxidative stress on liver of juvenile E.tetradactylumDifferent letters indicate significant difference among groups.2.2.2 对肝脏CAT活性的影响
与对照组相比, 离水胁迫第2小时CAT活性显著升高(P < 0.05), 且达到峰值(图 2-B); 胁迫第6小时CAT活性与对照组无显著差异(P > 0.05), 随着处理时间的延长CAT活性处于显著下降趋势(P < 0.05), 至第24小时该实验结束CAT活性下降至最低值。
2.2.3 对肝脏MDA含量的影响
四指马鲅幼鱼肝细胞中MDA含量在离水胁迫第2~第24小时的变化趋势见图 2-C。离水胁迫第2小时其肝脏中MDA含量显著升高并达到峰值(P < 0.05), 之后逐渐降低, 至胁迫第12小时降至较低值但仍显著高于对照组(P < 0.05)。随着胁迫时间的延长其含量又有所增加, 但增加的速度相对较慢, 至胁迫第24小时达到一个显著高于对照组的相对较高值(P < 0.05)。
2.2.4 对肝脏中微量GSH含量的影响
与对照组相比, 离水胁迫第2小时GSH含量无显著变化(P > 0.05), 至胁迫第6小时GSH含量显著下降(P < 0.05), 且达到最低值(图 2-D)。第6小时以后GSH含量逐渐上升, 至第12小时上升到较高值, 但仍显著低于对照组(P < 0.05), 之后又逐渐下降但仍显著高于第6小时的水平(P < 0.05)。
2.2.5 对肝脏T-AOC的影响
胁迫第2小时四指马鲅幼鱼T-AOC达到最高值, 显著高于其他各组(P < 0.05, 图 2-E)。随着时间延长, T-AOC逐渐下降, 至第6小时下降到最低水平, 显著低于对照组(P < 0.05)。之后T-AOC逐渐上升, 至第12小时与对照组无显著差异(P > 0.05), 第24小时与第6小时无显著差异(P > 0.05), 处在一个较低水平。
3. 讨论
3.1 操作胁迫对四指马鲅幼鱼肝脏组织结构的影响
鱼类肝脏是其体内最大的消化器官, 也是储存糖原的主要部位。对照组的四指马鲅幼鱼肝脏肝板结构清晰, 排列规则, 其中肝细胞之间有少量的空泡, 可能是肝糖原和脂肪被溶解所致, 肝细胞内的物质合成速率与释放速率的不平衡, 导致了组织学观察空泡。由于离水之后很长时间四指马鲅幼鱼都处在惊吓而快速游动躲避的运动状态中, 随着时间的延长肝糖原和脂肪被溶解加剧以提供大量消耗的能量, 故表现为空泡增多。这一点与奥尼罗非鱼(Oreochromis niloticus×O.aureus)幼鱼患脂肪肝后的症状[36]相似, 考虑到该实验胁迫24 h后空泡化有减少的趋势, 故初步排除脂肪肝的可能。胁迫后细胞核位于肝细胞的一侧, 这与草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肝组织病变[37]症状相似, 表明离水胁迫对肝脏造成了一定的破坏, 但未超出其身体的适应范围, 故胁迫24 h后由于机体的自我调节, 肝脏组织结构有向常态恢复的趋势。
3.2 操作胁迫对四指马鲅幼鱼肝脏氧化应激的影响
氧气是有氧呼吸生物必不可少的代谢原料, 但氧化的效果本质上是有害的, 鱼类在正常有氧呼吸过程中会产生自由基(ROS)。机体正常代谢过程中也会产生ROS, 一般情况下ROS的产生与分解处在动态平衡中[9]。但当受到外界胁迫刺激时, 这种动态平衡将被打破, ROS迅速积累, 当其积累超过鱼体处理范围时会导致机体氧化损伤, 包括脂质过氧化、蛋白质和DNA氧化以及酶的失活等。机体抗氧化防御系统包括酶系统和低分子量抗氧化剂[38]。MARTÍNEZ-ÁLVAREZ等[39]研究表明, 鱼体受到氧化应激的影响时, 其率先利用第一道防线如VE、VC、GSH等小分子非酶物质来清除过多的ROS; 当这些小分子物质不足以清除过多的ROS时, 鱼体则会启动第二道防线, 即合成相应的抗氧化酶以减少氧化压力, 使其重新达到动态平衡。鱼体可以合成多种抗氧化酶以应对复杂变化的环境, 主要包括SOD、CAT等, 其中SOD是最先被机体合成并发挥作用的酶之一; 该研究发现操作胁迫之后2 h内SOD和CAT活性都显著升高(P < 0.05), 表明鱼体内诸多小分子非酶物质形成的第一道防线已经不足以清除过多的ROS, 机体需要激活第二道防线即合成相应的抗氧化酶。之后第2~第24小时SOD和CAT活性开始逐渐下降, 直到胁迫第24小时其活性都显著低于对照组(P < 0.05), 表明离水胁迫对机体产生了不利影响, 使SOD和CAT活性处于一个较低水平。不同的是SOD处在一个较低的平衡状态, 而CAT在实验结束以后仍可能继续下降。
细胞中MDA水平是机体脂质过氧化程度的体现, 其侧面反映了细胞损伤程度。该实验结果显示, 在胁迫最初的2 h MDA水平显著增加(P < 0.05), 而且达到整个实验过程的最大值, 表明四指马鲅肝脏细胞在离水操作胁迫过程中遭到了破坏。然而, 胁迫第2小时SOD、CAT和T-AOC都增加到最大值, 肝细胞受到损伤产生的自由基被迅速清理, 因此看到胁迫第2~第12小时MDA逐渐下降, 但仍然显著高于处理前水平(P < 0.05), 说明虽然其肝脏合成的抗氧化酶及抗氧化物质起到了一定的作用, 但并没有完全消除离水胁迫造成的影响。而胁迫第24小时无论是SOD、CAT还是GSH、T-AOC都显著低于对照组, ROS又逐渐开始积累, 膜脂过氧化的程度开始加重, 因此MDA含量开始增加, 但增加量显著低于处理后第2小时的增加量(P < 0.05)。这表明操作胁迫对四指马鲅肝脏细胞造成了损害, 虽然其自身含有小分子物质以及合成相应的抗氧化酶在很大程度上减少了这种损伤, 但是其肝脏细胞还是不可避免地受到离水胁迫的不利影响。
GSH是机体内重要的非酶性抗氧化物, 具有清除ROS、脂类过氧化产物(如MDA)以及解毒等功能。其与SOD有部分相似的功能, 该研究在胁迫第2小时测得其含量与实验前无显著差异(P > 0.05), 第6小时之后其含量显著下降到最低点(P < 0.05), 可能原因是虽然鱼体已经处于应激状态, 但是SOD和CAT最先起作用而GSH尚未发挥作用, 之后GSH的合成机制受到离水胁迫的损害, 导致其含量不仅没有上升反而显著减少。因此胁迫第12~第24小时其含量虽然在离水胁迫的刺激下有所上升, 但一直显著低于对照组(P < 0.05)。
机体总抗氧化能力T-AOC与机体健康程度存在密切关系, 其包括酶促与非酶促2个体系。酶促体系主要包括SOD、CAT等抗氧化酶; 非酶促体系包括GSH、VC以及各种还原型氨基酸等。胁迫第2小时测得T-AOC显著高于对照组且达到最大值(P < 0.05), 可能原因是胁迫第2小时MDA含量迅速升高刺激SOD、CAT等抗氧化酶以及VC等小分子抗氧化物质的上升, 故表现为T-AOC的显著上升(P < 0.05)。同样胁迫第6小时SOD、CAT活性以及GSH含量都显著下降(P < 0.05), 表现为T-AOC的下降, 并最终显著低于对照组(P < 0.05)。
3.3 应激对鱼类的影响和预防措施
有研究表明, 适度的应激可以增强鱼体对环境的适应能力、促进鱼体的生理功能[40], 而长期过度的应激通常会扰乱机体正常的生理生化反应、降低鱼类的免疫能力[41]、引起疾病或亚健康状况的出现[40], 甚至导致鱼体死亡。对其他胁迫因子的研究结果表明, 抗氧化酶活性随着时间的延长呈现增加趋势, 而在鱼体建立新的平衡机制时, 抗氧化酶活性也恢复到正常水平[9, 42]。
该研究结果表明, 抗氧化酶活性先上升后逐渐下降到显著低于对照组, 暗示和其他种类的鱼相比, 当遭受同等程度的胁迫时, 四指马鲅更易受到损害。目前, 生产中已经被证明有效的措施包括[43]:1) 应激反应具有积累或协同效应, 应避免多重应激; 2) 应尽量缩短操作持续的时间; 3) 应尽量避免在高温期对养殖对象进行操作; 4) 运输时在水中加入适量的氯化钠可提高运输过程中的成活率; 5) 在对其进行操作之前可禁食2~3 d, 以减少应激时的耗氧量; 6) 可在饲料中适当地添加VC、谷氨酰胺等抗应激剂。另外VERBEEK等[44]研究指出, 鱼类的应激经历尤其是早期阶段, 可增强其后期对应激的适应能力, 这表明也可以通过适当的驯化, 提高四指马鲅的抗应激性。有研究表明, 饲料中添加乳酸菌[45]、不饱和脂肪酸[46]以及鱼油[47-48]等也可以改善鱼类的体质, 提高鱼类的抗应激性。因此, 在饲料中适当添加益生菌或不饱和脂肪酸等, 也可能提高四指马鲅的抗应激能力。
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图 1 离水操作胁迫对四指马鲅肝脏组织结构的影响
a.肝脏(对照组); b.肝脏(胁迫第2小时); c.肝脏(胁迫第6小时); d.肝脏(胁迫第12小时); e.肝脏(胁迫第24小时); VS.空泡; BV.血管; CV.中央静脉; LC.肝细胞; HP.肝板; HS.肝血窦; PC.胰腺细胞
Figure 1. Effects of acute handling stress out of water on histological structure of liver of E.tetradactylum
a.liver structure in control group; b.liver structure at 2nd hour of handling stress; c.liver structure at 6th hour of handling stress; d.liver structure at 12th hour of handling stress; e.liver structure at 24th hour of handling stress; VS.vacuole structure; BV.blood vessel; CV.central vein; LC.liver cells; HP.hepatic plate; HS.hepatic sinusoid; PC.pancreatic cells
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[1] 孙典荣, 陈铮.南海鱼类检索[M].北京:海洋出版社, 2013:380-382. [2] MOORE B R, STAPLEY J, ALLSOP Q, et al.Stock structure of blue threadfin Eleutheronema tetradactylum across northern Australia, as indicated by parasites[J].J Fish Biol, 2011, 78(3):923-936. doi: 10.1111/jfb.2011.78.issue-3
[3] ZISCHKE M T, CRIBB T H, WELCH D J, et al.Stock structure of blue threadfin Eleutheronema tetradactylum on the Queensland East coast, as determined by parasites and conventional tagging[J].J Fish Biol, 2009, 75(1):156-171. doi: 10.1111/jfb.2009.75.issue-1
[4] 张涛, 庄平, 刘健, 等.长江口崇明东滩鱼类群落组成和生物多样性[J].生态学杂志, 2009, 28(10):2056-2062. http://www.wenkuxiazai.com/doc/3d14b3db6f1aff00bed51e03.html [5] 谢木娇, 区又君, 温久福, 等.四指马鲅(Eleutheronema tetradactylum)受精卵和仔鱼对不同盐度的耐受性[J].生态学杂志, 2016, 35(5):1263-1267. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-STXZ201605020.htm [6] 谢木娇, 区又君, 李加儿, 等.四指马鲅稚鱼、幼鱼和成鱼消化道黏液细胞组织化学研究[J].中国细胞生物学学报, 2015, 37(9):1226-1234. doi: 10.11844/cjcb.2015.09.0158 [7] 谢木娇, 区又君, 李加儿, 等.不同发育阶段的四指马鲅消化道组织学比较研究[J].南方水产科学, 2016, 12(2):51-58. http://www.schinafish.cn/CN/abstract/abstract9299.shtml [8] 翁朝红, 王志勇, 谢芳靖, 等.操作胁迫对大黄鱼幼鱼的影响[J].中国水产科学, 2008, 15(1):100-105. http://www.cqvip.com/QK/87801X/200816/28003867.html [9] 孙鹏, 尹飞, 王建建, 等.操作胁迫对云纹石斑鱼肝脏抗氧化和鳃Na+-K+ATPase活力的影响[J].海洋渔业, 2014, 36(3):247-251. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-HTYY201403008.htm [10] 胡静, 叶乐, 吴开畅, 等.急性盐度胁迫对克氏双锯鱼幼鱼血浆皮质醇浓度和Na+-K+-ATP酶活性的影响[J].南方水产科学, 2016, 12(2):116-120. http://www.schinafish.cn/CN/abstract/abstract9295.shtml [11] KVLTZ D.Physiological mechanisms used by fish to cope with salinity stress[J].J Exp Biol, 2015, 218(Pt 12):1907-1914. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/26085667
[12] KVLTZ D, LI J, GARDELL A, et al.Quantitative molecular phenotyping of gill remodeling in a cichlid fish responding to salinity stress[J].Mol Cell Proteomics, 2013, 12(12):3962-3975. doi: 10.1074/mcp.M113.029827
[13] TACCHI L, LOWREY L, MUSHARRAFIEH R, et al.Effects of transportation stress and addition of salt to transport water on the skin mucosal homeostasis of rainbow trout (Oncorhynchus mykiss)[J].Aquaculture, 2015, 435(11):120-127. https://s3-eu-west-1.amazonaws.com/pfigshare-u-files/4994056/plos...
[14] BESSON M, VANDEPUTTE M, van ARENDONK J, et al.Influence of water temperature on the economic value of growth rate in fish farming:the case of sea bass (Dicentrarchus labrax) cage farming in the Mediterranean[J].Aquaculture, 2016, 462:47-55. doi: 10.1016/j.aquaculture.2016.04.030
[15] SMITH S, BERNATCHEZ L, BEHEREGARAY L B.RNA-seq analysis reveals extensive transcriptional plasticity to temperature stress in a freshwater fish species[J].BMC Genomics, 2013, 14(1):375. doi: 10.1186/1471-2164-14-375
[16] MADEIRA D, NARCISO L, CABRAL H N, et al.Influence of temperature in thermal and oxidative stress responses in estuarine fish[J].Comp Biochem Physiol A, 2013, 166(2):237-243. doi: 10.1016/j.cbpa.2013.06.008
[17] VINAGRE C, MADEIRA D, NARCISO L, et al.Effect of temperature on oxidative stress in fish:lipid peroxidation and catalase activity in the muscle of juvenile seabass, Dicentrarchus labrax[J].Ecol Indic, 2012, 23(4):274-279.
[18] VENTURINI F P, MORAES F D, CORTELLA L R, et al.Metabolic effects of trichlorfon (Masoten®) on the neotropical freshwater fish pacu (Piaractus mesopotamicus)[J].Fish Physiol Biochem, 2015, 41(1):299-309. doi: 10.1007/s10695-014-9983-y
[19] AMBREEN F, JAVED M, BATOOL U.Tissue specific heavy metals uptake in economically important fish, Cyprinus carpio at acute exposure of metals mixtures[J].Pak J Zool, 2015, 47(2):399-407. http://www.potravinarstvo.com/journal1/index.php/potravinarstvo/oai?verb=...
[20] PAN L Q, LIU N, ZHANG H X, et al.Effects of heavy metal ions (Cu2+, Pb2+ and Cd2+) on DNA damage of the gills, hemocytes and hepatopancreas of marine crab, Charybdis japonica[J].J Ocean Univ China, 2011, 10(2):177-184. doi: 10.1007/s11802-011-1809-2
[21] FAROMBI E O, ADELOWO O A, AJIMOKO Y R.Biomarkers of oxidative stress and heavy metal levels as indicators of environmental pollution in African cat fish (Clarias gariepinus) from Nigeria Ogun River[J].Int J Environ Res Public Health, 2007, 4(2):158-165. doi: 10.3390/ijerph2007040011
[22] SVECEVICIUS G.Acute toxicity of nickel to five species of freshwater fish[J].Polish J Environ Stud, 2010, 19(2):453-456. https://www.cabdirect.org/cabdirect/abstract/20103158751
[23] KERMATI V, JAMILI S, RAMIN M.Effect of diazinon on catalase antioxidant enzyme activity in liver tissue of Rutilus rutilus[J].J Fish Aquat Sci, 2010, 5(5):368-376. doi: 10.3923/jfas.2010.368.376
[24] QU R, FENG M, WANG X, et al.Metal accumulation and oxidative stress biomarkers in liver of freshwater fish Carassius auratus following in vivo exposure to waterborne zinc under different pH values[J].Aquat Toxicol, 2014, 150(5):9-16. http://www.cwejournal.org/category/vol9no3
[25] ABBINK W, GARCIA A B, ROQUES J, et al.The effect of temperature and pH on the growth and physiological response of juvenile yellowtail kingfish Seriola lalandi, in recirculating aquaculture systems[J].Aquaculture, 2012, 330/331/332/333(1):130-135. https://www.narcis.nl/publication/RecordID/oai%3Arepository.ubn.ru.nl%3A2066%2F103819
[26] 李文祥, 谢骏, 宋锐, 等.水体pH胁迫对异育银鲫皮质醇激素和非特异性免疫的影响[J].水生生物学报, 2011, 35(2):256-261. http://www.irgrid.ac.cn/handle/1471x/202674/handle/1471x/202644/... [27] 李昌伟. 鱼毒性赤潮藻对海洋青鳉鱼的致害机理研究[D]. 广州: 暨南大学, 2014: 40-52. http://cdmd.cnki.com.cn/Article/CDMD-10559-1015002630.htm [28] EZE E I, ECHEZONA B C, UZODINMA E C.Isolation and identification of pathogenic bacteria associated with frozen mackerel fish (Scomber scombrus) in a humid tropical environment[J].Afr J Agricult Res, 2011, 6(7):1947-1951. http://www.academia.edu/11734156/Antibacterial_activity_of_some_plant...
[29] OIKONOMOU A, KATSIAPI M, KARAYANNI H, et al.Plankton microorganisms coinciding with two consecutive mass fish kills in a newly reconstructed lake[J].Sci World J, 2012, 2012(1/2/3):504135. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/22654619
[30] WISEMAN S, OSACHOFF H, BASSETT E, et al.Gene expression pattern in the liver during recovery from an acute stressor in rainbow trout[J].Comp Biochem Physiol Pt D, 2007, 2(3):234-244. doi: 10.1007/s10695-011-9522-z
[31] 王宇, 卢丹琪, 李伟萍, 等.急性操作胁迫对刀鲚应激反应相关神经内分泌因子的影响[J].水产学报, 2014, 38(6):803-812. http://cyfd.cnki.com.cn/N2010050068.htm [32] 徐钢春, 杜富宽, 聂志娟, 等.10‰盐度对长江刀鲚幼鱼装载和运输胁迫中应激指标的影响[J].水生生物学报, 2015, 39(1):66-72. doi: 10.7541/2015.9 [33] 高金伟, 杜富宽, 顾若波.运输应激对刀鲚生理生化指标和HPI轴基因表达影响及甘草甜素的作用[J].上海海洋大学学报, 2015, 24(6):817-825. doi: 10.12024/jsou.20141201277 [34] DU F, XU G, NIE Z, et al.Transcriptome analysis gene expression in the liver of Coilia nasus during the stress response[J].BMC Genomics, 2014, 15(1):558. doi: 10.1186/1471-2164-15-558
[35] 区又君, 刘江华, 李加儿, 等.驼背鲈头肾和脾脏的形态组织学观察[J].南方农业学报, 2015, 46(11):2034-2039. doi: 10.3969/j:issn.2095-1191.2015.11.2034 [36] 李坚明, 甘晖, 冯广朋, 等.饲料脂肪含量与奥尼罗非鱼幼鱼肝脏形态结构特征的相关性[J].南方水产科学, 2008, 4(5):37-43. http://www.schinafish.cn/CN/abstract/abstract8673.shtml [37] 唐精, 叶元土, 李爱琴, 等.饲料引起鱼体肝脏病变的成因及预防[J].广东饲料, 2012(2):45-48. http://www.wenkuxiazai.com/doc/a3efae05f12d2af90242e618.html [38] SEVCIKOVA M, MODRA H, SLANINOVA A, et al.Metals as a cause of oxidative stress in fish:a review[J].Vet Med (Praha), 2011, 56(11):537-546. https://www.cabdirect.org/cabdirect/abstract/20113405490?start=650
[39] MARTÍNEZ-ÁLVAREZ R M, MORALES A E, SANZ A.Antioxidant defenses in fish:biotic and abiotic factors[J].Rev Fish Biol Fish, 2005, 15(1/2):75-88. doi: 10.1007%2Fs11160-005-7846-4
[40] 赵建华, 杨德国, 陈建武, 等.鱼类应激生物学研究与应用[J].生命科学, 2011, 23(4):394-401. doi: 10.3969/j.issn.0517-6611.2013.20.041 [41] TORT L.Stress and immune modulation in fish[J].Dev Comp Immunol, 2011, 35(12, SI):1366-1375. doi: 10.1016/j.dci.2011.07.002
[42] 周勇, 马绍赛, 曲克明, 等.悬浮物对半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)幼鱼肝脏溶菌酶、超氧化物歧化酶和鳃丝Na+-K+-ATPase活力的影响[J].海洋与湖沼, 2009, 40(3):367-372. doi: 10.11693/hyhz200903018018 [43] 王庆萍, 方春林, 芮学党.鱼类的应激反应[J].江西水产科技, 2013(3):36-39. http://www.cqvip.com/QK/98130X/201303/47468976.html [44] VERBEEK P, IWAMOTO T, MURAKAMI N.Variable stress-responsiveness in wild type and domesticated fighting fish[J].Physiol Behav, 2008, 93(1/2):83-88. http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0031938407003125
[45] 邝哲师, 赵祥杰, 叶明强, 等.乳酸菌对水产养殖动物抗氧化应激与免疫力影响研究进展[J].畜牧与饲料科学, 2011, 32(8):39-41. http://www.wenkuxiazai.com/doc/4c337b89b9d528ea81c77983.html [46] HAMAZAKI T, ITOMURA M, SAWAZAKI S, et al.Anti-stress effects of DHA[J].Biofactors, 2000, 13(1/2/3/4):41-45. http://pubmedcentralcanada.ca/pmcc/articles/PMC3864671
[47] XIANG L, CAO X L, XING T Y, et al.Mixture of peanut skin extract and fish oil improves memory in mice via modulation of anti-oxidative stress and regulation of BDNF/ERK/CREB signaling pathways[J].Nutrients, 2016, 8(5):256. doi: 10.3390/nu8050256
[48] BACARIN C C, de SÁ-NAKANISHI A B, BRACHT A, et al.Fish oil prevents oxidative stress and exerts sustained antiamnesic effect after global cerebral ischemia[J].CNS Neurol Disord Drug Targets, 2015, 14(3):400-410. doi: 10.2174/1871527314666150225125232
-
期刊类型引用(9)
1. 王波，徐伟，关舒，郭凯，张付贤，罗凯，郜卫华，王卓铎. 酸化剂对黄颡鱼生长、抗氧化能力和非特异性免疫的影响. 动物营养学报. 2023(04): 2490-2502 . 
百度学术
2. 徐淑玉，区又君，温久福，林欣，李加儿. 急性淡水胁迫对四指马鲅幼鱼鳃、心脏、脾脏和肝脏组织结构的影响. 广东农业科学. 2023(05): 121-131 . 百度学术
3. 周胜杰，杨蕊，韩明洋，王一福，于刚，马振华. 海南近海青干金枪鱼Thunnus tonggol和小头鲔Euthynnus affinis幼鱼的营养成分分析及评价. 水产学杂志. 2021(01): 23-28 . 百度学术
4. 陈旭，左涛，周胜杰，杨蕊，于刚，秦传新，马振华. 尖吻鲈幼鱼运输密度和时长对运输水质及其复苏率和抗氧化能力的影响. 南方水产科学. 2021(02): 122-128 . 本站查看
5. 蓝军南，李俊伟，区又君，温久福，李加儿，李活，周慧. 四指马■泌尿系统胚后发育组织学研究. 海洋渔业. 2020(01): 35-44 . 百度学术
6. 钟佳佳，章超桦，高加龙，秦小明，曹文红，郑惠娜，林海生. 马氏珠母贝肉酶解产物的抗酒精性肝损伤作用. 南方水产科学. 2020(02): 107-114 . 本站查看
7. 蓝军南，区又君，温久福，李俊伟，牛莹月，周慧，李加儿. 四指马鲅精巢发育及精子发生的组织学和超微结构. 中国水产科学. 2020(06): 637-648 . 百度学术
8. 蓝军南，区又君，温久福，李俊伟，牛莹月，李加儿. 四指马鲅性逆转过程初步研究. 南方水产科学. 2020(06): 67-74 . 本站查看
9. 林雪，段静娜，赵玉蓉，王红权. 不同组成酸化剂对罗非鱼生长性能和抗氧化及肝脏代谢酶活性的影响. 饲料工业. 2019(08): 51-55 . 百度学术
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