Effects of Bacillus substilis on water quality and immunization indicators of larval Penaeus vannamei
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摘要:
研究了不同浓度的枯草芽孢杆菌(Bacillus substilis)对养殖环境水质和凡纳滨对虾(Penaeus vannamei)幼体抗病力相关酶活性的影响。结果表明，枯草芽孢杆菌能显著(P < 0.05)降低化学需氧量(COD)和氨氮(NH3-N)含量，抑制亚硝酸氮(NO2-N)的产生；当枯草芽孢杆菌投放浓度为1.25×104 cfu·mL-1时，水体中COD、NH3-N和NO2-N含量均值比对照组分别降低了65.30%、59.70%和88.64%；20 d后测定对虾的碱性磷酸酶(AKP)、过氧化物酶(POD)、酚氧化酶(PO)、超氧化物歧化酶(SOD)、抗菌和溶菌活力，各值相对于对照组分别提高了3.67、1.64、0.45、3.06、2.57和1.14倍；成活率比对照组提高了10%，增重率是对照组的2.44倍。因此，一定浓度的枯草芽孢杆菌能改善凡纳滨对虾幼体的养殖水质进而提高凡纳滨对虾幼体的抗病力。
Abstract:The effects of different densities of Bacillus substilis on water quality and on the immunity indicators of larval Penaeus vannamei were studied. The results demonstrated that B. substilis could significantly (P < 0.05) decrease the contents of COD, NH3-N and inhibit the production of NO2-N. With a density of 1.25×104 cfu·mL-1 of B.substilis, the average contents of COD, NH3-N and NO2-N of the treated groups decreased 65.30%, 59.70% and 88.64%, respectively. After 20-day cultivation, alkaline phosphatase (AKP), peroxidase (POD), phenoloxidase (PO), superoxide dismutase (SOD), the activity of anti-bacterial enzyme and bacteriolysis of Penaeus vannamei increased 3.67, 1.64, 0.45, 3.06, 2.57 and 1.14 times, respectively. Moreover, the survival rate of the treatment groups increased 10% and the weight gain increased 2.44 times when compared with the control group. Therefore, it showed that appropriate density of B.substilis could improve the water quality and the anti-disease ability of P.vannamei.
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Keywords:
- Bacillus substilis /
- water treatment /
- Penaeus vannameis /
- immunity indicators
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凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）又称南美白对虾，是中国重要的经济养殖虾类，具有生长快、广盐性、环境适应性强和出肉率高等优点[1]。近年来，随着集约化养殖规模的扩大，养殖生态环境恶化问题日益突出，造成对虾养殖病害频发，制约了对虾养殖产业的健康发展[2-3]。受池塘养殖环境和病害问题的困扰，国内外学者探索了不同对虾养殖模式，如网箱养殖。国内外关于网箱养殖对虾的研究始于20世纪80年代，主要利用对虾在近自然海区环境中生长速度快和养殖周期短，以及近自然海区水体交换充分、活饵补充良好等特点，通过在风浪较小的海湾中设置网箱进行对虾养殖，效果显著[4-11]。
关于不同养殖模式对虾肌肉品质差异的研究已有报道，如不同规格和盐度池塘养殖凡纳滨对虾[12]、海水和淡水养殖凡纳滨对虾[13]、生态化池塘养殖凡纳滨对虾和日本囊对虾（Marsupenaeus japonicus）[14]、野生和池塘养殖短沟对虾（Penaeus semisulcatus）[15]以及哈氏仿对虾（Parapenaeopsis harbwickii）[16]等。以上研究均表明，对虾养殖模式、品种、规格等能够造成其肌肉营养成分和品质出现差异。然而，目前关于深水网箱养殖凡纳滨对虾肌肉营养成分的研究尚未见报道，其对对虾深水网箱养殖模式的探索具有重要意义。因此，该研究通过比较分析深水网箱和池塘养殖凡纳滨对虾的肌肉一般营养成分（水分、粗蛋白、粗脂肪、粗灰分）、氨基酸和脂肪酸组成与质量分数，探讨两种养殖方式对凡纳滨对虾肌肉营养成分的影响作用，为今后凡纳滨对虾的健康养殖提供理论依据。
1. 材料与方法
1.1 材料
实验用深水网箱养殖凡纳滨对虾于2015年7月取自深圳市大鹏澳中国水产科学研究院南海水产研究所深圳试验基地HDPE C40型深水网箱养殖区，网箱周长40 m，网深6 m；养殖密度约为250尾·m-2，平均体质量（5.65±0.34）g。池塘养殖凡纳滨对虾于2015年7月取自中国水产科学研究院南海水产研究所深圳试验基地高位池养殖池塘，养殖密度约为200尾·m-2，平均体质量为（5.63±0.44）g。
网箱和池塘养殖海水均属于同一自然海区，盐度30，水温29.0~31.5 ℃，溶解氧质量浓度＞5 mg·L-1，pH 8.2~8.5。两种模式养殖对虾饲养周期基本相同（约60 d），均投喂“粤海”牌凡纳滨对虾配合饲料（基础营养成分：粗蛋白40.0%、粗脂肪4.0%、粗纤维5.0%、粗灰分16.0%、水分12.0%、钙4.0%、总磷1.0%等），日投喂3次，投喂量为虾体质量的3%~7%，依摄食情况做调整。
网箱和池塘养殖对虾分别选取3个样本，每个样本由20尾体质健康活泼、规格均匀的对虾组成。经测量体质量后，用蒸馏水清洗虾体，洁净无菌纱布擦干，人工去虾头和虾壳，把所得的肌肉绞碎混合，保存于-80 ℃。
1.2 营养成分测定方法
1.2.1 常规营养成分测定
对虾肌肉常规营养成分测定指标包括水分、粗蛋白、粗脂肪和粗灰分。水分测定采用恒温干燥法（105 ℃）（参考GB 5009.3—2010）；粗蛋白测定采用凯式定氮法（参考GB 5009.5—2010）；粗脂肪测定采用索氏抽提法（参考GB/T 5009.6—2003），粗灰分测定采用马弗炉550 ℃灼烧法（参考GB 5009.4—2010）。
1.2.2 氨基酸组成分析
肌肉样品中16种氨基酸采用盐酸水解法测定（胱氨酸和色氨酸除外）（参考GB/T 5009.124—2003）。肌肉样品经105 ℃恒温干燥后，利用6 mol·L-1盐酸（HCl）溶液进行水解，使用Beckman 121MB型氨基酸分析仪测定16种氨基酸质量分数。另取肌肉样品经5 mol·L-1氢氧化钠（NaOH）溶液水解后，同机测定色氨酸质量分数。胱氨酸质量分数测定参照龚洋洋等[17]，样品采用氧化酸解法前处理后，同机测定其质量分数（参考GB/T 18246—2000）。
1.2.3 脂肪酸组成分析
脂肪酸的测定采用水解提取-气相色谱法（参考GB/T 22223—2008）。按照FOLCH等[18]和龚洋洋等[17]的方法，采用氯仿（CHCl3）和甲醇（CH3OH）（体积比2:1）提取脂肪，利用2% NaOH溶液和15%三氟化硼甲醇（CH4BF3O）溶液进行水解和甲基化，然后经正庚烷（C7H16）溶液静止分层后，取上清液用气相色谱仪（岛津GC-9A）测定分析脂肪酸。
1.3 营养评价方法
根据联合国粮农组织/世界卫生组织（FAO/WHO）1973年建议的氨基酸评分标准模式，以及中国预防医学科学院营养与食品安全所提出的鸡蛋蛋白质的氨基酸模式，分别按以下公式计算氨基酸评分（AAS）、化学评分（CS）和必需氨基酸指数（EAAI）[19-20]：
AAS=待测蛋白质氨基酸质量分数（%）/[FAO/WHO评分模式氨基酸质量分数（%）]
CS=待评蛋白质氨基酸质量分数（%）/鸡蛋蛋白质氨基酸质量分数（%）
EAAI=[(100A/AE)×(100B/BE)×(100C/CE×...×(100H/HE)]1/n
式中n为比较的必需氨基酸（EAA）数目；A，B，C，…，H为对虾肌肉蛋白质的EAA质量分数（%，DM）；AE，BE，CE，…，HE为全鸡蛋蛋白质的EAA质量分数（%，DM)。
1.4 数据分析
所得数据使用SPSS 17.0统计软件t检验进行方差分析，以平均值±标准差（X±SD）表示，P＜0.05表示差异显著。
2. 结果
2.1 常规营养成分
网箱和池塘养殖凡纳滨对虾肌肉水分、粗蛋白、粗脂肪和粗灰分的质量分数见表 1。网箱养殖对虾肌肉粗蛋白质量分数显著高于池塘养殖（P＜0.05）；网箱养殖粗脂肪质量分数虽略低于池塘养殖，但差异不显著（P＞0.05）。此外，网箱和池塘养殖对虾肌肉水分和粗灰分质量分数无显著性差异（P＞0.05）。
表 1 网箱和池塘养殖凡纳滨对虾肌肉常规营养成分比较（n=3, 湿质量）Table 1. Proximate composition in muscle of L.vannamei between cage and pond groups (wet weight)% 组别
group水分
moisture粗蛋白
crude protein粗脂肪
crude fat粗灰分
crude ash网箱养殖cage culture 68.58±0.94 21.56±0.16 1.33±0.15 1.36±0.38 池塘养殖pond culture 70.71±1.06 18.95±0.18* 1.53±0.19 1.65±0.47 注：*.同列组间差异显著（P<0.05）
Note：*. significant difference between two groups in the same column (P<0.05)2.2 氨基酸组成及营养品质评价
2.2.1 氨基酸组成分析
从网箱和池塘养殖凡纳滨对虾肌肉中共检测了18种常见氨基酸，包括8种必需氨基酸（EAA）、2种半必需氨基酸（HEAA）和8种非必需氨基酸（NEAA），其组成和质量分数见表 2。网箱养殖对虾天门冬氨酸（Asp）、异亮氨酸（Ile）、精氨酸（Arg）和脯氨酸（Pro）质量分数显著高于池塘养殖（P＜0.05），其余均差异不显著（P＞0.05）。网箱养殖对虾氨基酸总质量分数（TAA）显著高于池塘养殖（P＜0.05），而EAA、HEAA、NEAA、鲜味氨基酸（DAA）和虾味氨基酸（PFAA）总质量分数均差异不显著（P＞0.05）。18种氨基酸中，网箱和池塘养殖对虾均是谷氨酸（Glu）质量分数最高，分别占13.22%和12.96%，其次为Asp和Arg；而色氨酸（Trp）质量分数最低，分别为0.62和0.52%。
表 2 网箱和池塘养殖凡纳滨对虾肌肉氨基酸组成和质量分数（n=3，干质量）Table 2. Amino acid contents in muscle of L.vannamei between cage and pond groups% 氨基酸amino acid 网箱养殖cage culture 池塘养殖pond culture 天门冬氨酸aspartic acid (Asp) 7.88±0.12 6.80±0.18* 苏氨酸threonine (Thr) 2.78±0.08 2.74±0.06 丝氨酸serine (Ser) 2.72±0.03 2.68±0.06 谷氨酸glutamate (Glu) 13.22±0.15 12.96±0.23 甘氨酸glycine (Gly) 2.76±0.09 2.95±0.15 丙氨酸alanine (Ala) 4.17±0.08 4.08±0.12 缬氨酸valine (Val) 3.76±0.09 3.74±0.07 胱氨酸cystine (Cys) 1.77±0.04 1.68±0.06 蛋氨酸methionine (Met) 2.49±0.12 2.50±0.09 异亮氨酸isoleucine (Ile) 2.74±0.11 1.72±0.17* 亮氨酸leucine (Leu) 4.40±0.03 4.36±0.07 酪氨酸tyrosine (Tyr) 2.67±0.09 2.70±0.04 苯丙氨酸phenylalanine (Phe) 2.81±0.12 2.79±0.13 赖氨酸lysine (Lys) 4.53±0.25 4.49±0.23 组氨酸histidine (His) 1.40±0.07 1.39±0.08 色氨酸tryptophan (Trp) 0.62±0.13 0.52±0.08 精氨酸arginine (Arg) 7.03±0.05 6.78±0.06* 脯氨酸proline (Pro) 4.85±0.12 3.62±0.16* 氨基酸总量total amino acids (TAA) 72.80±1.26 68.70±1.89* 必需氨基酸a essential amino acids (EAA) 24.13±1.03 22.86±1.12 半必需氨基酸b half-essential amino acids (HEAA) 8.63±0.41 8.37±0.36 非必需氨基酸c non-essential amino acid (NEAA) 40.04±1.16 37.47±1.35 鲜味氨基酸d delicious amino acids (DAA) 28.03±1.56 26.79±1.23 虾味氨基酸e prawn flavor amino acids (PFAA) 15.93±0.45 15.69±0.38 EAA/TAA 0.33 0.33 EAA/NEAA 0.60 0.61 注：a.包括苏氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、色氨酸；b.包括组氨酸、精氨酸；c.包括天门冬氨酸、丝氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、胱氨酸、酪氨酸、脯氨酸；d.包括天门冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸；e.包括甘氨酸、丙氨酸、胱氨酸、精氨酸；*.同行两者差异显著（P<0.05）
Note：a. consisted of Thr，Val，met，Ile，Leu，Phe，Lys and Trp amino acid；b. consisted of His and Arg；c. consisted of Asp，Ser，Glu，Gly，Ala，Cys，Tyr and Pro amino acid；d. consisted of Asp，Glu，Gly and Ala amino acid；e. consisted of Gly，Ala，Cys and Arg amino acid；*. significant difference between two groups in the same row(P<0.05)2.2.2 营养品质评价
将表 2中的氨基酸数据换算成每克蛋白中含氨基酸毫克数（乘以62.50%）后，与FAO/WHO建议的氨基酸评分标准模式和全鸡蛋蛋白质的氨基酸模式进行比较，并分别计算出网箱组和池塘组对虾的氨基酸评分（AAS）、化学评分（CS）和必需氨基酸指数（EAAI）（表 3）。根据AAS分类，网箱和池塘养殖凡纳滨对虾的第一限制性氨基酸分别为亮氨酸（Leu）和Ile，第二限制性氨基酸均为Trp；根据CS分类，网箱和池塘养殖对虾的第一限制性氨基酸分别为Trp和Ile，第二限制性氨基酸分别是Leu和Trp。
表 3 网箱和池塘养殖凡纳滨对虾必需氨基酸营养价值评价Table 3. Evaluation of essential amino acid content of L.vannamei between cage and pond groups氨基酸
amino acidFAO/WHO模式
FAO/WHO pattern鸡蛋蛋白
egg protein氨基酸评分（AAS） 化学评分（CS） 网箱养殖
cage culture池塘养殖
pond culture网箱养殖
cage culture池塘养殖
pond culture苏氨酸threonine (Thr) 2.5 2.92 0.70 0.69 0.60 0.59 缬氨酸valine (Val) 3.1 4.10 0.76 0.75 0.57 0.57 异亮氨酸Isoleucine (Ile) 2.5 3.31 0.69 0.43 0.52 0.32 亮氨酸leucine (Leu) 4.4 5.34 0.63 0.62 0.51 0.51 赖氨酸lysine (Lys) 3.4 4.41 0.83 0.83 0.64 0.64 色氨酸tryptophan (Trp) 0.6 0.99 0.65 0.54 0.39 0.33 蛋氨酸+胱氨酸methionine+cystine (Met+Cys) 2.2 3.86 1.21 1.19 0.69 0.68 苯丙氨酸+酪氨酸phenylalanine+tyrosine (Phe+Tyr) 3.8 5.65 0.90 0.90 0.61 0.61 注：网箱养殖和池塘养殖对虾肌肉必需氨基酸指数分别为89.46和82.00。
Note：The EAAI values in muscle of shrimps from the cage and pond group were 89.46 and 82.00，respectively.2.3 脂肪酸组成
从网箱和池塘养殖凡纳滨对虾肌肉中共检测了35种脂肪酸，包括15种饱和脂肪酸（SFA）、9种单不饱和脂肪酸（MUFA）和11种多不饱和脂肪酸（PUFA），其组成及质量分数见表 4。除C13:0、C18:1 n-9t、C18:3 n-3、C18:3 n-6和C20:3 n-3等5种脂肪酸未检测出外，其余30种脂肪酸网箱和池塘养殖均检测出，其中C16:0质量分数最高，其次为C18:0、C18:2 n-6c、EPA和DNA；而C8:0质量分数最低，其次为C10:0。除C8:0、C21:0、C24:0、C14:1、C15:1、C17:1、C22:1 n-9、C24:1、C18:2 n-6t和C22:2外，其余20种脂肪酸质量分数两组均差异显著（P＜0.05）。网箱养殖对虾SFA、MUFA、PUFA、n-3 PUFAs、n-6 PUFAs、EPA和DHA质量分数均显著高于池塘养殖（P＜0.05），且网箱养殖对虾EPA+DHA质量分数是池塘养殖的1.90倍。
表 4 网箱和池塘养殖凡纳滨对虾肌肉脂肪酸组成和质量分数（n=3，干质量）Table 4. Fatty acids composition in muscle of L.vannamei between cage and pond groupsmg·kg-1 脂肪酸
fatty acid网箱养殖
cage culture池塘养殖
pond culture辛酸（C8:0） 0.07±0.01 0.09±0.03 癸酸（C10:0） 0.08±0.04 0.25±0.06* 十一烷酸（C11:0） 3.33±0.17 2.52±0.13* 月桂酸（C12:0） 1.64±0.23 1.17±0.18* 十三烷酸（C13:0） 未检出① 未检出① 肉豆蔻酸（C14:0） 69.44±3.69 32.09±1.23* 十五烷酸（C15:0） 27.69±2.16 16.88±1.94* 棕榈酸（C16:0） 3 853.10±12.38 3 063.76±10.26* 十七烷酸（C17:0） 103.15±3.85 66.80±3.17* 硬脂酸（C18:0） 2 476.34±9.12 2 283.14±10.27* 花生酸（C20:0） 35.86±1.69 28.06±2.36* 二十一碳酸（C21:0） 8.12±1.73 5.27±1.35 山嵛酸（C22:0） 23.05±4.23 13.77±2.39* 二十三碳酸（C23:0） 6.08±0.69 3.68±0.32* 二十四烷酸（C24:0） 0.83±0.19 0.58±0.13 肉豆蔻烯酸（C14:1） 5.24±0.26 5.86±0.33 顺-10-十五烯酸（C15:1） 15.53±1.36 13.41±1.54 棕榈油酸（C16:1） 117.89±7.35 34.53±2.92* 顺-10-十七烯酸（C17:1） 3.93±0.26 4.43±0.39 油酸（C18:1 n-9c） 311.46±5.72 202.98±4.21* 反油酸（C18:1 n-9t） 未检出① 未检出① 顺-11-二十碳烯酸（C20:1） 52.85±3.23 29.06±4.15* 芥酸（C22:1n-9） 8.74±0.08 8.71±0.13 神经酸（C24:1） 1.96±0.09 1.84±0.06 亚油酸（C18:2 n-6c） 1 462.75±5.63 1 036.66±4.32* 反亚油酸（C18:2 n-6t） 17.71±2.56 9.50±1.69 α-亚麻酸（C18:3 n-3） 未检出① 未检出① γ-亚麻酸（C18:3 n-6） 未检出① 未检出① 顺-11，14-二十碳二烯酸（C20:2） 89.89±5.30 60.66±3.69* 顺-11，14，17-二十碳三烯酸（C20:3 n-3） 未检出① 未检出① 顺-8，11，14-二十碳三烯酸（C20:3 n-6） 16.90±1.59 7.09±1.12* 花生四烯酸（C20:4n-6） 303.38±5.92 148.10±3.25* 顺式-5，8，11，14，17-二十碳五烯酸（C20:5 n-3）（EPA） 1361.41±9.36 697.64±7.32* 顺-13，16-二十二碳二烯酸（C22:2） 1.17±0.02 1.19±0.05 顺式-4，7，10，13，16，19-二十二碳六烯酸（C22:6 n-3）（DHA） 1 265.88±11.28 682.79±8.36* 饱和脂肪酸saturated fatty acids（SFA） 6 608.78±8.53 5 518.06±7.32* 单不饱和脂肪酸mono-unsaturated fatty acids（MUFA） 517.60±4.15 300.82±3.98* 多不饱和脂肪酸poly-unsaturated fatty acids（PUFA） 4 519.09±7.45 2 643.63±5.36* n-3 PUFAs 2 627.29±8.31 1 380.43±6.29* n-6 PUFAs 1 800.74±3.95 1 201.35±2.84* n-3 PUFAs/n-6 PUFAs 1.46 1.15 EPA+DHA 2 627.29±8.31 1 380.43±6.29* EPA/DHA 1.08 1.02 注：①.检出限为0.05 mg·kg-1；*.同行组间差异显著（P<0.05）
Note：①. the detection limit was 0.05 mg·kg-1；*. significant difference between two groups in the same row (P<0.05)3. 讨论
3.1 一般营养成分的比较分析
肌肉是对虾的主要食用部位，其粗蛋白和粗脂肪含量是肌肉营养价值的重要评价指标。已有大量研究证实，水产动物在不同的养殖模式下，其肌肉营养成分的含量与生活环境、饵料、生长期等关系密切[21-23]。文国樑等[12]研究表明，同一规格海水养殖凡纳滨对虾的肌肉蛋白质含量高于淡水养殖，而脂肪含量低于淡水养殖。马玲巧等[23]发现与池塘养殖相比，水库网箱养殖斑点叉尾鮰（Ictalurus punctatus）的肌肉具有高粗蛋白、低粗脂肪质量分数的特点。
该研究中网箱养殖对虾粗蛋白质量分数显著高于池塘养殖，而粗脂肪质量分数略低于池塘养殖，但差异不显著，表明网箱养殖对虾含有相对更高的营养成分。该研究所采样的网箱和池塘养殖凡纳滨对虾规格、生长期和养殖全程投喂饲料均相近，因此可以认为养殖环境是造成两者肌肉常规营养成分质量分数不同的主要原因。网箱养殖对虾生活空间广阔、水交换充足，风浪大，增加了其能量消耗，特别是脂类的消耗，导致肌肉粗脂肪质量分数低，而池塘养殖对虾生活环境相对稳定，容易导致脂肪的积累。
3.2 氨基酸组成的比较分析
氨基酸的组成和含量，以及必需氨基酸指数（EAAI）是评价蛋白质营养价值的重要指标[24-25]。根据FAO/WHO的氨基酸标准模式，高质量蛋白质需要满足的条件为氨基酸组成EAA/TAA为0.40左右、EAA/NEAA在0.60以上[26]。该研究中网箱和池塘养殖凡纳滨对虾EAA/TAA均为0.33，EAA/NEAA分别为0.60和0.61，EAAI分别为89.46和82.00。根据必需氨基酸的AAS评分，除赖氨酸（Lys）和苯丙氨酸+酪氨酸（Phe+Tyr）外，其余氨基酸质量分数网箱养殖对虾均高于池塘养殖；而根据CS评分，除Lys、Phe+Tyr和缬氨酸（Val）外，其余氨基酸质量分数网箱养殖对虾均高于池塘养殖，由此表明网箱和池塘养殖凡纳滨对虾肌肉氨基酸平衡效果均较好，都属于优质蛋白质，且网箱养殖对虾的蛋白质品质要优于池塘养殖对虾。
游离鲜味氨基酸的组成和含量是评价动物蛋白质鲜美程度的重要指标，其中Asp和Glu是呈鲜味的特征氨基酸，甘氨酸（Gly）和丙氨酸（Ala）是呈甘味的特征氨基酸[22, 27]。该研究所测凡纳滨对虾肌肉18种结构性氨基酸中，虽然网箱养殖对虾肌肉鲜味氨基酸总量与池塘养殖对虾无显著性差异，但单一氨基酸中Glu和Asp质量分数均最高，且网箱养殖对虾Asp质量分数显著高于池塘养殖对虾，表明网箱养殖凡纳滨对虾味道鲜美程度要优于池塘养殖对虾。
精氨酸（Arg）是动物体内一种重要的半必需氨基酸，其在体内代谢过程中可以通过诱导型一氧化氮合成酶（iNOS）生成一氧化氮（NO），而NO能够抑制脂质过氧化、清除氧自由基，在机体抵御病原感染、伤口愈合等免疫过程中发挥重要作用[24, 28]。该研究中网箱和池塘养殖对虾肌肉中Arg质量分数均较高，仅次于Glu和Asp，且网箱养殖对虾Arg质量分数显著高于池塘养殖对虾，该结果与野生和养殖哈氏仿对虾肌肉中精氨酸含量规律基本一致[16]，可能与网箱养殖对虾的生活环境开放、多变有关。
3.3 脂肪酸组成的比较分析
多不饱和脂肪酸（PUFA）可以显著增加肌肉脂肪在加热过程中产生的香味，能够反映肌肉的多汁性[16, 25]。研究表明，食物中n-6 PUFA含量过高会造成健康不良问题，但n-3 PUFA能够在一定范围内消除n-6 PUFA的负面效应[29-30]。EPA和DHA是n-3 PUFA的重要种类，不能由动物自主合成，目前自然界中仅硅藻、红藻和褐藻等可以自身合成，其具有降血栓、预防心血管疾病、抗炎症和防病抗衰老的作用[22, 31-32]。该研究中网箱和池塘养殖凡纳滨对虾PUFA质量分数均较高，分别为38.80%和31.24%，且以n-3 PUFA为主，两组的n-3 PUFA/n-6 PUFA分别为1.46和1.15，由此推测网箱养殖对虾摄食的天然饵料中可能含有较高的n-3 PUFA，该结果与池塘和网箱养殖匙吻鲟（Polyodon spathula）肌肉脂肪酸质量分数情况基本一致[22]。此外，网箱养殖对虾EPA和DHA质量分数均显著高于池塘养殖对虾，再次表明网箱养殖对虾在脂质方面具有较高的食用价值与保健作用。
4. 结论
从总体来看，与池塘养殖凡纳滨对虾相比，深水网箱养殖对虾肌肉具有高粗蛋白质量分数的特点，且其氨基酸总量和单一鲜味氨基酸Asp质量分数，以及脂肪酸SFA、MUFA、PUFA、EPA+DHA等质量分数均更高，营养成分和鲜味方面更优，可为人类提供优质的水产动物氨基酸和脂肪酸来源。
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图 1 水体中NH3-N(a)、NO2-N(b)和CODMn(c)的变化
Figure 1. Change of NH3-N(a), NO2-N(b) and CODMn(c) in cultured water
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图 2 AKP活力(a)、SOD活力(b)、PO活力(c)、POD活力(d)、抗菌活力(e)、溶菌活力(f)、对虾的成活率(g)和增重率(h)
柱形图上标的字母差异是Duncan多重比较的结果，不同字母表示差异显著。
Figure 2. Activities of AKP(a), SOD(b), PO(c), POD(d), antibacteria(e), bacteriolysis(f), survival rate of P.vannamei(g)and weight gain (h)of P.vannamei
Different letters above columns mean significant difference, which is a result from Duncan multiple comparison.
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