环境激素与水产品质量安全

傅群, 黄珂, 甘居利

傅群, 黄珂, 甘居利. 环境激素与水产品质量安全[J]. 南方水产科学, 2005, 1(4): 64-68.
引用本文: 傅群, 黄珂, 甘居利. 环境激素与水产品质量安全[J]. 南方水产科学, 2005, 1(4): 64-68.
FU Qun, HUANG Ke, GAN Ju-li. Environmental hormone affecting the security of aquatic products[J]. South China Fisheries Science, 2005, 1(4): 64-68.
Citation: FU Qun, HUANG Ke, GAN Ju-li. Environmental hormone affecting the security of aquatic products[J]. South China Fisheries Science, 2005, 1(4): 64-68.

环境激素与水产品质量安全

基金项目: 

广东省科技计划项目 2003B21501

中国水产科学研究院重点项目 2003-5-4

详细信息
    作者简介:

    傅群(1980-),女,从事水产品检测研究。E-mail:fuqun80@tom.com

  • 中图分类号: X503

Environmental hormone affecting the security of aquatic products

  • 摘要:

    文章从环境激素的来源和种类两方面,初步分析了可能影响水产品质量安全的重要因素。对环境激素已经和可能产生的危害加以举例分析,说明提高水产品质量安全意识的重要性。阐述了我国水产品激素的现状,并就提高人们的水产品安全意识和对环境激素实施标准化监控方面对于有关部门的工作提出了一些建议。

    Abstract:

    This paper primarily analyzed some important factors that may affect the security of aquatic product from the aspects of the resources and varieties of environmental hormones. The hazard and potential hazard that environmental hormones had brought were analyzed. The present status in China of environmental hormones was summarized. Some advices of enhancing security consciousness and inspecting & supervising the use of environmental hormones were put forward.

  • 鲷科鱼类(Sparidae)约有33属110种,主要分布于大西洋、印度洋和太平洋的暖热水域,许多种类为优质经济鱼类[1-2]。由于品种较多,而且许多品种外部形态接近,在野外利用形态学的标准如体型、牙齿形状和位置、鳍条或鳍棘长短或数目等对许多鲷科鱼类进行品种鉴定仍然存在较大的困难,因此,有必要在实验室进行进一步的鉴定。分子生物学技术由于具有要求样本量少、准确、快速等优点,为品种鉴定提供了新的手段。然而,目前采用分子技术对鲷科鱼类进行种类鉴定的研究仅有少量报道,如ALARCÓN和ALVAREZ[3]首先应用同工酶标记对8种鲷科鱼类进行了品种鉴定研究,但在mtDNA水平仍然缺乏科学有效的鉴定标准。

    随着科技的发展,生物遗传资源保护和应用研究日益受到重视,mtDNA序列分析技术目前已经被广泛应用于许多物种的群体遗传学和生物资源的保护和管理等研究领域。应用mtDNA序列如控制区、细胞色素b(Cyt b)及16S rRNA等序列对鲷科种类的研究已经涉及到系统发育等研究领域,如ORRELL和CARPENTER[1]、HANEL和STURMBAUER[4]及刘红艳等[5]等。通过这些研究获得的鲷科鱼类的mtDNA序列数据可以从NCBI(http://www.ncbi.nlm.nih.gov)等分子生物学数据库得到。一般认为Cyt b序列较为保守,主要用于种以上水平遗传变异的分析[6]。为了了解鲷科鱼类种间及种内遗传关系为种类鉴定提供基础信息,本研究应用生物信息学的一些手段对部分已经登陆NCBI核苷酸数据库的鲷科鱼类mtDNA Cyt b序列数据进行研究,为鲷科鱼类的种类鉴定及进一步遗传育种研究工作提供参考。

    为了进行种内及种间遗传距离分析及获得尽可能多的序列信息,在NCBI分子生物学数据库中至少具有2条1 kb以上长度的Cyt b序列的种才被纳入本研究范围。最终,通过搜索NCBI核苷酸序列数据库,下载用于本研究的Cyt b序列共有鲷科鱼类10属12种的24条序列。这些序列的基本信息见表 1

    表  1  研究所采用的Cyt b序列信息
    Table  1  Cyt b sequences used in this study
    属名
    genus
    种名
    species
    NCBI序列号
    accession number
    薄唇鲷属 Boops boops X81567、BBO319810
    牙鲷属 Dentex dentex AF143197、DDE319814
    重牙鲷属 Diplodus cervinus AF240723、DCE277367
    兔牙鲷属 Oblada melanura AF240701、OME319813
    玉颌鲷属 Lithognathus mormyrus AF240712、LMO277371
    海鲷属 Pagellus bogaraveo PBO319818、PBO276880
    acarne PAC319817、PAC276879
    erythrinus PER319816、PER276881
    真鲷属 Pagrus pagrus AF240729、PPA319815
    黑海鲷属 Spondyliosoma cantharus AF240705、SCA319811
    厚唇鲷属 Sarpa salpa AF240704、SSA319812
    鲷属 Sparus aurata AF240735、SAU319809
    注:中文种名没有提供
    Note: Chinese name for each species was not provided.
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    应用程序Clustal X[7]对所获得的Cyt b序列进行序列比对。采用程序Mega(Ver.2.1)[8]以Kimura 2-parameter模型进行系统发育及遗传距离分析,对未知数据采用成对删除法(pairwise deletion)进行处理,通过自展法(bootstrap method;重复次数500)计算自展值。采用Excel软件计算距离均值及标准偏差(SD),并以散点图表示种内种间的遗传距离分布情况。应用程序DnaSP(Ver.4.0)[9]计算序列GC含量、核苷酸多样性(Nucleotide diversity,Pi)、单倍型多样性(haplotype diversity,Hd)等其它相关数据。

    通过序列比对最终得到了1 070 bp的Cyt b共有序列。序列GC含量为0.461,其中核苷酸C含量最高,为30.3%,G最低,为15.8%,而T、A分别为29.7%、24.2%。序列中共检测到675个单态性位点,393个变异位点,2个未知位点(315,555),没有检测到插入缺失。变异位点中单一序列变异位点(singleton variable sites)有24个,简约性信息位点(parsimony informative sites)为369个。群体单倍型多样性(Hd)为0.986,而核苷酸多样性(Pi)为0.150。有关序列信息详见表 2

    表  2  研究鲷科鱼类Cyt b序列变异位点
    Table  2  Variable sites of Sparidae Cyt b sequences used in this study
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    进一步对表 2中的序列数据进行分析发现在1 070 bp序列范围内各种类都有种特征性的变异位点(即种内所有个体都具有,而其它种没有的变异位点),如S. cantharus具有的种特征性位点最多,共24个,而O. melanura只有4个。所有种类具有4到24个不等的种特征性位点,平均约为12.42个(表 3)。

    表  3  Cyt b序列种特征性位点信息
    Table  3  Species-specific site information of Cyt b sequences
    种名
    species
    位点位置
    site location
    小计
    sum
    B. boops 52a,372,429,624,625,685,717,774,837 9
    D. dentex 21,27,102,133,147,171,180,240,267,348,429,534,574,645,666,687,705,728,876,945,1056,1062 22
    D. cervinus 333,366,387,570,810,846,996 7
    O. melanura 234,360,717,855 4
    L. mormyrus 12,123,252,297,447,462,483,579,591,630,633,681,693,699,702,714,726,981 18
    P. bogaraveo 18,543,555,572,702,864,996 7
    P. acarne 42,297,738,843,846,864,969,1038 8
    P. erythrinus 7,8,237,378,468,525,537,556,585,609,612,627,693,729,945,951,1035 17
    P. pagrus 21,57,315,372,519,639,756,777,981,1017 10
    S. cantharus 42,66,73,102,147,258,361,366,402,423,456,483,640,660,703,705,706,759,843,891,958,984,996,1047 24
    S. salpa 240,264,448,612,759,873,1003 7
    S. aurata 15,30,138,417,546,600,615,675,701,729,774,841,861,960,985,1065 16
    注:“a”代表种特征性位点在序列中所处的位置(参考表 2中序列)
    Note: “a” represents the site location in the Cyt b sequences (refer to the sequence in Tab. 2).
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    12个鲷种间,L. mormyrusS. cantharus之间具有最大的遗传距离[0.220±0.017(SE)],而P. bogaraveoP. acarne间距离最小[0.105±0.010(SE)](表 4)。种间遗传距离平均值为0.180±0.0231(SD)。种内遗传距离最大的为P. pagrus [0.018±0.004(SE)],而其它各种的种内遗传距离都要小于这一数值。种内遗传距离平均值为0.007±0.006(SD)。因此,种间距离均值约为种内距离均值的26倍,种间遗传距离要远远大于种内遗传距离。图 1中各数据点的分布也反映了这一趋势。

    表  4  鲷科鱼类种内种间遗传距离关系
    Table  4  The genetic distances among and within Sparid species
    种名
    species
    1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 Da
    1 0.000
    2 0.193a 0.000
    3 0.158 0.179 0.013
    4 0.165 0.187 0.117 0.007
    5 0.172 0.196 0.152 0.166 0.009
    6 0.178 0.196 0.152 0.158 0.168 0.000
    7 0.160 0.198 0.140 0.156 0.175 0.105 0.005
    8 0.208 0.175 0.198 0.205 0.200 0.202 0.216 0.000
    9 0.191 0.157 0.188 0.186 0.196 0.207 0.198 0.141 0.018
    10 0.174 0.216 0.161 0.195 0.220 0.187 0.175 0.219 0.197 0.011
    11 0.154 0.194 0.174 0.167 0.180 0.169 0.171 0.188 0.180 0.171 0.014
    12 0.172 0.217 0.167 0.166 0.182 0.191 0.170 0.202 0.210 0.207 0.182 0.007
    注:表中数值1~12分别代表鲷种B. boopsD. dentexD. cervinusO. melanuraL. mormyrusP. bogaraveoP. acarneP. erythrinusP. pagrusS. cantharusS. salpaS. aurata。‘a’显示种间遗传距离,‘Da’代表种内遗传距离,标准误(SE)没有提供
    Note:Number 1~12 represent B. boops, D. dentex, D. cervinus, O. melanura, L. mormyrus, P. bogaraveo, P. acarne, P. erythrinus, P. pagrus, S. cantharus, S. salpa, S. aurata, respectively. ‘a’indicated the genetic distance among species, whereas ‘Da’indicated the genetic distance within species; Standard Error (SE) wasn′t provided.
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    图  1  鲷科鱼类Cyt b序列遗传距离分析
    Fig. 1  The genetic distances among the Cyt b sequences of the Sparidae

    进一步通过序列数据集构建了所有序列的NJ系统发育树(文中系统树没有提供)。尽管有些种间的自展值相对较低(最低为20),如L. mormyrusD. cervinusO. melanuraP. bogaraveoP. acar-ne,然而分析发现,同一种内的2条序列都被聚为一个类群,而且大多数都具有非常高的自展值(100)。因此,系统发育分析显示不同鲷科种能够通过Cyt b序列进行较好的区分。

    本研究通过对鲷科10属12个种的1 070 bp Cyt b序列进行分析,发现各鲷科种类在分析的序列范围内各种群都存在12个左右种群特征性的变异位点。刘红艳等[5]曾经报道鲷科同一种内不同个体的Cyt b基因序列具有一定的保守性。本研究也显示部分鲷科种内遗传距离为零,如B. boopsD. dentexP. bogaraveoP. erythrinus,而且12个鲷种种内遗传距离均值相对较低。因此,推测Cyt b基因种内保守性为鲷科种群的基本特征,在实际应用中可以应用这些保守的种特征性位点进行鲷科鱼类品种的鉴定。

    比较分析显示,不同鲷科鱼类种间与种内的遗传距离差异较大,种间遗传距离[0.105±0.010(SE)~0.220±0.017(SE)]要远远大于种内遗传距离[0~0.018±0.004(SE)]。另外,系统发育分析显示,来源于同一种的2条序列都被清晰的聚为同一类群,而来源于不同种的序列分别处于不同的类群。因此,不同鲷种能够通过Cyt b序列进行较好的区分。基于以上鲷科鱼类种间与种内遗传距离数据,提出以下假设,当2个鲷科鱼类个体通过以上Cyt b序列计算得到的遗传距离如小于0.018时,可以初步判断来源于同一种,如大于0.105,则为不同种,如处于2个数据之间,则有待于进一步结合其它的数据如形态学特征、种特征性位点等进行分析以确定种群,保证鉴定的准确性。

    ALARCÓN和ALVAREZ[3]首先应用同工酶标记对8种鲷科鱼类进行了品种鉴定研究。由于同工酶标记技术相对于mtDNA序列分析而言,具有制样更严格,且受个体发育时期限制等缺点,因此,本研究结果相对于前人的研究而言具有更大的实际应用价值。然而,值得注意的是,尽管以上研究对于鲷科鱼类新种的鉴定、个体或者小组织样本的品种鉴定和杂交育种的选育具有重要意义,但是,由于本研究所采用的同一种内的Cyt b序列数目相对较少,而且相对于整个鲷科鱼类而言,包含的品种数目也较少,因此,采用以上方法对鲷科鱼类中最近形成的种进行鉴定时可能由于其序列变异相对较少,从而可能出现错误的品种鉴定。另外,由于mtDNA是母性遗传的,鱼类杂种也可能被不正确的鉴定。因此,利用以上标准对鲷科鱼类进行品种鉴定时仍然要谨慎,最好与其它标准同时使用。为了准确地对鲷科鱼类进行分子鉴定,建立一个所有鲷科鱼类的Cyt b序列数据库非常必要。

  • [1] 李红莉, 高虹. 环境荷尔蒙物质的种类、危害及研究现状[J]. 环境科学动态, 2002, (1): 18-20. doi: 10.3969/j.issn.1673-288X.2002.01.005
    [2] 贾晓平, 蔡文贵, 林钦. 我国沿海水域的主要污染问题及其对海水增养殖的影响[J]. 中国水产科学, 1997, 4(4): 78-82. http://qikan.cqvip.com/Qikan/Article/Detail?id=2781303
    [3]

    Spry D J, Wiener J G. Metal bioavailability and toxicity to fish in low alkalinity lakes: a critical review[J]. Environ Poll, 1991, 71(2): 243-304. doi: 10.1016/0269-7491(91)90034-T

    [4]

    Pastor A F, Hernandez M A. Levels of heavy metals in some marine organisms from the western Mediterranean Area (Spain)[J]. Mar Poll Bull, 1994, 28(1): 50-53. doi: 10.1016/0025-326X(94)90186-4

    [5] 甘居利, 贾晓平, 蔡文贵. 水生动物体汞污染的生物学特征[J]. 动物学杂志, 1999, 34(4): 48-52. doi: 10.3969/j.issn.0250-3263.1999.04.019
    [6] 甘居利, 贾晓平. 中国浅海经济鱼类重金属的卫生质量状况[J]. 海洋通报, 1997, 16(4): 88-93. http://qikan.cqvip.com/Qikan/Article/Detail?id=2597019&from=Qikan_Search_Index
    [7] 贾晓平, 林钦, 蔡文贵, 等. 广东沿岸牡蛎体Cd含量及时空分布特点[J]. 中国水产科学, 2001, 7(4): 82-86. doi: 10.3321/j.issn:1005-8737.2000.04.019
    [8] 贾晓平, 林钦, 蔡文贵, 等. 广东沿岸牡蛎体铅含量及时空变化趋势[J]. 水产学报, 2000, 24(6): 527-532.
    [9] 全燮, 薛大明, 赵雅芝, 等. 有机锡的生物富集作用与生物效应[J]. 海洋环境科学, 1997, 16(4): 64-70. http://qikan.cqvip.com/Qikan/Article/Detail?id=2774548
    [10] 李来好主编. 水产品质量保证体系(HACCP)建立与审核[M]. 广州: 广东经济出版社, 2001.96-104.
    [11] 薛秀玲, 袁东星, 吴翠琴, 等. 福建沿海养殖贝类中农药残留的含量及来源分析[J]. 海洋环境科学, 2004, 5(2): 40-42. doi: 10.3969/j.issn.1007-6336.2004.02.011
    [12]

    Luo Xiaojun, Mai Bixian, Yang Qingshu, et al. Polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) and organ-chlorine pesticides in water columns from the Pearl River and the Macao harbor in the Pearl River Delta in South China[J]. Mar Poll Bull, 2004, 48(11-12): 1102-1115. doi: 10.1016/j.marpolbul.2003.12.018

    [13] 洪家敏, 胡家英. 气相色谱法测定中毒样品鱼体中三种拟除虫菊酯农药的方法研究[J]. 安微预防医学杂志, 2003, 9(6): 381-383.
    [14]

    Lundén T, Miettinen S, Lönnström L, et al. Effect of florfenicol on the immune response of rainbow trout (Oncorhynchus mykiss)[J]. Vet Immunol Immunopathol, 1999, 67(4): 317-325. doi: 10.1016/S0165-2427(98)00232-3

    [15] 贾晓平, 林钦, 李纯厚, 等. 南海渔业生态环境与生物资源的污染效应研究[C]. 北京: 海洋出版社, 2004.32-34. https://xueshu.baidu.com/usercenter/paper/show?paperid=e85201641412aa1545037de4926b684d&site=xueshu_se&hitarticle=1
    [16] 巢静波, 刘景富, 温美娟, 等. 环境样品中壬基苯酚及相关化合物的分离富集与测定[J]. 分析化学评述与进展, 2002, 30(7): 875-879.
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出版历程
  • 收稿日期:  2005-05-30
  • 刊出日期:  2005-08-19

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