罗非鱼体内氟甲砜霉素的高效液相色谱测定方法研究

冯敬宾, 贾晓平, 李刘冬

冯敬宾, 贾晓平, 李刘冬. 罗非鱼体内氟甲砜霉素的高效液相色谱测定方法研究[J]. 南方水产科学, 2005, 1(1): 35-42.
引用本文: 冯敬宾, 贾晓平, 李刘冬. 罗非鱼体内氟甲砜霉素的高效液相色谱测定方法研究[J]. 南方水产科学, 2005, 1(1): 35-42.
FENG Jingbin, JIA Xiaoping, LI Liudong. High-performance liquid chromatographic determination of florfenicol in tilapia(Oreochromis niloticus×O.aureus)[J]. South China Fisheries Science, 2005, 1(1): 35-42.
Citation: FENG Jingbin, JIA Xiaoping, LI Liudong. High-performance liquid chromatographic determination of florfenicol in tilapia(Oreochromis niloticus×O.aureus)[J]. South China Fisheries Science, 2005, 1(1): 35-42.

罗非鱼体内氟甲砜霉素的高效液相色谱测定方法研究

基金项目: 

广东省科技计划项目 2003D21501

珠海市科技计划项目 BC20032001

详细信息
    作者简介:

    冯敬宾(1978-),男,在读硕士生,主要从事渔业水域环境评价与保护研究,E-mail: fengjb0618@126.com

    通讯作者:

    李刘冬: 贾晓平, E-mail: Jiaxiaoping53@163.com

  • 中图分类号: S65.116

High-performance liquid chromatographic determination of florfenicol in tilapia(Oreochromis niloticus×O.aureus)

  • 摘要:

    建立了罗非鱼(Oreochromis niloticus×O.aureus)血浆、肌肉和肝脏内氟甲砜霉素的高效液相色谱测定方法(HPLC法)。采用内标法和峰高法定量,方法准确,重复性好,灵敏度较高。8、1和0.125 μg·mL-1 3个浓度水平的加标回收率为89.16%~96.13%;对应的批内精密度和批间精密度分别为2.21%~6.55%和2.11%~7.71%。方法检出限为0.03 μg·mL-1。结果表明,此方法非常适合用于罗非鱼体内氟甲砜霉素的动力学和残留研究。

    Abstract:

    A liquid chromatographic (HPLC) method for determination of florfenicol in the plasma, muscle and liver of tilapia (Oreochromis niloticus×O.aureus) was developed. For quantitation, the peak-height measurements and the internal standard were used. The study showed that the linearity and repeatability was good. The method was validated with blank samples fortified at 8, 1 and 0.125 μg·mL-1, the mean recovery was between 89.16% and 96.13%, the coefficient of variation was lower than 7.7%, and the detection limit for flofenicol was 0.03 μg·mL-1. All the results indicate its usefulness for conducting pharmacokinetics and residues studies on tilapia.

  • 广谱抗生素氟甲砜霉素属于第二代氯霉素类动物专用药物,是甲砜霉素的氟化衍生物。氟甲砜霉素不仅体外抗菌活性良好,抑菌效果非常显著,而且使用安全,不会引起人类的再生障碍性贫血。因此,目前氟甲砜霉素已广泛应用于水产养殖业。

    在氟甲砜霉素残留检测方面,Nagata等[1]报道了动物肌肉和养殖鱼类肌肉中的氟甲砜霉素残留的HPLC法。虽然该方法灵敏度高,但是耗时多,处理样品过程中化学试剂用量大。Hormazabal等[2]报道了虹鳟组织内氟甲砜霉素的HPLC法,方法亦相当繁琐。在血浆中的药物残留分析方面,Martinsen等[3]报道了大西洋鲑鱼血浆内氟甲砜霉素的液相色谱测定方法。方法耗时,繁琐,进样量为500 μL。van de Riet等[4]应用液相色谱-质谱联用方法对多种鱼类中的氯霉素类药物进行多残留分析,可用于多种水产动物中氯霉素、甲砜霉素、氟甲砜霉素及氟甲砜霉素胺的检测。除HPLC法外,Lavy等[5]曾采用微生物法检测了山羊乳汁和血清中的氟甲砜霉素。

    根据前人研究并结合本实验室条件,本研究旨在建立一种准确简便而经济的分析方法,以测定罗非鱼血浆、肌肉和肝脏内氟甲砜霉素残留,以便为水生动物药物动力学和残留研究提供分析手段,进一步为水产养殖合理用药提供依据,并确保水产品食用安全。

    健康奥尼罗非鱼(Oreochromis niloticus×O.aureus)由广东省罗非鱼良种场提供,平均体重125 g。实验前,在实验室驯养1周。实验水温27℃,所用玻璃水族箱为50 cm×30 cm×30 cm(45 L)。

    氟甲砜霉素标准品,Sigma公司;氯霉素标准品,99.6%,中国生物制品检定所;乙腈,色谱纯,Dikma公司;乙酸乙脂,分析纯;正己烷,分析纯;磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O),磷酸二氢钠(NaH2PO4·2H2O),为分析纯;氟甲砜霉素水溶性粉,华南农业大学实验兽药厂提供。

    标准液配制方法: 准确称取0.050 g干燥恒重的氟甲砜霉素标准品,置于50 mL烧杯中,用适量乙醇溶解后,转移到50 mL容量瓶中,用流动相乙腈-水(27:73,v/v)稀释至刻度,即成1 000 μg·mL-1母液,-20℃避光保存备用。准确称取0.050 g氯霉素标准品,于100 mL烧杯中用流动相溶解,转移到100 mL容量瓶中,配制成500 μg·mL-1溶液,-20℃保存。

    磷酸盐缓冲液(pH 7.0)配制: 准确称取磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O)71.64 g和磷酸二氢钠(NaH2PO4·2H2O)27.6 g,分别溶于1 L蒸馏水中配成0.2 mol·L-1的溶液,然后按61:39的比例混合即成。

    首先将水溶性粉用蒸馏水溶解,搅拌均匀,配制成5 mg·mL-1的水溶性粉悬浊液。将1 mL注射器输出端切除,抛光,装入0.2~0.3 g空白颗粒饲料(Φ3 mm),然后用定量加液器将配制好的水溶性粉悬浊液加入注射器,每g鱼体重2 μL,相当于剂量10 mg·kg-1鱼体重,使药液充分浸入饲料。小心地将注射器插入食道推动活塞强制灌胃给药,注意观察注射器插入食道的长度,以免将鱼胃捅破。给药后将鱼单独放入一个水盆中观察5 min,将反胃回吐药饵的鱼弃去。

    每尾鱼用2.5 mL静脉注射器(肝素钠抗凝剂处理),尾静脉采血,以3 000 r·min-1离心10 min,分离血浆。将鱼处死,取肝和肌肉(背脊两侧肌肉)。将同一类组织的各样品合并,-20℃保存至分析。

    日本日立LC-6200高效液相色谱仪,包括紫外检测器,智能泵,反应泵,微处理机,积分仪等;KL512型氮吹仪(配备数控恒温水浴装置);活动砂心过滤装置(包括0.45 μm微孔滤膜);FJ-200高速分散均质机;QL-901涡旋混合器;-20℃低温冰箱;TGL-16 C离心机,74B-4000型电动离心沉淀器;往返振荡器等。

    流动相乙腈-水(27:73,v/v),经0.45 μm滤膜过滤后,置于棕色试剂瓶中,超声波脱气10 min,备用;流速1.0 mL·min-1;Waters Spherisorb ODS2色谱柱(4.6×150 mm,粒度5 μm),柱温25℃;紫外检测波长223 nm。

    精确量取1 mL血浆样品于25 mL试管(具塞)中,加入10 μL氯霉素(500 μg·mL-1)作为内标和1 mL的磷酸缓冲液(pH 7.0),用旋涡混合器涡动混匀1 min。然后加入4 mL乙酸乙酯,用摇床水平机械振荡20 min,静置10 min后吸取上层乙酸乙酯于10 mL离心管中。加入4 mL乙酸乙酯,同样方法重复提取一次,合并乙酸乙酯提取液。60℃水浴氮气蒸干,加入1 mL流动相,再加入0.5 mL正己烷,涡动2 min溶解残留物。16 000 r·min-1离心20 min,弃去正己烷层,过滤,20 μL进样检测。

    称取1 g组织(肌、肝预先剪碎)于20 mL玻璃管中,加入10 μL氯霉素(500 μg·mL-1),加入1 mL的磷酸缓冲液(pH 7.0),加入4 mL乙酸乙酯,16 000 r·min-1匀浆10 s,转入10 mL离心管中,于旋涡振荡器上振荡1 min,4 000 r·min-1离心20 min,吸取全部上清液于10 mL具塞离心管中;再用4 mL乙酸乙酯于20 mL玻璃离心管中清洗残留,提取液转移转入10 mL离心管中,再震荡离心合并上清液;其余同“血浆样品处理方法”。

    配制系列标准液(含5 μg·mL-1的氯霉素),浓度为16~0.03 μg·mL-1(n=8)。进样量20 μL,依色谱条件,HPLC测定,以氟甲砜霉素的峰高与氯霉素内标的峰高之比值H,对相应的氟甲砜霉素浓度Ci作线性回归,求标准曲线回归方程以及回归系数。

    准确量取1 mL血浆或称取1 g组织(肌、肝)于10 mL玻璃管中,加入浓度为800~1.56 μg·mL-1的标准液系列(n=8),使样品中的药物浓度为16~0.03 μ·mL-1,其余同“样品处理”。进样量20 μL,HPLC测定,以氟甲砜霉素的峰高与氯霉素内标的峰高之比值H,对相应的氟甲砜霉素浓度Ci作线性回归,求工作曲线回归方程以及回归系数。

    求绝对回收率,按下式计算:

    绝对回收率=预处理后的加标样品药物峰高/溶于流动相的药物峰高100%。

    准确量取1 mL血浆或称取1g组织(肌、肝),分别加入浓度为6.25, 50和400 μg·mL-1的氟甲砜霉素标准液20 μL,其浓度分别为0.125,1和8 μg·mL-1,其余同“样品处理”。HPLC测定氟甲砜霉素浓度,每个浓度平行测定5次,同批测定0.125、1和8 μg·mL-1标准液中的药物峰高,计算绝对回收率。

    准确量取1 mL血浆或称取1 g组织(肌、肝),分别加入浓度为6.25、50和400 μg·mL-1的氟甲砜霉素标准液20 μL(见表 1),其浓度分别为0.125,1和8 μg·mL-1,其余同“样品处理”。同一批内平行测定5次,记录氟甲砜霉素和氯霉素峰高,计算峰高比值及批内精密度即各变异系数(RSD)。批间精密度: 测定2个批次,各浓度样品平行测定3次,计算批间精密度(RSD)。

    表  1  血浆、肌肉和肝脏样品工作曲线
    Table  1.  The calibration curves for florfenicol in plasma, muscle and liver samples
    样品
    sample
    线性范围/μg·mL-1
    concentration range
    标准曲线回归方程
    calibration equation
    相关系数
    R
    血浆 plasma 0.03~16 C血=2.729 H-0.06 0.9998
    肌肉 muscle 0.03~16 C肌=2.939 H-0.1121 0.9995
    肝脏 liver 0.03~16 C肝=2.8336 H-0.1326 0.9986
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    将浓度分别为8和1 μg·mL-1的工作标准液保存在0~5℃冰箱中,在48 d内对其进行4次测定。0.125 μg·mL-1的标准液在2 d内2次测定。

    将添加浓度为1 μg·mL-1的罗非鱼血浆、肌肉和肝脏样品提取液放置在实验台上,分别于第2天和第11天测定。记录峰高值,计算实测浓度,比较药物的浓度变化情况。

    在上述色谱条件下,基线走动平稳,血浆、肌肉和肝脏样品中虽有杂质峰出现,但无干扰峰,并且与药物分离良好(见图 1)。

    图  1  标准品和血浆提取物的色谱图FF为氟甲砜霉素色谱峰,CAP为内标物氯霉素色谱峰
    Figure  1.  Liquid chromatograms of standards and extracts from plasma, muscle and liver for determination of florfenicol(FF) with chloramphenicol(CAP) as internal standard(I.S.)

    基线峰高(噪音)最大值为0.0193 mAU,按信噪比(S/N)为2计算,得出仪器检出限为0.0146 μg·mL-1。标准曲线为Ci=2.797H-0.0339,相关系数R=0.9999,线性范围为0.03~16 μg·mL-1。根据线性范围,确定本方法的检出限为0.03 μg·mL-1

    各样品工作曲线测定结果见表 1,线性范围为0.03~16 μg·mL-1,相关系数范围为0.9986~0.9998,线性关系满足分析要求。

    各样品在3个浓度水平的平均回收率结果见表 2,其中血浆的平均回收率为92.86%~96.13%,肌肉的平均回收率为91.70%~96.09%,肝脏的的平均回收率为89.16%~89.52%,结果能够满足分析要求。

    表  2  不同组织样品在3个浓度水平的平均回收率(平均值±标准差%)
    Table  2.  The recovery of florfenicol in the plasma, muscle and liver samples of tilapia
    浓度/μg·mL-1
    concentration
    血浆
    plasma
    肌肉
    muscle
    肝脏
    liver
    0.125 94.79±2.81 91.70±5.41 89.52±4.32
    1 96.13±2.35 96.09±1.91 89.17±3.97
    8 92.86±1.22 92.72±2.59 89.16±3.71
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    各样品在3个浓度水平的批内精密度和批间结果分别见表 3表 4,批内和批间精密度最大均不超过7.7%,符合分析要求。

    表  3  不同组织样品中药物在3个浓度水平的批内精密度(RSD%)
    Table  3.  The intra-batch precision of a liquid chromatographic method to determine florfenicol in the plasma, muscle and liver samples of tilapia
    浓度/μg·mL-1
    concentration
    血浆
    plasma
    肌肉
    muscle
    肝脏
    liver
    0.125 3.75 6.45 5.61
    1 2.21 3.07 6.55
    8 2.37 2.65 4.71
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    图  2  氟甲砜霉素标准品曲线
    (浓度为0.03~16 μg·mL-1)
    Figure  2.  The standard curve of florfenicol
    (concentration range: 0.03~16 μg·mL-1)
    表  4  不同组织样品中药物在3个浓度水平的批间精密度(RSD %)
    Table  4.  The inter-batch precision of florfenicol in the plasma, muscle and liver samples of tilapia
    浓度/μg·mL-1
    concentration
    血浆
    plasma
    肌肉
    muscle
    肝脏
    liver
    0.125 6.27 6.26 2.92
    1 2.11 4.39 7.71
    8 2.39 4.46 3.72
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    对于标准液,在评价期内,以第1天测定结果为标准,其他各次测定结果与之相比较,计算出药物的浓度变化,结果在0.5%~1.9%之间。对于血浆、肌肉和肝脏样品,药物浓度的变化率分别为1.4%、0.8%和5.8%。

    表  5  工作标准液中氟甲砜霉素的稳定性
    Table  5.  Stability of florfenicol in the working standard solutions(0~5℃)
    浓度/μg·mL-1
    concentration
    变化率/% change percent
    第2天 第46天 第48天
    8 1.3 1.2 1.2
    1 1.0 1.9 0.5
    0.125 1.5
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    表  6  罗非鱼样品中氟甲砜霉素的稳定性
    Table  6.  Stability of florfenicol in the plasma, muscle and liver samples fortified at nominal concentrations of 1 μg·mL-1 florfenicol
    样品
    sample
    浓度/μg·mL-1 concentration 变化率/%
    change percent
    第2天 第11天
    血浆 1.006 1.020 1.4
    肌肉 1.049 1.107 5.8
    肝脏 1.056 1.064 0.8
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    水产动物体内药物含量的分析测定方法有微生物测定法、气相色谱法(GC)、高效液相色谱法(HPLC)、酶联免疫法、薄层色谱法、分光光度法、比色法和同位素法等。目前,HPLC法应用最多。如Tyrpenou等[6],Meinertz等[7]和Samuelsen等[8]学者分别在研究盐酸沙拉沙星,OTC和Romet30在金头鲷、银大麻哈鱼和大西洋鲑体内的分布和消除规律或药物动力学时,均采用了HPLC法。

    本研究建立的HPLC法具有进样量(20μL)少,所需样品量(1g)少,试剂消耗少和样品预处理简便的特点,结果是满意的。

    (1) 内标法定量准确。在HPLC法分析过程中,由于样品和内标是混合在一起注入色谱柱的,因此只要混合溶液中被测组分与内标的量的比值恒定,进样量的变化不会影响定量结果。用外标法虽然操作简便,但是要求满足的条件较高,要求进样量(每次应一致)准确及实验条件恒定。而内标法抵消了上样体积,乃至流动相、检测器等条件的影响,因此比外标法精确。

    (2) 方法灵敏度较高,相关系数较高,线性范围较宽。本方法的检出限为0.03 μg·mL-1。标准曲线相关系数R为0.9999,各样品工作曲线相关系数在0.9986~0.9998之间,线性范围均为0.03~16 μg·mL-1。标准曲线以及各样品工作曲线相关系数较高。线性范围较宽,其高低浓度相差达2个数量级,表明该方法具有较宽的测定范围。

    色谱法一般要求相关系数大于0.99,药物动力学实验方法要求线性范围为10-2。本方法标准曲线和各样品工作曲线的相关系数在0.9986~0.9999之间,线性范围为0.03~16 μg·mL-1,完全满足分析要求。

    (3) 方法回收率高。Vue等[12]对多种淡水鱼血浆研究发现,药物的回收率为84%~104%。在鸡、猪、牛和五条鰤鱼肌肉中,氟甲砜霉素的回收率为74.5%~81.5%[1]。Hormazabol等[2]的结果为,肌肉和肝脏药物的回收率分别为99%~105%和100%~107%。van de Riet等[4]应用液相色谱-质谱连用多残留检测多种鱼类中的氯霉素类残留,鲑组织中氟甲砜霉素胺与氟甲砜霉素回收率分别为71%和107%。

    本实验各样品在3个浓度水平的平均回收率为(89.16±3.71)%~(96.13±2.35)%,说明方法准确度良好。与血浆和肌肉相比,肝脏中的回收率相对稍低,原因在于作为代谢器官,肝脏中的成分比较复杂,药物的回收率受杂质峰的影响比较大。这与王群等[9]的报道结果一致。

    (4) 精密度良好。Vue等[12]多种淡水鱼血浆氟甲砜霉素精密度1.4%~8.1%。鸡血浆氟甲砜霉素含量为0.125、1和8 μg·mL-1,日内变异系数分别为5.1%、2.1%和3.5%;日间变异系数分别为6.2%、4.1%和3.4%[10]。鲤血浆中诺氟沙星的绝对回收率85.96%,日内和日间精密度均小于10%[11]

    药物动力学实验要求精密度在10%以内(检测限为μg·mL-1水平时)。本实验的批内和批间精密度均在8%以下,为2.11%~7.71%,说明方法可靠性较高,完全满足分析要求。

    (5) 药物稳定性良好。在一定的保存时间内,对配制好的标准液进行测定,其结果变化不大。在本次实验期内,药物在标准液中浓度变化范围为0.5%~1.9%。Vue等[1]报道,14 d内,工作标准液(浓度为0.1、1和10 μg·mL-1)中药物的浓度变化不大于1.9%。与本研究结果一致。

    本实验罗非鱼血浆、背肌和肝脏样品中药物浓度在10 d后均稍有升高,其范围在0.8%~5.8%之间。Vue等[1]在研究中发现,7 d内,添加浓度为1 μg·mL-1的血浆样品药物的回收率升高幅度小于8%,其原因是样品存放时间长,血浆内的(一些)未知化合物会发生分解,产生杂峰干扰。并且指出,利用HPLC法分析血浆样品,最好在提取后12 h以内进样分析。结果与本实验一致。

    致谢: 林钦研究员对本研究给予了亲切指导,戴明、王学峰、赵汉取和马延强提供了很多帮助,在此一并感谢。
  • 图  1   标准品和血浆提取物的色谱图FF为氟甲砜霉素色谱峰,CAP为内标物氯霉素色谱峰

    Figure  1.   Liquid chromatograms of standards and extracts from plasma, muscle and liver for determination of florfenicol(FF) with chloramphenicol(CAP) as internal standard(I.S.)

    图  2   氟甲砜霉素标准品曲线

    (浓度为0.03~16 μg·mL-1)

    Figure  2.   The standard curve of florfenicol

    (concentration range: 0.03~16 μg·mL-1)

    表  1   血浆、肌肉和肝脏样品工作曲线

    Table  1   The calibration curves for florfenicol in plasma, muscle and liver samples

    样品
    sample
    线性范围/μg·mL-1
    concentration range
    标准曲线回归方程
    calibration equation
    相关系数
    R
    血浆 plasma 0.03~16 C血=2.729 H-0.06 0.9998
    肌肉 muscle 0.03~16 C肌=2.939 H-0.1121 0.9995
    肝脏 liver 0.03~16 C肝=2.8336 H-0.1326 0.9986
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    表  2   不同组织样品在3个浓度水平的平均回收率(平均值±标准差%)

    Table  2   The recovery of florfenicol in the plasma, muscle and liver samples of tilapia

    浓度/μg·mL-1
    concentration
    血浆
    plasma
    肌肉
    muscle
    肝脏
    liver
    0.125 94.79±2.81 91.70±5.41 89.52±4.32
    1 96.13±2.35 96.09±1.91 89.17±3.97
    8 92.86±1.22 92.72±2.59 89.16±3.71
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    表  3   不同组织样品中药物在3个浓度水平的批内精密度(RSD%)

    Table  3   The intra-batch precision of a liquid chromatographic method to determine florfenicol in the plasma, muscle and liver samples of tilapia

    浓度/μg·mL-1
    concentration
    血浆
    plasma
    肌肉
    muscle
    肝脏
    liver
    0.125 3.75 6.45 5.61
    1 2.21 3.07 6.55
    8 2.37 2.65 4.71
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    表  4   不同组织样品中药物在3个浓度水平的批间精密度(RSD %)

    Table  4   The inter-batch precision of florfenicol in the plasma, muscle and liver samples of tilapia

    浓度/μg·mL-1
    concentration
    血浆
    plasma
    肌肉
    muscle
    肝脏
    liver
    0.125 6.27 6.26 2.92
    1 2.11 4.39 7.71
    8 2.39 4.46 3.72
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    表  5   工作标准液中氟甲砜霉素的稳定性

    Table  5   Stability of florfenicol in the working standard solutions(0~5℃)

    浓度/μg·mL-1
    concentration
    变化率/% change percent
    第2天 第46天 第48天
    8 1.3 1.2 1.2
    1 1.0 1.9 0.5
    0.125 1.5
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    表  6   罗非鱼样品中氟甲砜霉素的稳定性

    Table  6   Stability of florfenicol in the plasma, muscle and liver samples fortified at nominal concentrations of 1 μg·mL-1 florfenicol

    样品
    sample
    浓度/μg·mL-1 concentration 变化率/%
    change percent
    第2天 第11天
    血浆 1.006 1.020 1.4
    肌肉 1.049 1.107 5.8
    肝脏 1.056 1.064 0.8
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  • [1]

    Nagata T, Saeki M. Simultaneous determination of thiampenicol, florfenicol, and chloramphenicol residues in muscles of animals and cultured fish by liquid chromarography[J]. J Liq Chromatogr, 1992, 15(12): 2045-2056. doi: 10.1080/10826079208016324

    [2]

    Hormazabal V, Steffenak I, Yndestad M. Simutaneous extraction and determinition of residues of florfenicol and the metabolite florfenicol amine in fish tissues by high-performance liquid chromatography[J]. J Chromatogr, 1993, 616(1): 161-165. doi: 10.1016/0378-4347(93)80484-L

    [3]

    Martinsen B, Horsberg T E, Varma K J, et al. Single dose pharmacokinetic study of florfenicol in Atlantic salmon(Salmo salar)in seawater at 11℃[J]. Aquaculture, 1993, 112(1): 1-11. doi: 10.1016/0044-8486(93)90153-P

    [4]

    van de Riet J M, Potter R A, Christie-Fougere M, et al. Simultaneous determination of residues of chloramphenicol, thiamphenicol, florfenicol, and florfenicol amine in farmed aquatic species by liquid chromatography/mass spectrometry[J]. J AOAC Int, 2003, 86(3): 510-514. doi: 10.1093/jaoac/86.3.510

    [5]

    Lavy E, Ziv G, Soback S, et al. Clinical pharmacology of florfenicol in lactating goats[J]. Acta Vet Scand, 1991, 87(suppl): 133-136. https://www.semanticscholar.org/paper/Clinical-pharmacology-of-florfenicol-in-lactating-Lavy-Ziv/cec9be849224f5aa16c8cae80cec34bf2f2c8f55

    [6]

    Tyrpenou A E, Iossifidou E G, Psomas I E, et al. Tissue distribution and depletion of sarafloxacin hydrochloride after in-feed administration in gilthead sea bream(Sparus aurata L. )[J]. Aquaculture, 2003, 215(1-4): 291-300. doi: 10.1016/S0044-8486(02)00367-8

    [7]

    Meinertz J R, Gaikowski M P, Stehly G R, et al. Oxytetracycline depletion from skin-on fillet tissue of coho salmon fed oxytetracycline medicated feed in freshwater at temperatures less than 9℃[J]. Aquaculture, 2001, 198(1-2): 29-39. doi: 10.1016/S0044-8486(01)00512-9

    [8]

    Samuelsen O B, Pursell L, Smith P, et al. Multiple-dose pharmacokinetic study of Romet30 in Atlantic salmon(Salmo salar)and in vitro antibacterial activity against Aeromonas salmonicida[J]. Aquaculture, 1997, 152(1-4): 13-24. doi: 10.1016/S0044-8486(96)01508-6

    [9] 王群, 李健, 刘淇, 等. 诺氟沙星在养殖黑鲷和鲈鱼体内的残留比较[A]. 见: 王清印主编. 海水健康养殖的理论与实践[C]. 北京: 海洋出版社, 2003.429-435.
    [10] 胡顶飞, 沈建忠, 吴先爱. 氟苯尼考静注及肌注在鸡体内药代动力学研究[J]. 畜牧兽医学报, 2002, 33(4): 384-388. doi: 10.3321/j.issn:0366-6964.2002.04.016
    [11] 张雅斌, 张祚新, 郑伟, 等. 不同给药方式下鲤对诺氟沙星的药代动力学研究[J]. 水产学报, 2000, 24(6): 560-563. doi: 10.3321/j.issn:1000-0615.2000.06.014
    [12]

    Vue C, Schmidt L J, Stehly G R, et al. Liquid chromatographic determination of florfenicol in plasma of multiple species of fish[J]. J Chromatogr B, 2002, 780(1): 111-117. doi: 10.1016/S1570-0232(02)00441-5

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出版历程
  • 收稿日期:  2005-03-20
  • 刊出日期:  2005-03-19

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