鮸鱼早期发育的形态学初步研究

孙庆海; 施维德; 孙建璋

鮸鱼早期发育的形态学初步研究

1.
浙江省苍南县蓝天海水养殖苗种场, 浙江马站 325809
2.
浙江省平阳县南麂岛开发有限公司, 浙江鳌江 325401

详细信息

作者简介:
孙庆海(1964-)，男，工程师/场长，从事海水养殖苗种技术研究。E-mail: sunhai@tom.com

中图分类号: Q959.483
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出版历程
- 收稿日期: 2005-08-28
- 修回日期: 2005-09-22
- 刊出日期: 2005-12-19

Morphological studies on the early development of Miichthys miiuy

1.
Cangnan county, Lantian Sea Water culture Seedling Farm, Mazhan 325809, China
2.
Ping Yang Nanji Islands Developing Co., Ltd, Aojiang 325401, China

摘要

摘要:
对鱼Miichthys miiuy (Basilewsky) 胚胎和仔、稚、幼鱼的各发育阶段的形态特征进行了描述。鱼的受精卵为圆球形浮性卵，无色透明，在水温25~27℃、盐度31.9的条件下，经19 h 18 min陆续孵出仔鱼。根据胚后发育的形态特征对仔、稚、幼鱼各时期提出界定标志, 仔鱼期：初孵仔鱼发育至各鳍分化完成(1~17日龄，持续17 d)；稚鱼期：鳞片开始出现、生出枕骨棘至全身被鳞(18~32日龄，持续15 d)；33日龄以后进入幼鱼期。仔、稚、幼鱼培育水温25.8~32.2℃，盐度28.6~32.5。鱼以卵径(0.91 mm)、油球径(0.33 mm)和枕骨棘形态等的特征区别于其他石首鱼类早期发育的形态依据。
- 鱼 /
- 鱼类形态学 /
- 早期发育
Abstract:
The early morphological development of the temperate fish Miichthys miiuy were described including the observations on the embryo, larval and juvenile fish stages. The fertilized eggs are transparent and buoyant. At the temperature of 25~27℃ and salinity of 32.9, the fertilized eggs developed into larval fish in 19 h. Based on the morphological development, we have established the definition of different stages as the follows: (1) larval fish stage: 1~17 d postfertilization, development of all fins was completed; (2) juvenile fish stage: 18~32 d postfertilization, occipital bone spine appeared and the whole body was covered by scales; (3) young fish stage: 33 d postfertilization. The optimal growing temperature was 25.8~32.2℃ and the salinity was 32.5. The morphological characteristics of the egg size (0.91 mm), oil balls (0.33 mm) and occipital bone spine were found to be different from other species in Sciaenis.
- Miichthys miiuy (Basilewsky) /
- fish morphology /
- early development

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我国的珍珠贝主要包括珠母贝属(Pinctada) 的大珠母贝(P.maxima)、珠母贝(P.margaritifera)、黑珠母贝(P.nigra)、白珠母贝(P.albina)、合浦珠母贝(P.fucata)、长耳珠母贝(P.chemnitzi)和珍珠贝属的企鹅珍珠贝(Pteria penguin)等^[1-2]。这些珍珠贝是生产海水珍珠的重要母贝或具有潜在的重要经济价值，其养殖业是广东、广西和海南最具特色的海洋产业，闻名遐尔的“南珠”即为其中的合浦珠母贝所产。但部分珍珠贝种类之间形态差异小，如射肋珠母贝和合浦珠母贝仅凭形态描述很难鉴定^[2]。有的种形态变异大，不同栖息环境、不同发育阶段其形态特征均有所不同，分类鉴定容易出错，因此出现了很多同物异名^[3]。幼体发育阶段的材料由于个体小，凭形态特征进行种类分类也容易混淆。此外，合浦珠母贝、长耳珠母贝和大珠母贝种间人工杂交中是真正的杂交，或是雌核发育的结果？目前只有同工酶的实验证据^[4]，尚无DNA方面的直接证据，由于同工酶是基因表达的产物，还不能完全说明杂交后代的身份性质。对于没有外部形态特征的样品，如肌肉或内脏团组织样品，如何鉴定？因此开发种类特异(species specific)的DNA分子标记对种类鉴定、分子标记辅助育种等方面具有重要的应用价值。

随机扩增多态性DNA(random amplified polymorphic DNA，RAPD)是1990年创建的一种DNA多态检测技术^[5-6]。该技术具有简单快速和多态性较高等优点，已广泛运用于分类鉴定^[7-11]与亲缘关系分析^[12-14]、遗传多样性^[15-16]和连锁图谱构建^[17]等。阎冰等^[18]对马氏珠母贝和长耳珠母贝进行了RAPD分析，发现两者扩增带型差异较大。喻达辉和朱嘉濠^[19]对珠母贝属6个种的ITS2序列进行了分析，发现不同种间序列差异较大，但种内差异非常小，并且发现白珠母贝和黑珠母贝的序列差异也较小，认为它们可能是亚种，因此认为ITS2序列可以作为种间鉴别标记。由于DNA序列标记在应用上不是太方便，本文利用RAPD技术对7种珍珠贝进行遗传标记分析，筛选种类特异的、基于PCR的简单快速的分子标记，为种类鉴定、遗传育种等提供简单实用的遗传标记。

1. 材料和方法

1.1 实验材料

分析的种类包括珠母贝属的大珠母贝、珠母贝、黑珠母贝、白珠母贝、合浦珠母贝、长耳珠母贝和珍珠贝属的企鹅珍珠贝。其中白珠母贝采自澳大利亚，长耳珠母贝采自大亚湾，黑珠母贝和部分大珠母贝个体由中国科学院南海海洋研究所何毛贤博士惠赠，其它种采自海南三亚，采于2001年。各个种的个体数见表 1。每个个体取闭壳肌样品保存于95%的酒精中备用。

表 1 4条引物对7种珍珠贝RAPD扩增的条带数及各个种的条带数

Table 1. The RAPD fragments amplified from the 7 pearl oyster species using 4 random primers

种类(个体数) species(no. of individuals)	各引物的平均带数 average fragments per primer				总平均带数 total mean fragments
种类(个体数) species(no. of individuals)	S10	S17	S358	OPM17	总平均带数 total mean fragments
大珠母贝Pinctada maxima (5)	1.3(1~2)	5.0(4~6)	3.8(2~5)	1.3(1~2)	11.3(10~13)
珠母贝P.maritifera (3)	2.7(2~3)	5.0(4~6)	4.7(3~6)	3.0(2~4)	15.3(12~17)
黑珠母贝P.nigra (3)	2.0(1~2)	4.7(2~7)	1.3(0~3)	0.3(0~1)	8.3(4~13)
白珠母贝P.albina (3)	2.7(2~4)	3.7(3~4)	3.3(2~5)	2.7(2~4)	12.3(10~16)
合浦珠母贝P.fucata (11)	4.0(3~5)	3.8(3~5)	2.2(0~4)	1.8(1~4)	11.8(10~13)
长耳珠母贝P.chemnitzi (4)	3.0(2~4)	6.8(6~8)	1.5(1~2)	2.8(2~3)	14.0(11~17)
企鹅珍珠贝Pteria penguin (3)	2.0(1~3)	6.3(4~8)	1.7(1~2)	3.3(2~5)	13.3(9~17)
引物的平均扩增带数 total mean fragments/primer	2.7(1~5)	5.0(2~8)	2.6(0~6)	2.1(1~5)	4.9(0~8)

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1.2 模板DNA制备

每个个体DNA提取采用本实验室改进的方法，分别取20 mg左右的闭壳肌，放入1.5 mL离心管内，先加入100 μL TEN9细胞裂解缓冲液(Tris-Cl 50 mmol · L^-1，pH 9.0；EDTA 100 mmol · L^-1；NaCl 200 mmol · L^-1)，剪碎，再加入TEN9至600 μL，混匀后于56℃温浴5 min，加入SDS至终浓度为2%，混匀，56℃温浴15 min，加入蛋白酶K(20 mg · mL^-1)10 μL，于56℃消化至溶液澄清。加入15 μL RNase A，37℃反应约15 min，冷却后用常规的酚、氯仿方法纯化，乙醇沉淀DNA，干燥后加入200 μL去离子超纯水溶解，4℃存放。提取的基因组DNA样品用1%琼脂糖凝胶电泳、EB染色检测，再测定OD260和OD280，检测DNA的质量和计算浓度，配成20 ng · μL^-1的DNA备用。

1.3 RAPD扩增

RAPD反应总体积为25 μL, 包括：1× PCR Buffer, 0.2 mmol · L^-1 dNTPs, 2.0 mmol · L^-1 MgCl₂, 0.25 μmol · L^-1引物, 1U Taq DNA合成酶，20 ng DNA模板。PCR循环程序为：94℃变性5 min，然后45个循环，每个循环包括：94℃ 1 min，40℃ 1 min，72℃ 2 min。最后72℃延伸10 min。21条引物筛选出4条用于扩增分析。引物由Operon公司合成。4条引物序列为：S10：CTGCTGGGAC，S17：AGGGAACGAG，S358：TGGTCGCAGA，OPM17：TCGGTCCGGG。

1.4 扩增产物电泳检测

取10 μL扩增产物在1%琼脂糖凝胶上进行电泳分离(0.5×TBE，3 V · cm^-1恒压)，EB染色，用凝胶成像仪(SynGene)进行分析。

2. 结果

2.1 RAPD扩增结果

4条引物共扩增出57个位点，平均每条引物产生14.3个位点，其中S17和S358产生的位点数较多，分别为19和18个位点，S10和OPM17产生的位点较少，分别为9和11。种内每条引物产生的平均带数在0.3~6.8条之间(表 1)，4条引物扩增的总带数平均为8.3~15.3条，片段大小在250~2 000 bp之间(图 1)。其中黑珠母贝4条引物扩增的总带数最少，平均为每个体8.3条(表 1)。种间每条引物平均扩增2.1~5.0条(表 1)，其中，S17扩增的带最多，平均为每种5.0条，其余3条引物扩增的平均带数较接近，在2.1~2.7条之间。平均每种每条引物扩增的带数为4.9条。

图 1 引物S10在7种珍珠贝中的RAPD扩增结果

M.分子量标记; 1~5.大珠母贝; 6~8.黑珠母贝; 9~11.珠母贝; 12~14.白珠母贝; 15~17.企鹅珍珠贝; 18~21.长耳珠母贝; 22~32.合浦珠母贝

Figure 1. RAPD amplification result of the seven pearl oyster species using random primer S10

M. DNA ladder; 1~5. Pinctada maxima; 6~8. P.nigra; 9~11. P.margaritifera; 12~14. P.albina; 15~17. Pteria penguin; 18~21. Pincata chemnitzi; 22~32. P.fucata

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2.2 RAPD分子标记

S17、S358和OPM17引物可在部分种扩增出种类特异的带，可以将2种或2种以上的珍珠贝区别开来，而S10在7种珍珠贝中均可扩增出种类特异的一致性带1~2条(图 1，箭头所示)，可作为所研究种类鉴别的分子标记。

研究用S10引物对大亚湾合浦珠母贝种群28个个体进行扩增发现，有3个个体的扩增谱带明显不同于合浦珠母贝(图 2)，与图 1比较，与长耳珠母贝相同。其它个体在250 bp左右均有1条合浦珠母贝特有的一致的扩增带。

图 2 引物S10在合浦珠母贝群体扩增中检测到3个长耳珠母贝个体(10、17和24号个体)

M.分子量标记；1~28.合浦珠母贝

Figure 2. Three P.chemnitzi individuals(10, 17 and 24)were detected from P. fucata population using S10 primer

m.DNA ladder;1~28.P.fucata

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3. 讨论

物种的鉴定，以往多根据经验的积累从其外形特征进行研究，进而发展到用生化指标(同工酶等)对物种进行鉴定。然而，这些方法所得到的标记往往是基因表达后的产物，受个体发育情况和外部环境条件的影响变化较大，容易产生误差。而DNA是与身俱来的遗传物质，具有很高的稳定性。因此DNA标记是揭示物种亲缘关系最有效的分子标记。随机扩增多态性DNA(RAPD)技术作为第二代分子标记具有简单、方便、快速、多态性较高等优点，是物种鉴定的首选标记^[20]。CROSSLAND等^[10]利用RAPD标记将Littorina的形态相似的2个姊妹种L.saxatilis和L.arcana很清楚地分开。KLINBUNGA等^{[11, 16]}对泰国的5种牡蛎：Crassostrea belcheri, C.iredalei, Saccostrea cucullata, S.forskali和Striostrea mytiloides用RAPD技术进行了种类鉴定分析，结果发现C.belcheri, C.iredalei和S.cucullata能扩增出种类特异的带，而另外2种没有发现鉴别条带。可见同一条引物在多个种同时扩增出带并不十分容易。本研究通过采用RAPD技术筛选7种珍珠贝间的种类鉴定标记，4条引物中的1条引物S10可将所研究的7个种都分开，可作为种类鉴别标记。由于这7个种绝大部分都是我国的常见种，因此所获得的种间鉴别标记具有非常重要的实用价值。其它3条引物也可将部分种分开，其中S17可以将长耳珠母贝、合浦珠母贝、企鹅贝与其它贝区别开来，另外2条引物可以鉴别出2种或2种以上的珍珠贝。从扩增情况来看，每条引物扩增的带数并不多，但位点很多，说明不同种间扩增位点差异较大，表明RAPD技术在珍珠贝种类鉴定方面具有重要的开发价值。

图 1 卵子和胚胎发育

1.受精卵；2.胚盘；3.2细胞期；4.4细胞期；5.8细胞期；6.16细胞期；7.32细胞期；8.64细胞期；9.桑椹期；10.高囊胚期；11.低囊胚期；12.胚环、胚盾形式

Figure 1. Fertilized ovum and embryo development

1. fertilized egg; 2. blastoderm; 3-8. 2~64 cell stage; 9. mulberry; 10. early blastula; 11. late blastula; 12. blastoring and blastoshield

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图 2 胚胎发育和孵化出膜

1.原肠早期，外包1/3；2.原肠中期，外包1/2；3.原肠晚期，外包2/3；4.原口接近关闭；5.原口关闭；6. 胚体环卵黄囊3/5；7. 胚体环卵黄囊4/5；8.孵化出膜

Figure 2. Embro development and larvae hatching-out

1. early gastrula, with germ ring enveloping of the yolk-sac1/3; 2. middle gastrula, with germ ring enveloping of the yolk-sac1/2; 3. late gastrula, with germ ring enveloping of the yolk-sac2/3; 4. blastopore nealy closed; 5. blastopore of closed; 6. embryo encircling 3/5 of the yolk-sac; 7. embryo encircling 4/5 of the yolk-sac; 8. larva hatching-out

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图 3 仔鱼1

1. 初孵仔鱼，全长2.32 mm，体长2.20 mm；2. 全长3.33 mm，体长3.23 mm(1日龄)；3. 全长3.50 mm，体长3.35 mm(2日龄); 4. 全长3.40 mm，体长3.30 mm(3日龄)

Figure 3. Larvae 1

1.newly hatched larvae, 2.32 mm in total length, 2.20 mm in standard length; 2.3.33 mm in total length, 3.23 mm in standard length (1 d); 3.3.50 mm in total length, 3.35 mm in standard length(2 d); 4.3.40 mm in total length, 3.30 mm in standard length(3 d)

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图 4 仔鱼2

1.全长3.6 mm，体长3.5 mm(6日龄)；2.全长4.3 mm，体长4.1 mm(9日龄)；3.全长4.6 mm，体长4.4 mm(12日龄)；4.全长5.5 mm，体长4.9 mm(15日龄)；5.全长6.2 mm，体长5.3 mm(16日龄)

Figure 4. Larvae 2

1.3.6 mm in total length, 3.5 mm in standard length(6 d); 2.4.3mm in total length, 4.1 mm in standard length(9 d); 3.4.6 mm in total length, 4.4 mm in standard length(12 d); 4.5.5 mm in total length, 4.9 mm in standard length(15 d); 5.6.2 mm in total length, 5.3 mm in standard length(16 d)

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图 7 枕骨棘

1. 体长7.8 mm(18日龄)；2. 体长7.9 mm (19日龄)；3. 体长8.4 mm(22日龄); 4. 体长8.4 mm (24日龄)；5. 体长9.4 mm(28日龄)

Figure 7. Oceipitat spines

1. 7.8 mm in standard length(18 d); 2. 7.9 mm in standard length(19 d); 3. 8.1 mm in standard length(22 d); 4. 8.4 mm in standard length (24 d); 5. 9.4 mm in standard length(28 d)

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图 5 稚鱼

1. 全长9.9 mm，体长7.8 mm(18日龄)；2. 全长10.4 mm，体长7.9 mm(21日龄)；3. 全长10.4 mm，体长8.0 mm(24日龄)；4. 全长16.8 mm，体长9.4 mm(28日龄)；5. 全长22.2 mm，体长14.3 mm(32日龄)

Figure 5. Juvenile

1. 9.9 mm in total length, 7.8 mm in standard length(18 d); 2. 10.4 mm in total length, 7.9 mm in standard length(21 d); 3. 10.4 mm in total length, 8.0 mm in standard length(24 d); 4. 16.8 mm in total length, 9.4 mm in standard length(28 d); 5. 22.2 mm in total length, 14.3 mm in standard length(32 d)

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图 6 幼鱼

1. 全长24.0 mm，体长17.5 mm(33日龄)；2. 全长25.6 mm，体长18.3 mm(35日龄)；3. 全长42.1 mm, 体长31.2 mm(51日龄)；4. 全长53.0 mm，体长39.6 mm(53日龄)

Figure 6. Young fish

1. 24.0 mm in total length, 17.5 mm in standard length(33 d); 2. 25.6 mm in total length, 18.3 mm in standard length(35 d); 3. 42.1 mm in total length, 31.2 mm in standard length(42 d); 4. 53.0 mm in total length, 39.0 mm in standard length(53 d)

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表 1 鱼仔、稚、幼鱼个体的生长

Table 1 Growth of the larvae, juvenile and young fish of M.miiuy

培育天数/d rearing days	全长/mm total length		体长/mm length		培育天数/d rearing days	全长/mm total length		体长/mm length
培育天数/d rearing days	范围 range	平均 average	范围 range	平均 average	培育天数/d rearing days	范围 range	平均 average	范围 range	平均 average
初孵仔鱼	2.32~2.31	2.32	2.20~2.17	2.19	19	12.12~7.16	9.61	9.59~5.93	7.75
1	3.58~3.27	3.40	3.42~3.12	3.25	20	12.96~7.47	9.89	9.82~6.17	7.80
2	3.52~3.49	3.51	3.37~3.33	3.35	21	13.62~8.15	10.41	9.91~6.54	7.92
3	3.46~3.40	3.43	3.32~3.25	3.28	22	13.09~5.56	8.46	9.88~4.57	6.62
4	3.64~3.58	3.62	3.48~3.41	3.45	23	17.16~7.53	10.59	12.59~6.17	8.19
5	3.64~3.27	3.51	3.48~3.11	3.35	24	15.87~8.52	10.42	12.72~6.86	8.06
6	3.78~3.48	3.64	3.62~3.33	3.49	25	21.00~9.51	12.32	15.37~7.66	9.47
7	4.01~3.56	3.75	3.83~3.38	3.58	26	21.05~9.75	11.91	15.19~7.66	8.93
8	3.89~3.56	3.75	3.72~3.40	3.59	27	19.48~10.80	13.05	14.62~7.84	9.36
9	4.03~3.70	3.87	3.85~3.52	3.69	28	22.26~11.23	16.84	15.90~8.33	9.43
10	4.38~3.70	3.94	4.20~3.52	3.75	29	24.70~12.72	17.54	18.16~9.88	12.93
11	5.16~3.91	4.31	4.94~3.73	4.13	30	24.52~15.74	20.00	17.70~11.73	14.51
12	5.01~3.46	4.65	4.83~3.30	4.47	31	28.34~18.00	21.01	20.90~13.24	15.34
13	6.24~4.94	5.46	5.74~4.72	5.18	32	30.50~18.90	22.23	22.24~12.90	14.30
14	5.68~5.00	5.25	5.31~4.75	4.96	33	29.12~19.92	24.01	21.22~14.90	17.49
15	6.61~4.57	5.55	5.74~4.20	4.91	34	33.54~22.30	25.80	24.00~15.70	19.62
16	9.41~5.00	6.23	7.80~4.38	5.33	35	29.00~22.00	25.57	20.70~15.30	18.26
17	9.77~5.46	7.39	8.40~4.72	6.22	36	26.00~21.00	23.91	18.30~15.00	16.93
18	10.99~7.10	8.64	8.77~5.93	7.07

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表 2 鱼仔鱼、稚鱼和幼鱼身体各部分占体长或头长的比例

Table 2 Proportion of different parts of the body for the larvae, juvenile and young fish of M.miiuy

		仔鱼larvae				稚鱼juvenile				幼鱼young fish
全长/mm total length		3.27	4.01	5.00	6.61	12.12	15.87	21.00	24.70	28.00	29.12	30.50	33.54
体长/mm length of body		3.12	3.83	4.79	5.74	9.59	12.72	15.37	18.16	20.50	21.20	22.24	24.00
占体长的百分比/% percentage of length	头长head length	24.5	22.60	26.3	26.90	29.60	30.10	30.50	26.90	30.20	30.20	28.30	28.80
	头高height of head	19.2	21.00	24.00	24.70	24.50	25.20	23.30	18.20	20.60	20.30	19.30	20.80
	体高body depth	24.9	22.60	27.10	29.00	31.50	29.10	31.20	27.50	26.30	28.70	26.20	26.20
	肛前距distance between tip of snout and anus	32.0	35.50	40.50	45.20	52.80	54.40	60.20	60.00	28.70	59.50	59.10	60.90
	背鳍褶高height of dorsal fin-fold	8.30	3.20	2.60	1.90					59.50
	腹鳍褶高height of ventral fin-fold	6.70	9.00	9.80	9.20
	背鳍基长length of dorsal base56.60					56.60	51.90	50.20	57.80	59.50	50.90	50.50	54.20
	臀鳍基长length of anal base13.50					13.50	13.80	14.50	13.60	12.80	12.80	12.80	13.20
头长/mm head length		0.77	0.86	1.26	1.54	2.84	3.38	4.69	4.88	6.20	6.40	6.30	6.90
占头长的百分比/% percentage of head length	吻长snout length	13.10	24.30	29.40	26.40	24.80	25.80	26.30	30.70	27.40	23.20	25.50	23.80
	眼径orbit diameter	35.60	40.00	36.30	34.40	26.90	25.80	23.70	27.90	25.80	21.20	22.50	23.20
	头高height of head	78.40	92.80	91.20	92.00	82.60	83.90	76.30	67.60	68.10	67.20	68.30	72.50

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表 3 鱼胚胎发育过程

Table 3 The process of the embryos development of M.miiuy

发育时期 development period	距离受精时间/h time after the fertilization	阶段持续时间/min duration	主要特征 principal characteristics
受精卵 fertilized egg			平均卵径910 μm，油球径333 μm。
胚盘形成 blostoderm	0:05	11	扁平状，最大直径617 μm。
二细胞期 2-cell stage	0:16	15	盘状分割类型，第一次分裂为2个等大细胞。
四细胞期 4-cell stage	0:31	18	第二次分裂为纬裂，分裂为相等的4细胞。
八细胞期 8-cell stage	0:49	17	第三次经分裂，为8细胞。
十六细胞期 16-cell stage	1:06	16	第四次纬裂，分割为16个细胞。
三十二细胞期 32-cell stage	1:22	12	第五次分割，为32个细胞(其中间4个细胞开始水平分裂)。
六十四细胞期 64-cell stage	1:36	10	第六次分裂，为64个细胞。
桑椹期 mulberry	1:46	25	第七次分裂，经、纬裂为128个细胞。
高囊胚期 early blastula	2:11	50	卵裂胚盘在卵黄囊上隆起呈高囊胚，胚盘周围有多核体。
低囊胚期 late blastula	3:01	190	胚盘基部细胞向卵黄囊外包，而呈低囊胚。
原肠早期 early gastrula	6:11	75	胚环，胚盾出现。
原肠中期 middle gastrula	7:26	75	胚环外包1/2，神经索出现。
原肠晚期 late gastrula	8:41	145	胚环外包2/3，肌节2对，视泡、脑形成。
胚环外包3/4 embryo enveloping 3/4	11:06	65	胚环外包3/4，肌节4对，胚盾前半部出现黑色素。
原口接近关闭 blastopore nearly closed	12:11	97	肌节9对，原口接近关闭，胚体两侧具2纵列黑色素细胞，脑分前、中、后三部分。
原口关闭 closure of blastopore	13:48	140	肌节13对，视囊晶体、听囊、心脏出现，黑色素增多、增浓。
胚体环卵黄囊3/5 encircling 3/5 of the yolk-sac	16:08	135	肌节23对，油球半球具星状黑色素细胞。
接近孵出 nearly hatching;	18:23	55	胚体环卵黄囊4/5胚体不时扭动，特别是尾部，肌节26对。
初孵仔鱼 newly hatched larvae	19:18		仔鱼孵出，呈蝌蚪状，肌节26对，全身具黑色素，特别是背部两侧特别明显。
注：水温25~27℃，盐度31.9 Note: water temperature 25~27℃, salinity 31.9.

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表 4 鱼胚胎发育与水温的关系

Table 4 Relationship between embryonic development of M.miiuy and water temperature

批次 batch	孵化水温范围/℃ water temperature for hatching	仔鱼孵化时间 hatching time of larvae	孵化率/% hatching rate
1	25~27	19 h 18 min	50.6
2	26.5~27.5	18 h	46.8
3	29.6~30.2	16 h	40.5

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表 5 石首鱼科6种鱼早期发育形态的比较

Table 5 Comparisons of morphology of the early development of six Siaenoid fishes

	皮氏叫姑鱼 Johnius belengerii	褐毛鲿Megalonibea fusca	状黄姑鱼Nibea miichthioides	鱼Miichthys miiuy	大黄鱼Pseudosciaena crocea	棘头梅童鱼Collichthys lucidus
卵径/mm diameter of ovum	0.71~0.77	0.81~0.86	0.97~1.00	0.86~0.93	1.09~1.52	1.09~1.20
油球径/mm diameter of oil globule	0.19~0.20	0.21	0.26	0.33	0.36~0.40	0.46~0.53
初孵仔鱼全长/mm total length of initial larvae	1.25	2.10	2.32	2.32	3.30	2.30
枕骨棘 occipital bone spine	无	6个，一律后倾	2个，微弱	6个，扇形排列	7个，扇形排列	5个，扇形排列
背鳍 dorsal fin	Ⅸ~Ⅹ，I-28-29	Ⅹ，I-29	Ⅹ，I-28	Ⅸ，I-29	Ⅷ，1-31-33	Ⅷ，1-24-25
鳞 scute	被栉鳞，背鳍鳍节部、臀鳍有小圆鳞	被栉鳞	被栉鳞，吻部、颊部被圆鳞	被栉鳞，吻部、鳃盖、鳍基部被圆鳞	头部、体前部、鳍部被圆鳞，体后部被栉鳞	被圆鳞
幼鱼体色 body color of juvenile	浅灰	黑灰	浅灰黄	灰黄—淡黄	淡黄色	淡黄—灰黑

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表 6 鱼早期发育各时期的界定

Table 6 The definition of each stages on the early development of M.miiuy

发育时期 development periods	持续时间 /d duration	日数/d days	全长/mm total length		特征 characteristics	界定标准 standard of definition
发育时期 development periods	持续时间 /d duration	日数/d days	平均 average	变幅 range	特征 characteristics	界定标准 standard of definition
仔鱼前期prelarvae	6	1~6	2.31~3.51	2.31~3.64	开口、卵黄囊、油球消失	油球消失
仔鱼后期postlarvae	11	7~17	3.64~6.23	3.47~9.41	胸鳍、尾鳍、臀鳍、腹鳍、背鳍完备	各鳞齐全
稚鱼期juvenile	15	18~32	7.39~21.00	5.46~30.50	枕骨棘发育完备，鳍褶完全消失，全身被鳞	全身被鳞
幼鱼早期earlier stage of young fish	23	33以后	22.23~25.57	18.90~33.54	除尾部矛形之外，基本尚与成鱼相似	性腺尚未发育

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参考文献(16)

[1]	孟庆闻, 缪学祖, 张菡初, 等. 鱼类学(上册)[M]. 北京: 农业出版社, 1960.
[2]	朱元鼎, 张春霖, 成庆泰. 东海鱼类志[M]. 北京: 科学出版社, 1963. 286-294.
[3]	朱元鼎, 罗云林, 伍汉霖. 中国石首鱼分类系统的研究和新科新属的叙述[M]. 上海: 上海科技出版社, 1963.18-74.
[4]	朱元鼎. 福建鱼类志(下册)[M]. 福州: 福建科学技术出版社, 1985.101-136.
[5]	孟庆闻, 苏锦祥, 缪学祖. 鱼类分类学[M]. 北京: 中国农业出版社, 1995.713-726.
[6]	齐孟鹗, 张恩照, 宋政修. 渤海、黄海、东海几种主要发声鱼类(石首鱼科)群体声的研究[A]. 见: 中国科学院海洋研究所编. 海洋科学集刊[C]. 北京: 科学出版社, 1984, 21: 253-254.
[7]	孙庆海, 陈诗凯. 鱼规模化繁育技术研究[J]. 浙江海洋学院学报(自然科学版), 2003, 23(3): 273-276.
[8]	Harumi Yamada, Umeyoshi Yamada. Descriptive morphology of juvenile stages of two sciaenids, Miichthys miiuy and Pennahia macrocephalus, from the East China Sea[J]. Ichthyol Res, 1999, 46(1): 93-99.
[9]	Desse J, Desse-Berset N. A large-size Sciaenidae (Televstej perciformes) belonging to the genus Megalonibea on the Bu Ba Louchistan of Pakistan[J]. Cybiem, 1999, 23(4): 345-354.
[10]	沙学绅. 大黄鱼的卵子和仔、稚鱼的形态特征[A]. 见: 中国科学院海洋研究所编. 海洋科学集刊[C]. 北京: 科学出版社, 1962, 2: 31-49.
[11]	雷霁霖, 樊宁臣, 郑澄伟. 黄姑鱼(Nibea albiflora Richardson) 胚胎及仔、稚鱼形态特征的初步观察[J]. 海洋水产研究, 1981, (2): 77-84.
[12]	吴鼎勋, 洪万树, 张其永. 状黄姑鱼的早期发育研究[J]. 台湾海峡, 1998, 17(2): 149-154.
[13]	胡石柳. 状黄姑鱼人工繁育与育苗技术的研究[J]. 集美大学学报(自然科学版), 1999, 4(1): 33-40.
[14]	刘家富. 人工育苗条件下的大黄鱼胚胎发育及其仔、稚鱼形态特征与生态的研究[J]. 现代渔业信息, 1999, 14(7): 21-24.
[15]	方家仲, 褚茂斌, 肖勤, 等. 大黄鱼早期发育的形态学研究[J]. 海洋科学, 2003, 27(6): 1-6.
[16]	孙庆海, 孙建璋, 施维德. 褐毛鲿仔、稚、幼鱼形态特征及其生态习性的初步观察[J]. 浙江海洋学院学报(自然科学版), 2005, 24(2): 105-113.

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图(7) / 表(6)

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1. 材料和方法
1.1 实验材料
1.2 模板DNA制备
1.3 RAPD扩增
1.4 扩增产物电泳检测
2. 结果
2.1 RAPD扩增结果
2.2 RAPD分子标记
3. 讨论

鮸鱼早期发育的形态学初步研究

作者简介: 孙庆海(1964-)，男，工程师/场长，从事海水养殖苗种技术研究。E-mail: sunhai@tom.com

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