Discussion on enhancement species of artificial reefs area of Guangdong
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摘要:
以1964~1965年广东沿海没有捕捞过度的渔业资源状况作为处于良好状态的资源结构，根据2002~2004年广东16个人工鱼礁区的渔业资源本底调查结果研究了广东沿海渔业资源结构的历史变动，结合有关资料，提出了广东人工鱼礁区可供选择的增殖放流种类为：鱼38种、虾13种、龙虾4种、蟹5种、贝18种、海参8种和海藻27种。指出增殖放流种类的确定要因地制宜多方面考虑。
Abstract:Taking the fishery stocks status of no-overfishing in the coast of Guangdong in 1964~1965 as stock structure in good condition, according to the result of background survey of 16 artificial reefs area of Guangdong during 2002~2004, the historical change of stock structure of the coast of Guangdong had been studied, combined with some relative data, the species of enhancement for the artificial reefs area of Guangdong were put forward to choose: 38 species of fish, 13 species of shrimp, 4 species of lobster, 5 species of crab, 18 species of shellfish, 8 species of holothurian, 27 species of seaweed. Point out that the determination of the species of enhancement should be adjusted measures to local conditions and considered in many aspects.
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Keywords:
- artificial reefs area of Guangdong /
- enhancement species /
- discussion
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有益菌在水产养殖中的应用越来越多，能作为有益菌的种类有芽孢杆菌、乳酸菌、气单胞菌、假单胞菌、光合细菌、硝化细菌等。这些菌大多是从养殖水体、底泥、水产动物的体内分离筛选出来的，有的用于净化水质，有的用于分解底泥，有的用于抑制病原微生物，有的用于增强水产动物的免疫力等等。
乳酸菌是一类能从可发酵的碳水化合物产生大量乳酸的革兰氏阳性细菌的通称[1]。乳酸菌在恒温动物的胃肠内的数量很多，是优势菌群之一，而在水产动物中数量相对较少。乳酸菌在人、恒温动物、食品中的应用很多，研究得也较深入，作用机制也已较清楚；在水产养殖上的应用研究多集中在对病原体的抑制、提高水产动物免疫力、鱼类体内栖息情况等方面[2]。近年来，乳酸菌作为EM菌剂的主导菌，开始用于水产养殖水质净化，收到良好效果。但是，水产养殖环境中各种因子的变化具有多样性特点，本文探讨了在实验室条件下pH、盐度、温度、溶解氧等环境因子对乳酸杆菌LH生长的影响，以期为LH菌株应用于水产养殖生产提供指导参数。
1. 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 菌种
乳酸杆菌LH为中国水产科学研究院南海水产研究所健康养殖技术中心分离保种的菌种。
1.1.2 培养基
MRS液体培养基：胰蛋白胨10 g，酵母提取物5 g，柠檬酸氢二铵2 g，葡萄糖20 g，CH3COONa · 3H2O 5 g，吐温80 1 mL，K2HPO4 2 g，MgSO4 · 7H2O 0.5 g，MnSO4 · H2O 0.25 g，蒸馏水1 000 mL，pH 6.9±0.1，煮沸溶解用滤纸过滤后121℃灭菌15 min；MRS固体培养基：在MRS液体培养基中加入1.5%的琼脂，用于乳酸杆菌LH的活菌计数。
1.1.3 仪器
UV-7504紫外可见分光光度计：在600 nm波长下测定菌液的光密度(OD)。
1.2 方法
1.2.1 实验菌准备
将保存的菌种活化后接入200 mL MRS液体培养基中，置于30℃恒温箱中培养24 h备用，经平板涂布计数菌量达1010 CFU ·mL-1。
1.2.2 生长曲线测定
将备好的实验菌按1%的量接入MRS液体培养基中，设3个平行，在30℃的培养箱中培养，在12、24、36、48、60、72、84和96 h取2平行样稀释到一定浓度均匀涂布于MRS平板，在30℃下培养24 h计数。分别以时间为横坐标，lgCFU · mL-1为纵坐标，作生长曲线图(图 1)。
1.2.3 起始pH对乳酸杆菌LH生长的影响
用HCl和NaOH溶液将培养基初始pH分别调节到3、4、5、6、7、8、9和10，每组设3个平行，pH采用精密pH试纸测定。按1%的接种量接入备好的实验菌，置于30℃下培养。每12 h取样，测定OD值。
1.2.4 盐度对乳酸杆菌LH生长的影响
用海水素将培养基盐度分别调节为0、5、10、15、20、25、30、35和40，每组设3个平行，盐度用盐度计测定。按1%的接种量接入实验菌，在30℃下培养。每12 h取样，测定OD值。
1.2.5 温度对乳酸杆菌LH生长的影响
按1%的接种量接入实验菌，分别在5、15、25、30和40℃下培养，每组设3个平行。每12 h取样，测定OD值。
1.2.6 溶解氧对乳酸杆菌LH生长的影响
在锥形瓶中分别装入相同量的培养基，在30℃下分别采用静置培养、摇床振荡培养(120 r · min-1)和用灭菌石蜡封隔在培养基上静置培养的方法，每组设3个平行。每12 h取样，测定OD值。
2. 结果
2.1 乳酸杆菌LH的生长曲线
乳酸杆菌LH的生长曲线见图 1。可以看出，接种24 h后乳酸杆菌LH进入稳定期，60 h后进入衰亡期。
2.2 起始pH对乳酸杆菌LH生长的影响
不同起始pH条件下，LH菌株的生长情况见图 2。在各起始pH下LH都能较好地生长，最适pH为6~7。pH 3~6，随着起始培养pH的升高，LH的发酵速度越快；pH 7~10，随着起始培养pH的升高，LH的发酵速度逐渐减慢。
2.3 盐度对乳酸杆菌LH生长的影响
不同盐度对乳酸杆菌LH生长的影响见图 3。可以看出，LH在各盐度条件下都能生长，随着盐度的升高，LH菌株的发酵速度呈下降趋势。试验表明，该菌株对盐度具有较广的耐受性，可在淡、海水域中应用。
2.4 温度对乳酸杆菌LH生长的影响
不同温度对乳酸杆菌LH生长的影响见图 4。从5~30℃，随着温度的上升，LH的生长加快；而30、40℃下的生长速度基本一致，说明LH的最适生长速度为30~40℃。
2.5 溶解氧对乳酸杆菌LH生长的影响
不同的溶解氧条件下LH的生长见图 5。各种条件下的生长速度基本一致，说明溶解氧并不是该菌生长的制约因素。
3. 讨论
微生物在其生命活动过程中，会改变外界环境pH，这就是通常遇到的培养基的原始pH在培养微生物过程中会时时发生改变的原因[3]。乳酸菌在发酵过程中产生大量的乳酸，可使培养液的pH值下降，经本实验测定pH为10的发酵液中接种后14 h，发酵液的pH已降为6.0，随着发酵的继续进行pH还继续下降，这就抑制了乳酸菌的生长，如果能在发酵的过程中保持pH在6~7之间，将能促进乳酸菌的生长。闫征等[4]发现随着pH值下降，乳酸菌的生长受到抑制，认为乳酸的积累是抑制乳酸菌生长的直接原因，而氢离子对乳酸菌生长的影响是间接的，同时发现用乳酸调节培养基初始pH值的抑制作用要比用HCl调节的明显。方祥等[5]发现乳酸菌O-2菌株接种后2 h内pH变化较小，说明该菌株在这段时间内产酸较少，但在2 h后pH迅速下降，14 h的达到最低(pH=3.1)。不同类型微生物对渗透压变化的适应能力不尽相同，大多数微生物在0.5~3的盐浓度范围内可正常生长[6]，乳酸杆菌LH的生长速度随着盐度的升高而减慢，在盐度为40的条件下依然能生长，能适应的盐度范围较广。温度是影响微生物生长最重要的因素之一，对某一具体微生物来说，有的生长温度很宽，有的则很窄，这与它们长期生存的生态环境是否稳定有很大关系，本实验的结果表明，乳酸杆菌LH的生长最适温度为30~40℃。氧对微生物的生命活动有着极其重要的影响，乳酸杆菌LH在溶解氧高或低的条件下都能很好生长，是可在分子氧存在下进行厌氧生活的厌氧菌。在池塘养殖水体中，中下层水的溶解氧一般较低，病原菌容易滋生，如在其中投入乳酸菌使其成为优势菌，可抑制病原菌的繁殖。一般水产养殖在养成期间环境的温度、盐度和pH值的变动范围分别为20.0~35.0℃、0~38和6.9~8.7，通过环境因子对LH菌株生长影响的研究，发现池塘养殖的环境条件适宜该菌株的生长条件。从理论上讲，LH菌株可应用于养殖池塘中。
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图 1 2002~2004年广东人工鱼礁区资源密度
Figure 1. Stock density of artificial reefs area of Guangdong surveyed in 2002~2004
表 1 2002~2004年广东人工鱼礁区渔获种类
Table 1 Catch species of artificial reefs area of Guangdong surveyed in 2002~2004
类群
group name种
species科
family目
order鱼类 235 74 20 虾类 27 5 1 龙虾类 1 1 - 蟹类 40 10 - 虾蛄类 9 1 1 头足类 12 4 3 贝类 44 26 10 棘皮动物 6 6 4 
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表 2 近岸海湾河口型主要底层经济鱼类渔获状况
Table 2 Catch status of major demersal commercial fish of nearshore, gulf and estuary
种类
species2002~2004拖网
trawl2002~2004刺网
gill net1964~1965资源密度
stock density/kg·km-2近年与往年资源密度比较
comparison of recent stock density with former/times资源密度
stock density/kg·km-2出现率
occurrence/%渔获率
catch rate/kg·hm-2·h-1出现率
occurrence/%黑鲷(Sparus macrocephalus) 6.470 3.33 0.007 3.23 0.295 21.94 中华海鲇(Arius sinensis) 4.128 6.67 0.016 6.45 0.794 5.20 黄鳍鲷(Sparus latus) 4.017 6.67 0.005 19.35 0.107 37.41 龙头鱼(Harpodon nehereus) 2.900 23.33 0.891 35.48 5.362 0.54 海鲇(Arius thalassinus) 1.396 3.33 0.000 0.00 1.901 0.73 大鳞舌鳎(Cynoglossus macrolepidotus) 1.217 46.67 0.018 35.48 0.189 6.43 叫姑鱼(Johnius dussumieri) 1.172 50.00 0.027 54.84 9.961 0.12 褐菖鲉(Sebastiscus marmoratus) 1.171 6.67 0.002 22.58 3.845 0.30 白姑鱼(Argyrosomus argentatus) 0.904 40.00 0.028 48.39 14.793 0.06 多鳞鱚(Sillago sihama) 0.807 40.00 0.003 29.03 0.005 152.49 中华舌鳎(Cynoglossus bilineatus) 0.635 6.67 0.018 19.35 1.350 0.47 斑头舌鳎(Cynoglossoides puncticeps) 0.564 23.33 0.002 16.13 1.365 0.41 双棘黄姑鱼(Nibea diacanthus) 0.325 3.33 0.095 9.68 0.139 2.34 斑鳍白姑鱼(Argyrosomus pawak) 0.198 3.33 0.000 0.00 15.789 0.01 棘头梅童鱼(Collichthys lucidus) 0.084 12.50 0.024 16.13 5.090 0.02 花鲈(Lateolabrax japonicus) 0.044 6.67 0.000 0.00 0.239 0.18 平鲷(Rhabdosargus sarba) 0.007 3.33 0.025 3.23 3.501 0.00 大黄鱼(Pseudosciaena crocea) 0.000 0.00 0.002 3.23 3.665 0.00 黄姑鱼(Nibea albiflora) 0.000 0.00 0.000 0.00 5.180 0.00 真鲷(Pagrosomus major) 0.000 0.00 0.000 0.00 3.501 0.00 鮸鱼(Miichthys miiuy) 0.000 0.00 0.000 0.00 2.361 0.00 尖吻鲈(Lates calcarifer) 0.000 0.00 0.000 0.00 0.202 0.00
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表 3 大陆架型主要底层经济鱼类渔获状况
Table 3 Catch status of major demersal commercial fish of shelf species
种类
species2002~2004拖网
trawl2002~2004刺网
gill net1964~1965资源密度(< 150m)
stock density(< 150m)/kg·km-21964~1965资源密度(< 30m)
stock density(< 30m)/kg·km-2资源密度
stock density/kg·km-2出现率
occurrence/%渔获率
catch rate/kg·hm-2·h-1出现率
occurrence/%海鳗(Muraenesox cinereus) 2.334 6.67 0.043 6.45 27.251 20.248 带鱼(Trichiurus haumela) 1.849 30.00 0.009 25.81 23.009 57.708 细鳞鯻(Therapon jarbua) 0.918 3.33 0.003 12.90 0.395 11.390 刺鲳(Psenopsis anomala) 0.365 6.67 0.100 12.90 13.443 9.618 条尾绯鲤(Upeneus bensasi) 0.018 3.33 0.000 0.00 20.912 0.253 多齿蛇鲻(Saurida tumbil) 0.015 3.33 0.006 6.45 61.668 11.390 红笛鲷(Lutjanus sanguineus) 0.000 0.00 0.000 0.00 41.990 2.531 长尾大眼鲷(Priacanthus tayenus) 0.000 0.00 0.000 0.00 32.390 10.124 二长棘鲷(Parargyrops edita) 0.000 0.00 0.000 0.00 24.393 40.244 断斑石鲈(Pomadasys hasta) 0.000 0.00 0.000 0.00 16.672 60.745
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表 4 岩礁珊瑚礁型主要经济鱼类渔获状况
Table 4 Catch status of major reef and coral reef species
种类
specie2002~2004拖网
trawl2002~2004刺网
gill net1964~1965资源密度
stock density/kg·km-2近年与往年资源密度比较
comparison recent stock density with former/times资源密度
stock density/kg·km-2出现率
occurrence/%渔获率
catch rate/kg·hm-2·h-1出现率
occurrence/%橙点石斑鱼(Epinephelus bleekeri) 1.490 3.33 0.001 3.23 3.516 0.42 青石斑鱼(Epinephelus awoara) 0.575 3.33 0.002 3.23 1.144 0.50 六带石斑鱼(Epinephelus sexfasciatus) 0.210 6.67 0.000 3.23 1.213 0.17 云纹石斑鱼(Epinephelus moara) 0.100 3.33 0.010 6.45 0.323 0.31 勒氏笛鲷(Lutjanus russelli) 0.000 0.00 0.002 6.45 0.453 0.00 斜纹胡椒鲷(Plectorhynchus goldmanni) 0.000 0.00 0.017 3.23 0.655 0.00 画眉笛鲷(Lutjanus vitta) 0.000 0.00 0.005 3.23 6.283 0.00 胡椒鲷(Plectorhynchus pictus) 0.000 0.00 0.0003 3.23 0.731 0.00 线纹笛鲷(Lutjanus lineolatus) 0.000 0.00 0.0000 0.00 9.474 0.00 紫红笛鲷(Lutjanus argentimaculatus) 0.000 0.00 0.0000 0.00 1.874 0.00
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表 5 中上层主要经济鱼类渔获状况
Table 5 Catch status of major pelagic species
种类
species2002~2004拖网
trawl2002~2004刺网
gill net1964~1965资源密度
stock density/kg·km-2近年与往年资源密度比较
comparison recent stock density with former/times资源密度
stock density/kg·km-2出现率
occurrence/%渔获率
catch rate/kg·hm-2·h-1出现率
occurrence/%银鲳(Pampus argenteus) 1.419 4.73 0.050 6.45 4.680 0.30 鳓(Ilisha elongata) 0.776 2.59 0.013 9.68 1.037 0.75 斑鰶(Clupanodon punctatus) 0.582 41.94 0.176 9.68 1.181 0.49 丽叶鲹(Caranx kalla) 0.407 1.36 0.020 19.35 0.982 0.41 印度鳓(Ilisha indica) 0.274 0.91 0.012 3.23 0.090 3.05 凤鲚(Coilia mystus) 0.244 6.67 0.049 19.35 0.018 13.83 油魣(Sphyraena pinguis) 0.212 3.33 0.002 3.23 2.918 0.07 乌鲳(Formio niger) 0.167 0.56 0.000 0.00 9.640 0.02 中华小沙丁鱼(Sardinella nymphaea) 0.000 0.00 1.181 12.90 0.084 0.00 鲻(Mugil cephalus) 0.000 0.00 0.210 12.90 0.069 0.00 大甲鲹(Megalaspis cordyla) 0.000 0.00 0.082 6.45 0.209 0.00 裘氏小沙丁鱼(Sardinella jussieu) 0.000 0.00 0.024 6.45 0.034 0.00 金色小沙丁鱼(Sardinella aurita) 0.000 0.00 0.020 9.68 0.005 0.00 羽鳃鲐(Rastrelliger kanagurta) 0.000 0.00 0.007 3.23 0.008 0.00 前鳞骨鲻(Osteomugil ophuyseni) 0.000 0.00 0.003 3.23 0.069 0.00 竹䇲鱼(Trachurus japonicus) 0.000 0.00 0.002 3.23 1.389 0.00 鲐(Pneumatophorus japonicus) 0.000 0.00 0.002 3.23 0.387 0.00 鮻(Liza haematocheila) 0.000 0.00 0.001 3.23 0.069 0.00 花鰶(Clupanodon thrissa) 0.000 0.00 0.001 3.23 0.004 0.00 蓝圆鲹(Decapterus maruadsi) 0.000 0.00 0.000 0.00 18.977 0.00 六指马鮁(Polynemus sextarius) 0.000 0.00 0.000 0.00 10.108 0.00 斑点马鲛(Scomberomorus guttatus) 0.000 0.00 0.000 0.00 9.417 0.00 康氏马鲛(Scomberomorus commersoni) 0.000 0.00 0.000 0.00 1.908 0.00 军曹鱼(Rachycentron canadum) 0.000 0.00 0.000 0.00 0.941 0.00 鲥鱼(Macrura reevesii) 0.000 0.00 0.000 0.00 0.033 0.00
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表 6 主要经济虾类渔获状况
Table 6 Catch status of major commercial shrimp
种类
specie2002~2004 1982 鱼礁区
artificial reefs area/kg·km-2粤西(< 30m)
western of Guangdong sea(< 30m)/kg·km-2珠江口(< 30m)
outside the Pearl River Estuary (< 30m)/kg·km-2=亨氏仿对虾(Parapenaeopsis hungerfordi) 3.031 0.127 2.999 刀额新对虾(Metapenaeus ensis) 2.649 4.934 8.114 长毛对虾(Penaeus penicillatus) 2.239 0.635 4.406 周氏新对虾(Metapenaeus joyneri) 1.150 2.750 10.733 短沟对虾(Penaeus semisulcatus) 0.758 - 2.418 近缘新对虾(Metapenaeus affinis) 0.748 23.025 2.588 哈氏仿对虾(Parapenaeopsis hardwickii) 0.508 4.382 0.624 中型新对虾(Metapenaeus intermedius) 0.413 3.385 0.680 墨吉对虾(Penaeus merguiensis) 0.181 0.572 1.361 日本对虾(Penaeus japonicus) 0.094 0.914 1.304 宽沟对虾(Penaeus latisulcatus) 0.000 - 2.835 斑节对虾(Penaeus monodon) 0.000 - 0.794 中国对虾(Penaeus orientalis) 0.000 - -
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表 7 2002~2004年主要经济蟹类渔获状况
Table 7 Catch status of major commercial crab surveyed in 2002~2004
种类
species资源密度
stock density/kg·km-2出现率
occurrence/%红星梭子蟹(Portunus sanguinolentus) 22.167 30.00 锈斑蟳(Charybdis feriatus) 13.973 50.00 三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus) 8.833 13.33 远海梭子蟹(Portunus pelagicus) 3.340 13.33 锯缘青蟹(Scylla serrata) 0.000 0.00
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表 8 2002~2004年主要经济贝类渔获情况
Table 8 Catch status of major commercial shellfish surveyed in 2002~2004
种类
species资源密度
stock density/kg·km-2出现率
occurrence/%种类
species资源密度
stock density/kg·km-2出现率
occurrence/%近江牡蛎(Ostrea rivularis) 15.812 18.75 褐蚶(Scapharca tenebrica) 1.026 12.50 衣硬蓝蛤(Solidicorbula tunicata) 6.155 12.50 栉江珧(Pinna pectinata) 1.008 6.25 习见蛙螺(Bursa rana) 2.818 81.25 毛蚶(Scapharca subcrenata) 0.729 56.25 泥东风螺(Babylonia lutosa) 2.096 6.25 法螺(Charonia tritonis) 0.370 18.75 球蚶(Scapharca pilula) 1.737 6.25 华贵栉孔扇贝(Chlamys nobilis) 0.145 12.50 马氏珠母贝(Pinctada martensii) 1.177 12.50 波纹巴非蛤(Paphia undulata) 0.113 12.50
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