Analysis on genetic diversity of six cultured stocks of Litopenaeus vannamei
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摘要:
中国多批次引进凡纳滨对虾Litopenaeus vannamei并结合生产开展了相对独立的育苗工作，但对引进群体及引进后留种形成的本地群体的遗传变异水平缺乏了解，不利于种质管理及利用。此研究采用AFLP技术对抽查的6个养殖群体进行分析，发现进口群体具有相对较高的遗传多样性水平；养殖性能较好的东方、海星和旭明群体遗传多样性水平与进口群体相近；而乾塘群体遗传变异水平最高，推测可能是与其种质混杂有关；广益群体遗传多样性水平最低，可能已出现近交衰退。通过对各个群体间的遗传距离进行分析，为下一步根据亲缘关系的远近开展群体间杂交育种提供技术依据。
Abstract:Many batches of Litopenaeus vannamei were introduced to China and used as broodstocks to reproduce relatively independently. Analysis on genetic diversity of six cultured stocks in south China revealed that genetic diversity level of the stock introduced from Hawaii was relatively high, and Dongfang, Haixing and Xuming stocks were close to the introduced one. Genetic diversity level of Qiantang stock was the highest compared with that of Dongfang, Haixing, Xuming, and Guangyi stocks, suggesting that Qiantang stock was contaminated by other stocks. Genetic diversity level of Guangyi stock was the lowest, suggesting inbreeding depression. Genetic distance among stocks was evaluated and a dendrogram tree was constructed using UPGMA method, which could be useful for selection of distant broodstocks for outbreeding in the near future.
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在天然环境和养殖池塘中，对虾摄食的饵料种类非常多，食谱广泛[1-7]，但同时对虾对某些饵料种类表现出明显的偏好，在多种饵料同时存在时表现出明显的选择性[8, 9]。以往的研究发现饵料密度、寻觅的难易、处理的难易等因素会影响动物对饵料的选择性[10-16]，这种选择性部分或全部地受到使摄食过程中获得的能量净值与处理食物消耗能量的比值最大化规律的支配[12, 17, 18]。在实验条件下，不同饵料均过量同时提供时，尽管对虾偏好某种饵料，对虾也摄食其它饵料[8]。对虾的这种杂食性行为显然具有某些优势，如Chamberlain和Lawrene[20](1981)发现南美白对虾同时摄食鱿鱼、虾类、多毛纲动物和蛤肉时生长要比单独摄食其中任何一种饵料时生长要快。日本对虾同时摄食鳀鱼和蛤时生长比仅摄食其中一种饵料好[8]。对虾杂食性可能具有的其它优点包括通过不同饵料的搭配来改善摄入食物的营养平衡和能量特征，从而达到对饵料资源的节约和更有效利用。本实验以中国明对虾Fenneropenaeus chinensis为研究对象，对这些可能的优越性进行探讨。
1. 材料和方法
1.1 饵料的准备
实验用的5种饵料分别为沙丁鱼肌肉(FF，除去头、内脏、骨、鳞、鳍的鱼)、鹰爪虾肌肉(SF，除去头、壳、内脏)、菲律宾蛤仔足肌(CF，蛤蜊的斧足)、沙蚕(PW，日本刺沙蚕)和配合饲料(FD，海马牌配合饲料)。每种饵料在投喂前都切成和配合饲料大小(长4 mm，直径2 mm左右)一致的小块。5种饵料的营养和能量特征见表 1。
表 1 5种饵料及混合摄入饵料的成分(平均值±SE)Table 1. Composition of five provided diets and ingested mixed diets (mean±SE)饵料种类
diets水分/%
moisture蛋白质/%
protein脂肪/%
lipid能量/kJ·g-1
energy能蛋比(E/P)
energy/protein脂蛋比(L/P)
lipid/proteinFF 82.62±1.50 91.41±0.017h 2.40±0.14a 22.61±0.02f 24.74±0.21a 0.026±0.001a SF 88.25±0.44 86.88±0.08g 3.84±0.18b 22.87±0.04g 26.32±0.35b 0.044±0.001b CF 78.19±0.77 66.49±0.06cd 4.31±0.47c 20.99±0.09cd 31.57±0.48de 0.065±0.001c PW 75.66±0.54 70.93±0.11f 11.00±0.18g 21.31±0.10e 30.04±0.78c 0.155±0.011ef FD 8.00±1.04 45.97±0.05a 9.16±0.17d 19.37±0.03a 42.12±0.16g 0.199±0.006e CF+PW …… 70.64±0.04f 10.53±0.06fg 21.29±0.01e 30.13±0.01c 0.149±0.001d CF+FD …… 53.92±1.41b 7.28±0.33d 20.00±0.11b 37.14±0.79f 0.136±0.010f PW+FD …… 64.81±0.73c 10.53±0.05fg 20.83±0.06c 32.15±0.23e 0.162±0.001ef CF+FD+PW …… 67.92±1.01de 10.42±0.16f 21.08±0.08d 31.04±0.35cd 0.153±0.002ef FF+CF+PW+FD …… 67.75±1.09de 9.90±0.32e 21.04±0.08d 31.07±0.37cd 0.146±0.005de FF+SF+CF+PW+FD …… 68.92±1.17ef 9.45±0.15de 21.15±0.09de 30.70±0.39cd 0.137±0.002d 注：同一列中未标有相同字母的数值相互之间存在显著差异。混合投喂处理的各项指标根据实际不同饵料摄入比例加权计算获得
Note: Values without same letter in the same column are different from each other. The values of mixed diet were weighed in accordance with the portion of each diet in total ingested diet.1.2 实验养殖设施及条件
实验在中国海洋大学教育部海水养殖重点实验室进行。对虾按每个水族箱4尾的密度(45 cm×30 cm×30 cm，水体35 L)养殖，室内温度用空调控制；连续充气，每2天换水1/2，所用海水用筛绢过滤；水族箱内溶氧保持在5.5 mg · L-1以上，氨氮含量不高于2.2 mg · L-1，海水温度为25±0.5℃，盐度为30~32，pH值为7.8±0.3；光照周期为14L：10D。
1.3 实验用虾来源及驯化
实验所用对虾从山东省胶南市购买，运回实验室后分至水族箱内按实验条件进行为期7 d的驯化。驯化期间每天过量投饵2次(早上6：00和晚上6：00)，投饵后2.5~3 h时间段内清除水族箱内的残饵和粪便。
1.4 实验设计
驯化结束后，对虾禁食24 h，挑选规格一致的对虾用精确到0.1 mg的电子天平称重，每一水族箱内放入体重(湿重)为0.805±0.005 g (平均值±SE)的对虾4尾。实验共持续30 d。实验共设11个处理，分别投喂不同的饵料，前5个处理分别投喂过量的沙丁鱼肉(FF)、虾肉(SF)、蛤蜊肉(CF)、沙蚕(PW)和配合饲料(FD)，后6个处理的饵料组合分别为CF+PW、CF+FD、PW+FD、CF+FD+PW、FF+FD+PW+FD、FF+SF+CF+PW+FD，每一种都过量投喂，使每种饵料的剩余量达到投喂量的一半以上。每一处理设4个重复，共用44个水族箱，水族箱的排列采用完全随机化区组设计进行排列。
1.5 样品的收集和测定
挑选实验用对虾的同时取对虾样品3个，每个样品8尾虾，分析对虾初始成分。每种饵料也分别随机取样3个，作为分析饵料成分的样品。每天投喂的饵料都精确称重，投喂后在2.5~3 h时间段内收集残饵，并对每种饵料进行溶失实验，用于校正最后收集的残饵的量。实验结束后，每个水族箱内的虾分别称量湿重，作为一个样品。收集的样品均用烘箱在65℃下烘干至恒重，计算对虾和饵料样品的水分含量。除残饵外，所有样品用凯氏定氮法测定氮含量并换算成粗蛋白质(P)含量(凯氏氮×6.25)。对虾和饵料的粗脂肪含量(L)用索氏抽提法测定。样品的灰份含量用马福炉在550℃下燃烧至恒重测得[21]。样品的能量值(GE)用PARR1281型卡路里计测定。每个样品测定3次。
1.6 数据计算
对虾的增重率(WG, %初始体重)和饵料转化效率(FCE，%)的计算公式分别如下：
$$ \begin{aligned} & W G=100 \times\left(W_t-W_o\right) / W_o \\ & F C E=100 \times\left(W_t-W_o\right) / C \end{aligned} $$ 其中对虾体重为湿重(W，g)，而饵料均为干重。Wt为实验结束时对虾的体重，Wo为实验开始时对虾的体重，T为实验持续时间(d)，C为摄食量。
相应地，所有样品以干物质(D，g)、蛋白质(P，g)和能量(E，kJ)表示的特定生长率、增重率、饵料转化效率也按以上公式进行计算[22]。
饵料的能量蛋白比(GE/P，kJ · g-1)、脂肪蛋白比(L/P)按如下公式进行计算：
$$ \begin{aligned} & \mathrm{GE} / \mathrm{P}=\mathrm{GE} \div \mathrm{P} \\ & \mathrm{~L} / \mathrm{P}=\mathrm{L} \div \mathrm{P} \end{aligned} $$ 在假设不同单种饵料对混合饵料的转化效率没有相互作用的前提下，预测混合饵料转化效率计算公式如下：
$$ \mathrm{e} F C E=\sum\limits_{i=1}^5 F C E_i \times R_i $$ 其中FCEi为单种饵料投喂时某种饵料的实际饵料转化效率，Ri表示相应饵料在总饵料摄入量中的比例。
1.7 数据的统计分析
对数据的统计分析用SPSS 10.0进行。对数据进行了单因子方差分析和Duncan氏多重比较，以P＜0.05作为差异显著的标准。
2. 实验结果
2.1 中国明对虾的生长
实验结束时不同处理的中国明对虾在湿重、干重、蛋白质、能量等方面都存在显著差异，以FF处理最小，相应的湿重、干重、蛋白质、能量分别为0.993、0.189、0.134 g和3.31 kJ，CF+PW处理最大，相应的湿重、干重、蛋白质、能量分别为2.089、0.501、0.343 g和9.13 kJ；对虾以湿重、干重、蛋白质、能量表示的增重率也表现为相同的趋势(表 2)。
表 2 不同形式表示的放养对虾和收获对虾的重量和增长率(平均值±SE)Table 2. The weight of initial shrimp and final shrimp and weight gain (mean±SE)饵料搭配
diets combination放养对虾initial shrimp 收获对虾final shrimp 增重率/% weight gain WW/g DW/g P/g E/kJ WW/g DW/g P/g E/kJ WW DW P E FF 0.807±0.006 0.175±0.001 0.127±0.001 3.26±0.05 0.993±0.063a 0.189±0.001a 0.134±0.001a 3.31±0.17a 22.76±6.37a 7.60±1.56a 5.45±0.59a 1.30±0.13a SF 0.803±0.007 0.174±0.001 0.126±0.001 3.25±0.01 1.090±0.071ab 0.200±0.010a 0.141±0.001a 3.51±0.01a 35.76±3.09ab 14.81±1.82a 11.24±1.77a 8.30±0.1.72a CF 0.805±0.005 0.174±0.002 0.127±0.001 3.25±0.02 1.324±0.007abc 0.270±0.004ab 0.194±0.001ab 4.90±0.13ab 64.55±3.76abc 54.66±3.62ab 53.23±3.58ab 50.76±3.53ab PW 0.807±0.004 0.175±0.001 0.127±0.001 3.26±0.01 1.970±0.175ef 0.472±0.099de 0.326±0.002de 9.13±0.16e 144.19±8.67ef 169.91±9.68de 157.01±9.67de 180.33±9.52e FD 0.801±0.009 0.174±0.001 0.126±0.001 3.24±0.09 1.408±0.097bcd 0.286±0.068ab 0.203±0.008ab 5.32±0.31abc 76.00±6.25bcd 64.90±5.37e 61.43±3.95abc 64.65±4.03abc CF+PW 0.802±0.006 0.174±0.002 0.126±0.001 3.24±0.03 2.089±0.175f 0.501±0.051e 0.343±0.007e 9.42±0.14e 160.88±9.31f 188.68±9.34bcd 172.13±9.89e 191.23±8.74e CF+FD 0.802±0.008 0.174±0.001 0.126±0.001 3.24±0.05 1.607±0.109cde 0.378±0.078bcd 0.268±0.007bcde 7.38±0.48cde 100.39±5.29cde 117.79±6.58de 112.33±6.37bcde 127.86±5.36cde PW+FD 0.803±0.001 0.174±0.001 0.126±0.001 3.24±0.07 1.848±0.171ef 0.430±0.041de 0.301±0.001de 8.38±0.51de 129.86±9.18ef 147.02±7.23bcd 138.41±7.54de 158.16±5.78de CF+PW+FD 0.804±0.002 0.174±0.001 0.126±0.001 3.25±0.03 1.670±0.031cde 0.367±0.095bcd 0.260±0.004bcd 6.72±0.41bcd 107.62±9.57cde 110.82±5.36bcd 105.54±4.29bcd 106.97±4.19bcd FF+CF+PW+FD 0.807±0.004 0.175±0.001 0.127±0.001 3.26±0.01 1.676±0.109cde 0.395±0.035cde 0.277±0.001cde 7.45±0.50cde 107.60±8.65cde 125.67±4.31cde 118.27±4.68cde 128.48±4.33cde FF+SF+CF+PW+FD 0.809±0.001 0.175±0.001 0.127±0.001 3.26±0.01 1.732±0.076def 0.356±0.069cde 0.275±0.009cde 7.31±0.36cde 113.96±9.76de 122.81±7.69cde 116.02±5.17bcde 123.41±4.69cde 注：同一列中没有相同字母上标的数值相互之间存在显著差异。WW、DW、P、E分别表示数值以湿重、干重、蛋白质、能量表示
Note: Values without same letter in the same column are different from each other. WW, DW, P, and E mean values expressed in wet weight, dry weight, protein and energy, respectively.2.2 不同处理中中国明对虾对不同饵料的总摄食量及组成
中国明对虾在不同处理中摄入的各种饵料的比例不同，在所有与PW同时投喂的处理中，PW以干重、蛋白质、能量形式表示时都占总摄入量的大部分，超过65%(表 3)。而在CF+FD处理中，FD占摄入饵料的大部分，以干重、蛋白质、能量表示时分别为61.27%、52.80%、59.43%(表 3)。在所有其它与FD同时投喂的处理中，FD都占总摄食量的一定比例，超过7%(表 3)。
表 3 不同处理中不同饵料的百分比例(平均值±SE)Table 3. Percentages of different diets in different treatments (mean±SE)饵料搭配
diets combination干重dry weight 蛋白质protein 能量energy FF SF CF PW FD FF SF CF PW FD FF SF CF PW FD FF 100b 0a 0a 0a 0a 100b 0a 0a 0a 0a 100b 0a 0a 0a 0a SF 0a 100b 0a 0a 0a 0a 100b 0a 0a 0a 0a 100b 0a 0a 0a CF 0a 0a 100b 0a 0a 0a 0a 100b 0a 0a 0a 0a 100b 0a 0a PW 0a 0a 0a 100b 0a 0a 0a 0a 100b 0a 0a 0a 0a 100b 0a FD 0a 0a 0a 0a 100b 0a 0a 0a 0a 100b 0a 0a 0a 0a 100b CF+PW 0a 0a 6.64±0.87b 93.39±0.86c 0a 0a 0a 6.25±0.82b 93.75±0.82c 0a 0a 0a 6.55±0.86b 93.45±0.86c 0a CF+FD 0a 0a 38.76±6.87b 0a 61.27±6.89c 0a 0a 47.20±7.48b 0a 52.80±7.48b 0a 0a 40.57±7.03b 0a 59.43±7.03c PW+FD 0a 0a 0a 75.49±2.92c 24.50±2.92b 0a 0a 0a 82.542.27c 17.46±2.27b 0a 0a 0a 77.20±2.77c 22.80±2.77b CF+PW+FD 0a 0a 5.23±1.95ab 83.64±4.75c 11.13±3.98b 0a 0a 5.19±1.93ab 87.153.75d 7.66±2.79c 0a 0a 5.26±1.95ab 84.47±4.49c 10.27±3.69b FF+CF+PW+FD 7.09±2.65ab 0a 2.06±0.85a 72.58±6.58c 18.19±4.42b 9.55±3.49ab 0a 2.04±0.23ab 75.926.32c 12.49±3.19b 7.62±2.83ab 0a 2.06±1.19a 73.52±6.51c 16.80±4.14b FF+SF+CF+PW+FD 8.52±1.02a 5.51±0.49a 0.98±0.15a 66.61±5.28c 18.37±4.74b 11.29±1.30b 6.97±0.69ab 0.96±0.31a 68.364.35c 12.42±3.35b 9.11±1.08ab 5.96±0.54a 0.98±0.57a 67.07±5.05c 16.88±4.40b 注：同一行中没有相同字母上标的数值相互之间存在显著差异
Note: Values without same letter in the same column are different from each other.中国明对虾在不同处理中的总摄食量不同，以单独投喂PW的处理最大，以干重、蛋白质、能量表示时分别为1.352、0.959 g、28.810 kJ；单独投喂FF时摄食量最小，相应的量分别为0.197、0.180 g、4.444 kJ；6个混合投喂处理的摄食量都没有超过单独投喂PW处理的摄食量(表 4)。
表 4 不同处理中对虾摄入的饵料干重、蛋白质和能量(平均值±SE)Table 4. Total dry weight, protein, and energy of ingested diets in different treatments (mean±SE)处理treatment 干重/g dry weight 蛋白质/g protein 能量/kJ energy FF 0.197±0.027a 0.180±0.024a 4.444±0.603a SF 0.527±0.044b 0.458±0.038b 12.047±1.012b CF 0.733±0.044bc 0.487±0.029bc 15.379±0.922bc PW 1.352±0.125e 0.959±0.089e 28.810±2.660f FD 1.144±0.033de 0.526±0.015bcd 22.162±0.647de CF+PW 1.150±0.069de 0.813±0.049de 24.490±1.478cde CF+FD 0.976±0.124cd 0.528±0.070bcd 19.530±2.498bc PW+FD 1.250±0.086e 0.809±0.048de 26.028±1.732ef CF+FD+PW 0.933±0.079cd 0.633±0.052cd 19.660±1.648cd FF +CF+PW+FD 0.909±0.114cd 0.614±0.074bcd 19.111±2.356cd FF+SF+CF+PW+FD 0.983±0.068cd 0.676±0.039cd 20.776±1.375cde 注：同一列中未标有相同字母的数值相互之间存在显著差异
Note: Values without same letter in the same column are different from each other.2.3 不同处理中国明对虾对饵料转化效率(FCE)的预测值与实际值
中国明对虾摄食不同饵料后的实际饵料转化效率(FCE)不同，CF+PW处理的FCE最高，以干重、蛋白质、能量表示时分别为27.86%、26.08%、24.47%，单独投喂FF和SF的处理最低，以3种形式表示时都低于7%(表 5)。在不同饵料搭配的处理中，饵料的实际转化效率除在PW+FD和CF+FD+PW两个处理以干重形式表示时略小于单独投喂PW处理外，均高于所有单独投喂一种饵料的处理(表 5)。所有混合投喂处理的实际饵料转化效率都比预测值高，并且除了PW+FD和CF+FD+PW两个处理的实际值与预测值差异不显著外，其它处理的饵料转化效率实际值都显著高于预测值。
表 5 不同处理中的预测饵料转化效率与实际饵料转化效率(平均值±SE)Table 5. The estimated food conversion efficiencies and observed food conversion efficiencies of different treatments(mean±SE)% 处理
treatment干重dry weigh 蛋白质protein 能量energy 预测值
estimated实际值
observed预测值
estimated实际值
observed预测值
estimated实际值
observedFF 6.37 6.37±0.47a 3.50 3.50±0.43a 0.48 0.48±0.13a SF 4.92 4.92±0.54a 3.10 3.10±0.44a 2.22 2.22±0.45ab CF 13.07 13.07±0.86ab 13.89 13.89±0.92ab 10.78 10.78±0.73bcd PW 21.25 21.25±2.75bc 20.05 20.05±2.74bc 19.76 19.76±2.46de FD 9.85 9.85±1.59a 14.71 14.71±2.45ab 9.44 9.44±1.53bc CF+PW 20.71±0.07 *27.86±3.43c 19.66±0.05 *26.08±3.38bc 19.17±0.08 *24.74±3.02e CF+FD 11.10±0.22 *22.03±5.63bc 14.32±0.06 *28.90±4.56c 9.99±0.09 *22.39±5.71e PW+FD 18.45±0.33 20.10±2.41bc 19.12±0.12 21.26±2.82bc 17.41±0.29 19.39±2.27de CF+FD+PW 19.56±0.51 21.11±2.93bc 19.32±0.21 21.58±3.28bc 18.23±0.45 18.05±2.58cde FF +CF+PW+FD 17.93±0.79 *24.67±4.13c 17.68±0.70 *24.92±4.41bc 16.37±0.86 *22.37±3.75e FF+SF+CF+PW+FD 16.91±0.62 *21.91±2.31bc 16.28±0.39 *21.84±2.51bc 15.13±0.58 *19.43±2.07de 注：同一列没有相同字母标记的数值相互之间存在显著差异。标有“*”的实测值显著比预测值大(P < 0.05)
Note: Values without same letter in the same column are different from each other. Observed values with‘*’ were significantly higher than the estimated.3. 讨论
3.1 中国明对虾同时摄食不同饵料的优势
中国明对虾摄食不同的混合饵料后，在生长速度上都比除了PW外的任何单种饵料投喂的处理有了不同程度的提高，并且CF+PW处理的对虾生长比单独投喂PW快(表 2)，这与南美白对虾[20]和日本对虾[9]摄食混合饵料时生长比摄食单种饵料时生长快的现象相同，表明对虾通过不同饵料的搭配，能够提高生长速度，并且这些较高的生长速度不是通过摄食量的显著增加来获得的(表 4)。同时，对虾摄食不同的混合饵料后，饵料转化效率绝大多数比摄食单种饵料时有不同程度的提高，并比假设不同饵料同时投喂时相互之间对饵料转化效率无影响前提下预测的饵料转化效率高(表 5)，而且这种转化效率的提高不是以提高摄食量来实现的(表 4)，表明不同饵料之间存在一种积极的相互作用。这种积极相互作用对对虾摄食策略可能有重要影响，可能是导致对虾杂食性的主要原因之一。一般认为由于喜食饵料的缺乏和季节波动[23, 24]，对虾为减少饥饿和营养不良的胁迫而摄入不十分喜食的饵料。但实验条件下发现即使是喜食饵料过量存在时，对虾也摄入部分不十分喜食的饵料[8]。由于对虾在天然环境中最喜食的饵料是有限的，如果只摄食某种饵料就需要花较多的能量觅食，而采用不同饵料同时摄入的策略，同样可以获得与摄食单种较好饵料的相当生长速度和饵料转化效率，这样不仅可以节约觅食的能量消耗，也能更有效地利用饵料资源。
3.2 不同饵料搭配对饵料营养和能量特征的影响
不同饵料同时投喂对虾时，对虾在生长和饵料转化效率比投喂单种饵料时好，这种相互作用的产生有可能是由于不同饵料中的氨基酸组成不同，混合摄入后相互补充了必需氨基酸，产生蛋白质的互补作用或氨基酸互补作用[25]，从而提高了整体的转化效率，也有可能是饵料的其它因素起了重要的作用。尽管饵料中哪些因素对这些积极作用起了主要作用还不十分清楚，但在中国明对虾摄入的饵料中，不同混合饵料的营养和能量特征与单种饵料相比都发生变化(表 1)。值得注意的是在混合饵料中饵料的能量蛋白比(E/P)发生了变化，E/P较高的FD与PW混合后，E/P由42.12降低到37.14 kJ · g-1，而其它混合组的E/P都为30.70~32.15 kJ · g-1，这与薛敏等[26]得到的体重为0.368~0.699和1.025~1.525 g的中国明对虾幼虾最适可消化能量与可消化蛋白(DE/DP)比分别为30.88和28.93 kJ · g-1的结果非常接近，也与本实验中使对虾生长最好的单种饵料PW的E/P(30.04 kJ · g-1)非常接近。混合饵料的脂肪含量也比脂肪含量较低的FF、SF、CF有显著提高，达到7.28%~10.53%；并使饵料的脂肪蛋白比(L/P)比FF、SF、CF显著提高，达到0.136~0.162的范围，与使对虾生长最好和饵料转化效率最高的单种饵料PW的L/P值0.155非常接近。而在以往的研究中，都发现了甲壳动物有一个最适的饵料能量蛋白比(E/P)或脂肪蛋白比(L/P)，使动物摄入的饵料能量最大限度地转化为生长能[26-29]，并且发现在蛋白质得到满足的前提下，能量和脂肪含量的提高都能够显著提高动物对蛋白质的利用率，产生蛋白质的节约作用[19, 26, 29, 30]。在本实验中，可能是由于对虾选择性摄食后，混合饵料中能量蛋白比、脂肪含量和脂肪蛋白比的得到调整，使中国明对虾对饵料的蛋白质利用率提高，从而提高了饵料的转化效率，并获得了不同饵料搭配的积极相互作用。
致谢: 此研究承蒙湛江市水产技术推广站黄天文工程师、刘宏良工程师，以及珠海市水产技术推广站古群红工程师、罗志平工程师协助采集样本，谨此致谢！ -
表 1 6对AFLP引物组合的检测结果
Table 1 Amplification results of six AFLP primer combination sets
物组合
primer pair总带数
total bands单态性条带数
monomorphic bands多态性条带数
polymorphic bands多态带百分数/%
percent of polymorphic bandsE-AGC/M-CTG 73 18 55 75.34 E-ACT/M-CAG 60 17 43 71.67 E-ACT/M-CTT 64 23 41 64.06 E-ACT/M-CTG 80 23 57 71.25 E-AGC/M-CAG 67 28 39 58.21 E-AGG/M-CTG 66 14 52 78.79 合计 total 410 123 287 平均 average 68.33 20.50 47.83 69.90 
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表 2 凡纳滨对虾6个群体的遗传多样性
Table 2 Genetic diversity of the six L.vannamei stocks
群体
stock多态位点/%
percent of
polymorphic bands平均基因多样性
average gene
diversity Shannon多样性指数
Shannon diversity index群体内Fst指数
Fst index within
populations广益 Guangyi 71.20 0.2020 0.3551 0.18283 乾塘 Qiantang 69.29 0.2446 0.4126 0.17955 进口 Jinkou 70.88 0.2495 0.4193 0.17822 东方 Dongfang 70.27 0.2341 0.3991 0.17961 海星 Haixing 68.39 0.2286 0.3944 0.17904 旭明 Xuming 69.37 0.2024 0.3627 0.17956
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表 3 Nei遗传相似性系数(左上角)及及遗传距离(右下角)(1978)
Table 3 Nei′s genetic identity (above diagonal) and genetic distance (below diagonal) of the six L.vannamei stocks
广益 乾塘 进口 东方 海星 旭明 广益 Guangyi － 0.9622 0.8813 0.8479 0.9060 0.8803 乾塘 Qiantang 0.0385 － 0.9376 0.9067 0.9366 0.8955 进口 Jinkou 0.1263 0.0644 － 0.9540 0.9250 0.8995 东方 Dongfang 0.1651 0.0979 0.0470 － 0.9492 0.9026 海星 Haixing 0.0988 0.0655 0.0780 0.0521 － 0.9362 旭明 Xuming 0.1275 0.1103 0.1059 0.1025 0.0659 －
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表 4 凡纳滨对虾6个群体间配对比较的Fst值
Table 4 Pairwise comparison of Fst values of the six L.vannamei stocks
广益 乾塘 进口 东方 海星 旭明 广益 Guangyi － 乾塘 Qiantang 0.07693 － 进口 Jinkou 0.23437 0.12941 － 东方 Dongfang 0.29164 0.19629 0.08660 － 海星 Haixing 0.19875 0.14053 0.14988 0.11037 － 旭明 Xuming 0.24058 0.22358 0.21940 0.21068 0.13431 －
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表 5 6个凡纳滨对虾群体的AMOVA结果
Table 5 AMOVA result of the six L.vannamei stocks
变异来源
source of variation自由度
df方差总和
sum of squares变异组分
variance components所占比例/%
percentage of variation群体间 among stocks 5 2 096.844 12.13394 Va 17.98 群体内 within stocks 174 9 631.000 55.35057 Vb 82.02 总和 total 179 11 727.844 67.48452
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