高效液相色谱-串联质谱法检测水产品中硝基呋喃类代谢物的优化研究

赵东豪, 黎智广, 王旭峰, 王强, 李永贤, 黄珂, 李刘冬

赵东豪, 黎智广, 王旭峰, 王强, 李永贤, 黄珂, 李刘冬. 高效液相色谱-串联质谱法检测水产品中硝基呋喃类代谢物的优化研究[J]. 南方水产科学, 2015, 11(6): 58-64. DOI: 10.3969/j.issn.2095-0780.2015.06.008
引用本文: 赵东豪, 黎智广, 王旭峰, 王强, 李永贤, 黄珂, 李刘冬. 高效液相色谱-串联质谱法检测水产品中硝基呋喃类代谢物的优化研究[J]. 南方水产科学, 2015, 11(6): 58-64. DOI: 10.3969/j.issn.2095-0780.2015.06.008
ZHAO Donghao, LI Zhiguang, WANG Xufeng, WANG Qiang, LI Yongxian, HUANG Ke, LI Liudong. Optimization of determination of nitrofuran metabolites in aquatic products by liquid chromatography tandem mass spectrometry[J]. South China Fisheries Science, 2015, 11(6): 58-64. DOI: 10.3969/j.issn.2095-0780.2015.06.008
Citation: ZHAO Donghao, LI Zhiguang, WANG Xufeng, WANG Qiang, LI Yongxian, HUANG Ke, LI Liudong. Optimization of determination of nitrofuran metabolites in aquatic products by liquid chromatography tandem mass spectrometry[J]. South China Fisheries Science, 2015, 11(6): 58-64. DOI: 10.3969/j.issn.2095-0780.2015.06.008

高效液相色谱-串联质谱法检测水产品中硝基呋喃类代谢物的优化研究

基金项目: 

国家科技基础性工作专项 2014FY230100

国家农产品质量安全风险评估重大专项 GJFP2014009

中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金(中国水产科学研究院南海水产研究所)资助项目 2014TS28

详细信息
    作者简介:

    赵东豪(1981-),男,博士,助理研究员,从事水产品质量安全与风险评估研究。E-mail:donghaozhao@126.com

    通讯作者:

    李刘冬(1959-),男,研究员,从事水产品质量安全与风险评估研究。E-mail:168lld@163.com

  • 中图分类号: TS207.53

Optimization of determination of nitrofuran metabolites in aquatic products by liquid chromatography tandem mass spectrometry

  • 摘要:

    研究了利用高效液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)检测水产品中残留的5-吗啉甲基-3-氨基-2-噁唑烷基酮(AMOZ)、氨基脲(SEM)、1-氨基-2-内酰脲(AHD)和3-氨基-2-噁唑烷基酮(AOZ)等4种硝基呋喃类代谢物,优化了前处理方法及液相色谱条件。硝基呋喃类代谢物经衍生化后,调节样品pH至7.0~7.5,加入8 mL乙酸乙酯,离心并转移上清液,氮气吹干后,用乙腈-0.1%的甲酸水(5/95, V/V)溶液定容,4 ℃高速离心后上机测定。采用梯度洗脱法,4种代谢物在C18柱中分离良好。该法有效地提高硝基呋喃类代谢物的检测效率,且检测结果准确,适用于批量水产品的检测。

    Abstract:

    The nitrofuran metabolites (AMOZ, SEM, AHD and AOZ) were determined by liquid chromatography tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) in aquatic products. The sample pretreatment method and chromatographic conditions were optimized. The sample pH value was adjusted to 7.0~7.5 after derivation. Then the analytes were extracted by 8 mL ethyl acetate. Following centrifugation, the supernatant was transferred and evaporated to dryness under a gentle stream of nitrogen at 40 ℃. The residues were redissolved in 1 mL mobile phase of acetonitrile and 0.1% formic acid (5/95, V/V), and then centrifuged at 20 000×g for 10 min at 4 ℃. Gradient elution for LC separation was performed by using acetonitrile and 0.1% formic acid in water solution, and four nitrofuran metabolites were excellently separated with a C18 column. This accurate optimized method can promote efficiency greatly and is suitable for lot determination of nitrofuran metabolites in aquatic products.

  • 建立海洋生态系统模型为评估水生生态系统不同环境、管理方案以及相关渔业信息提供了更好的解决途径[1]。目前,许多生态学家将Ecopath模型作为研究新一代海洋生态系统的核心工具,Ecopath模型是Ecopath with Ecosim(EwE)食物网分析软件中的一部分,是用于分析食物网和定量组之间营养相互作用最常见的质量平衡模型[2]。国外学者运用此模型研究了多个水生生态系统的结构和功能[3-4],中国学者在莱州湾[5]、荣成俚岛[6]、东海[7]、象山港[8]、长江口[9]、北部湾[10]、南海北部[11]以及湖泊水库[12-14]等多个区域开展了不同生态系统能量流动和生态系统结构研究。

    大亚湾位于珠江口的东北部,是中国南海沿岸规模最大、最重要的半封闭海湾之一[15]。由于良好的地貌和气候条件,已成为中国南海水产种质资源的重要保护区[16]。王雪辉等[17]运用Ecopath模型对20世纪80年代大亚湾能量流动做了初步研究,但是受到大规模开发利用(如大亚湾核电站的新建、石油化工、印刷和港口运输)等影响,导致大亚湾海域生态系统结构和生态环境发生了很大改变[18-21]。为了更好地描述大亚湾营养结构、生态系统性能和关键种,科学评估人为活动的影响,文章运用Ecopath with Ecosim 6.4(EwE)软件构建了大亚湾海域生态通道模型,对大亚湾生态系统能量流动关系、食物网结构和总体特征进行分析,为合理建设大亚湾,促进大亚湾渔业可持续发展提供理论依据。

    该研究数据来源于2012年中国水产科学研究院南海水产研究所在大亚湾海域资源调查数据,调查时间为2012年3月、5月、8月和11月共4个航次,调查内容主要包括浮游植物、浮游动物、底栖生物、渔业资源以及环境要素等。其中渔业资源调查只在3月[22]。渔业资源调查共布设12个拖网调查站位S1~S12,雇用拖网渔船进行游泳生物调查,调查站位布置见图 1。采样及调查分析均按《海洋监测规范》(GB 17378—2007)、《海洋调查规范-海洋生物调查》(GB 12763.6—2007)、《近岸海域环境监测规范》(HJ 442—2008)、《海水水质标准》(GB 3097—1997)中规定的方法进行。

    图  1  大亚湾渔业资源调查区调查站位图
    Figure  1.  Sampling sites in Daya Bay ecosystem

    Ecopath模型指生态系统由一系列生态关联的功能组(Group)构成,这些功能组基本涵盖了大亚湾生态系统中营养级结构和能量流动途径,大亚湾生态系统各功能组包括有机碎屑、浮游生物、底栖生物、1组规格和生态特性相同的鱼种等。根据能量守恒原理,每个功能组(i)的能量输出和输入保持相对平衡,用公式Pi=Yi+Bi×M2i+Ei+BAi+MOi计算,其中Pi是功能组i的总生产量; Yi是总捕捞量; Bi是生物量; M2i是捕食死亡率; Ei是净迁移(迁出-迁入); BAi是生物量积累; MOi是其他死亡; EEi是生态营养效率。

    通过进一步计算可以得出${B_i} \times {(P/B)_i} \times E{E_i} - \mathop \sum \limits_{j = 1}^n {B_j} \times {\left( {Q/B} \right)_j} \times D{C_{ij}} - E{X_i} = 0$ ,构建Ecopath模型需要输入前4个基本参数BP/BQ/B(Q代表消耗量)、EE中的任意3个,食物组成矩阵DCij和产出EXi则必须要求输入。生态营养转换效率EE是一个较难获取的参数,所以在Ecopath模型输入参数中,一般将其设为未知数,通过调试模型让所有EE均保证小于1。

    主要根据各生物种类食性特点、栖息地特点、生物量、个体大小和分类类群等特性划分功能组,将大亚湾生态系统定义为19个功能组,基本涵盖了该生态系统能量流动全过程。19个功能组分别为碎屑、浮游植物、浮游动物、紫海胆(Anthocidaris crassispina)、小型底栖生物、大型底栖生物、头足类、蟹类、虾类、虾蛄类、二长棘鲷(Parargyrops edita)、平鲷(Rhabdosargus sarba)、石首鱼科、虎鱼科、鲽形目、鲱形目、底层鲈形目、中上层鲈形目和其他鱼类(表 1)。

    表  1  大亚湾生态系统Ecopath模型功能组及其主要种类
    Table  1.  Functional groups and main species in Daya Bay ecosystem based on Ecopath model
    序号
    No.
    功能组
    functional group
    功能组描述
    group′s description
    拉丁名
    Latin name
    1 二长棘鲷 二长棘鲷 Parargyrops edita Tanaka
    2 平鲷 平鲷 Rhabdosargus sarba
    3 石首鱼科 白姑鱼 Argyrosomus argentatus
    皮氏叫姑鱼 Johnius belengeri
    勒氏短须石首鱼 Umbrina russelli Cuvier et Valenciennes
    杜氏叫姑鱼 Johnius dussumieri
    4 虎鱼科 绿斑细棘虎鱼 Acentrogobius chlorostigmatoides
    矛尾虎鱼 Chaeturichthys stigmatias Richardson
    巴布亚沟虎鱼 Oxyurichthys papuensis
    拟矛尾虎鱼 Parachaeturichthys polynema
    长丝虎鱼 Cryptocentrus filifer
    5 鲽形目 卵鳎 Solea ovata Richardson
    青缨鲆 Crossorhombus azureus
    大鳞舌鳎 Cynoglossus macrolepidotus
    6 鲱形目 Clupanodon punctatus
    康氏小公鱼 Anchoviella commerson
    7 底层鲈形目 黑鲷 Sparus macrocephalus
    短尾大眼鲷 Priacanthus macracanthus Cuvier et Valenciennes
    李氏 Callionymus richardsoni Bleeker
    黄斑蓝子鱼 Siganus oramin
    列牙 Pelates quadrilineatus
    六指马鲅 Polynemus sextarius Bloch et Schneider
    丽叶鲹 Caranx kalla Cuvier et Valencienne
    黄带鲱鲤 Upeneus sulphureus Cuvier et Valenciennes
    印度无齿鲳 Ariomma indica
    眶棘双边鱼 Ambassis gymnocephalus
    长棘银鲈 Gerres filamentosus Cuvier
    少鳞 Sillago japonica
    黑鳃天竺鱼 Apogonichthys arafurae
    中线天竺鲷 Apogon kiensis Jordan et Snyder
    四线天竺鲷 Apogon quadrifasciatus Cuvier et Valenciennes
    8 中上层鲈形目 圆鳞发光鲷 Acropoma hanedai Matsubara
    短吻鲾 Leiognathus brevirostris
    四指马鲅 Eleutheronema tetradactylum
    短棘银鲈 Gerres lucidus Cuvier
    鹿斑鲾 Leiognathus ruconius
    蓝圆鲹 Decapterus maruadsi
    9 其他 前鳞骨鲻 Osteomugil ophuyseni
    月腹刺鲀 Gastrophysus lunaris
    长蛇鲻 Saurida elongata
    Platycephalus indicus
    大鳞鳞鲬 Onigocia macrolepis
    艾氏蛇鳗 Ophichthus evermanni Jordan et Richardson
    10 虾类 宽突赤虾 Metapenaeopsis palmensis
    刀额新对虾 Metapenaeus ensis
    近缘新对虾 Metapenaeus affinis
    鹰爪虾 Trachypenaeus curvirostris
    11 虾蛄类 口虾蛄 Oratosquilla oratoria
    断脊口虾蛄 Oratosquilla interrupa
    条尾近虾蛄 Anchisquilla fasciata
    棘突猛虾蛄 Harpiosquilla raphidea
    长叉口虾蛄 Oratosquilla nepa
    短沟对虾 Penaeus semisulcatus
    12 蟹类 矛形梭子蟹 Portunus pelagicus
    隆线强蟹 Eucrate crenata
    直额 Charybdis truncata
    伪装关公蟹 Dorippe facchino
    锐齿 Charybdis hellerii
    疾进 Charybdis vadorum Alcock
    美人 Charybdis callianassa
    太阳强蟹 Eucrate solaris Yang et Sun
    远海梭子蟹 Portunus pelagicus
    秀丽长方蟹 Metaplax elegans
    锈斑 Charybdis feriatus
    变态 Charybdis variegata
    13 头足类 短蛸 Octopus ocellatus Gray
    杜氏枪乌贼 Loligo duvaucelii Orbigny
    中国枪乌贼 Loligo chinensis Gray
    针乌贼 Sepia andreana Steenstrup
    田乡枪乌贼 Loligo duvaucelii Orbigny
    柏氏四盘耳乌贼 Euprymna berryi Sasaki
    14 小型底栖生物 多毛类等 Polychaeta
    15 大型底栖生物 覆瓦牡蛎 Parahyotissa imbricate
    条蜒螺等 Nerita striata
    16 紫海胆 紫海胆 Anthocidaris crassispina
    17 浮游动物 桡足类 Copepoda
    浮游幼虫等 larval plankton
    18 浮游植物 中肋骨条藻 Skeletonema costatum
    尖刺菱形藻 Nitzschia pungens Grunow
    密聚角毛藻 Chaetoceros coarctatus Lauder
    中华盒形藻 Biddulphia sinensis Greville
    奇异棍形藻等 Bacillaria paradoxa Gmelin
    19 碎屑 有机物
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    文章所使用Ecopath模型用湿质量(t·km-2)表示其能量流动,时间限定为1年。渔业资源生物量通过扫海面积法进行估算,浮游植物生物量由浮游植物碳单位转换为湿质量单位,取比值1:10[23],浮游植物碳质量又通过叶绿素a的水柱积分,取比值50[24]。紫海胆生物量通过潜水员在海底进行采样; 底栖生物生物量使用漏斗式采泥器采集; 浮游动物使用浮游动物网采集并结合相关文献[25-26]

    当生态系统平衡时,鱼类P/B值等于瞬时死亡率Z,总死亡率Z等于自然死亡率M与开发捕捞死亡率的累加,鱼类Q/B值一般根据PALOMARES和PAULP[27]、PAULY[28]使用的尾鳍外形比多元回归模型来计算。文章中P/B比值和Q/B比值参考与文章纬度接近且生态系统相似功能组[29-31],并结合渔业数据库网站[32](www.fishbase.org )来确定模型参数。碎屑数量采用碎屑和初级生产碳经验公式计算[33]。食物组成矩阵数据参考渔业数据库网站和已有食性研究结果[34-35]

    大亚湾生态系统Ecopath模型基本输入和输出情况见表 2。在模型运行前,运用Pedigree对模型和数据质量进行评估。从表 2可以看出模型中所有功能组EE值均小于1,且鱼类与虾蟹类功能组EE值相对较高,大亚湾生态系统营养级范围在1~3.29级之间。

    表  2  大亚湾生态系统Ecopath模型功能组基本参数(粗体为计算参数)
    Table  2.  Basic parameters of functional groups in Daya Bay based on Ecopath model (calculating parameters are in bold)
    序号
    No.
    功能组
    functional group
    营养级
    trophic
    B/t·km-2 (P/B)/年-1 (Q/B)/年-1 EE P/Q
    1 二长棘鲷 3.24 0.012 8 2.825 13.5 0.99 0.21
    2 平鲷 3.29 0.016 9 1.76 4.8 0.99 0.36
    3 石首鱼科 3.17 0.006 1.85 10.4 0.99 0.18
    4 虎鱼科 3.20 0.12 2.66 7.71 0.96 0.35
    5 鲽形目 3.06 0.007 3.09 13.61 0.99 0.23
    6 鲱形目 2.67 0.02 5.54 29.3 0.99 0.19
    7 底层鲈形目 3.19 0.075 3.91 19.4 0.95 0.20
    8 中上层鲈形目 2.96 0.014 1.91 10.2 0.99 0.19
    9 其他鱼类 3.34 0.07 3.4 14 0.96 0.24
    10 虾类 2.67 1.83 6.5 16.35 0.99 0.40
    11 虾蛄类 2.88 0.814 5 6 20.3 0.99 0.30
    12 蟹类 2.87 1.042 3 5.65 26.9 0.99 0.21
    13 头足类 3.18 0.032 3.1 12.8 0.98 0.24
    14 大型底栖生物 2.24 10.15 3 12.5 0.71 0.24
    15 小型底栖生物 2.14 14.5 6.57 27.4 0.38 0.24
    16 紫海胆 2.13 0.011 4.2 16.7 0.16 0.25
    17 浮游动物 2.00 6.55 32 192 0.38 0.17
    18 浮游植物 1.00 10.732 230 0.44
    19 碎屑 1.00 129 0.54
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    营养级聚合是指将不同功能组的营养流合并为数个营养级,大亚湾生态系统营养级结构(表 3)共有6个层次,由于营养级Ⅴ和Ⅵ生物量和生产量都很低,所以基本忽略不计,能量主要在营养级Ⅰ~Ⅳ中流动和传递,且能量流动、生物量、生产量分布呈现金字塔形,即底层营养级流量较大,且逐级递减,营养级结构符合金字塔规律。

    表  3  大亚湾生态系统总能量分布
    Table  3.  Distribution of total throughput in Daya Bay ecosystem
    t·(km2·年)-1
    营养级
    trophic level
    被摄食量
    consumption by predation
    输出量
    export
    流向碎屑量
    flow to detritus
    呼吸量
    respiration
    总流量
    throughput
    0.641 0 2.225 5.146 8.012
    9.946 0 35.54 69.23 114.7
    127.6 0 533.1 1 055 1 716
    1 723 1 316 1 371 0 4 410
    合计total 1 861 1 316 1 942 1 130 6 249
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    营养级Ⅰ包括浮游植物和碎屑,其为系统能量的主要来源,从表 3可以看出营养级Ⅰ被摄食量为1 723 t·(km2·年)-1,占总被摄食量的92.6%。其中来自于浮游植物被摄食量为1 097 t·(km2·年)-1,占63.7%,碎屑被摄食量为625.6 t·(km2·年)-1,占36.3%。营养级Ⅰ和Ⅱ在能流中占了绝大部分,分别为4 410 t·(km2·年)-1和1 716 t·(km2·年)-1,占比分别为70.8%和27.5%。整个生态系统流向碎屑总量为1 942 t·(km2·年)-1,其中营养级Ⅰ和Ⅱ也占了绝大多数,分别为1 371 t·(km2·年)-1和533.1 t·(km2·年)-1,占比分别为70.6%和27.5%。通过营养级Ⅱ可知系统对此利用率较低,而往上面的营养级利用率较高。由此可知大亚湾生态系统能量主要来自于营养级Ⅰ中的初级生产者。

    能量主要在Ⅰ、Ⅱ中流动(图 2),营养级Ⅰ传输效率为39.5%,营养级Ⅱ传输效率为27.46%,营养级Ⅱ(无脊椎动物)消耗的大部分碎屑来自于中大型食肉动物捕食活动中产生的碎屑。

    图  2  大亚湾生态系统营养层级间能流效率示意图
    P.初级生产者; D.碎屑; TST.系统总流量
    Figure  2.  Trophic flow and transfer efficiency through trophic levels in Daya Bay ecosystem
    P. primary; D. detritus; TST. total system throughput

    图 3可以看出大亚湾生态系统营养流动由2条途径组成:一条是牧食食物链,浮游植物→浮游动物→虾蟹类等小型生物→渔业捕获物; 另一条是碎屑食物链,碎屑→浮游动物及底栖生物→虾蟹类等小型生物→渔业捕获物。2条食物链在大亚湾生态系统中扮演了重要的地位,系统能量均由浮游植物和碎屑所提供。

    图  3  大亚湾生态系统食物网
    Figure  3.  Food web of Daya Bay ecosystem

    大亚湾生态系统各营养级之间能量转换效率较低,而营养级之间能量转换效率则体现了该营养级被该生态系统利用效率,即输出与被摄食之和与总流量的比值。通过不同营养级之间能量转换效率(表 4)可知,由初级生产者营养级Ⅰ到Ⅱ的转换效率为6.7%,碎屑有机物营养级Ⅰ到Ⅱ的转换效率为8.7%。能流来源于初级生产者的营养级Ⅲ到Ⅳ的转换效率最高(9.9%),能流来源于碎屑有机物的营养级Ⅲ到Ⅳ的转换效率最低(5.2%)。初级生产者营养级Ⅱ到Ⅲ转化效率为9.1%。大亚湾生态体系中生态系统总转换效率为8%,其中初级生产者转化效率和碎屑转化率分别为8.2%和7.4%。转换效率在低等级食物链较大是由于在不同层次食物网中生物代谢水平差异所造成。

    表  4  大亚湾各营养级间转换效率
    Table  4.  Transfer efficiency among trophic levels in Daya Bay
    来源source 营养级trophic level
    生产者producer 6.7 8.4 9.9 2.5
    碎屑detritus 8.7 9.1 5.2 2.9
    总能流all flow 7.4 8.7 8 2.6
    碎屑所占能流比值proportion of total flow originating from detritus:0.4
    转化效率transfer efficiency
        初级生产者转化效率from primary producers:8.2%
        碎屑转化效率from detritus:7.4%
        总转化效率total:8%
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    在Ecopath模型中,总流量用来表示生态系统规模大小,其由总消耗量、总输出量、总呼吸量和总流入碎屑量组成,这些指标可以反映出生态系统的规模和稳定性。大亚湾生态系统系统总流量为6 249.573 t·(km2·年)-1,总消耗量为1 861.424 t·(km2·年)-1,占比29.8%;总输出量为1 316.293 t·(km2·年)-1,占比21%;总呼吸量为1 129.915 t·(km2·年)-1,占比18%;流向碎屑总量为1 941.941 t·(km2·年)-1,占比31%。系统总生产量为2 827.584 t·(km2·年)-1,总净初级生产量为2 468.36 t·(km2·年)-1,总初级生产量/总呼吸量为2.18,系统净生产量为1 338.445 t·(km2·年)-1,总生物量为46 t·(km2·年)-1,总初级生产量/总生物量为53.65,总生物量/总流量为0.007。

    综合性功能组中生物种类较为复杂,不能简单将其与其他功能组营养级进行对比,可以将单一种类单独归类进行比较分析。通过Ecopath模型估算大亚湾生态系统,结果显示二长棘鲷和平鲷营养级分别为3.24和3.29,通过渔业数据库网站[32]中生态系统查询,中国南海Ecopath参数中二长棘鲷和平鲷营养级为3.44和3.25,与计算结果基本一致,而代春桃[36]和杨国欢等[37]在北部湾、徐闻利用稳定同位素测定的营养级分别为3.05和1.87,平鲷营养级差距较大,这可能与所选取平鲷的氮富集度较小、个体大小不同有关。海洋生态系统是一个动态过程,而生态演替过程一般由r-对策转变为k-对策。随着演替的不断进行初级生产量与呼吸量比值由大于1逐级接近于1,在能流方面由线性流通转变为网状流通,群落净生产流逐渐降低。在这个缓慢过程中,人类的活动在很大程度上能改变演替进程。王雪辉等[17]用20世纪80年代数据建立的大亚湾能量流动模型中初级生产者、碎屑、总转换效率均大于2012年,主要在营养级Ⅱ、Ⅲ转换效率上大于2012年,而在营养级Ⅰ转换效率上却小于2012年,这可能是由于大亚湾内生态环境受到了一定破坏,海水富营养化,导致初级生产者大量繁殖而未被充分利用[38]。又由于捕捞过度导致渔业资源衰退,致使渔业生物个体和年龄降低,可利用生物大量减少。

    Ecopath模型可以用来评估生态系统成熟与稳定性,总初级生产量/总呼吸量(TPP/TR)是系统成熟与否的关键指标,当TPP/TR接近于1时,生态系统接近于成熟。CHRISTENSEN和PAULY[39]认为TPP/TR通常在0.8~3.3内,大亚湾为2.18,总初级生产量/总生物量为53.65,表明该生态系统属于初级阶段,生产量大于呼吸量,系统处于积蓄能量阶段。由河流流入也是导致TPP/TR偏高[40]的一个重要因素。Finn循环指数(FCI)和平均能流路径(MPL)也是系统成熟与否的关键指标,系统越成熟,营养流所流经食物链更长,物质再循环比例更高。在大亚湾生态系统中FCI和MPL分别为4.8%和3.53,表明该生态系统结构较为单一,成熟度较低,远低于其他海域生态系统[41]。联结指数(CI)和系统杂食性指数(SOI)是表示系统内部联系复杂程度指标,系统成熟程度取决于其复杂程度,即各生物群落联系更加密切,生态系统稳定性更强,其数值越接近1成熟度越高。大亚湾生态系统CI和SOI分别为0.324和0.174,表明食物网简化且系统不成熟,杂食性程度低。均低于ULLAH等[42]对孟加拉海岸带研究指数0.42、0.224和RUIZ-CAUICH等[43]在翁河流域研究指数0.367、0.208。这些参数有力地结合了该模型,从而修正了被忽略的其他功能组对模型拓扑依赖性指标。

    南海北部包括了大亚湾以外大部分海域,其总生物量远远高于大亚湾海域生物量水平,这可能是由于外海海域环境较好,捕捞压力较低所致(表 5)。大亚湾和莱州湾研究数据均是距离内陆较近,受内陆环境和人类活动影响较大的海域,其总生物量差距不大,但是大亚湾系统总流量远远大于莱州湾,且主要在总输出量和流向碎屑总量上差距明显,说明大亚湾初级生产力对生态系统支撑较大,高营养级鱼类量比莱州湾多,生态系统整体水平好于莱州湾。

    表  5  大亚湾生态系统与其他海域生态系统参数比较
    Table  5.  Comparison of parameters of Daya Bay ecosystem with those of the other sea areas
    参数parameter 莱州湾[5]
    Laizhou Bay
    大亚湾
    Daya Bay
    南海北部[11]
    northern South China Sea
    总消耗量/t·(km2·年)-1 sum of all consumption 1 314.32 1 861.424 3 324.185
    总输出量/t·(km2·年)-1 sum of all exports 434.41 1 316.293 3 236.992
    总呼吸量/t·(km2·年)-1 sum of all respiratory flows 826.97 1 129.915 2 027.59
    流向碎屑总量/t·(km2·年)-1 sum of all flows into detritus 1 042.24 1 941.941 4 448.65
    系统总流量/t·(km2·年)-1 total system throughput 3 618 6 249.573 13 037
    系统总生产量/t·(km2·年)-1 sum of all production 1 549 2 827.584 5 895
    总净初级生产量/t·(km2·年)-1 calculated total net primary production 1 261.38 2 468.36 5 264.58
    总初级生产量/总呼吸量total primary production/total respiration 1.53 2.185 2.596
    系统净生产量/t·(km2·年)-1 net system production 434.41 1 338.445 3 236.99
    总初级生产量/总生物量total primary production/total biomass 25.54 53.655 92 25
    总生物量/总流量total biomass/total throughput - 0.007 0.016
    总生物量/t·(km2·年)-1 total biomass 51.39 46.0035 212.761
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    近年来,渔政管理部门已先后启动了包括休渔期、禁止使用破坏性捕捞工具、限制捕捞量、进行渔业资源养护和维持生物多样性等一系列渔业管理政策[44],广东珠江口海域在采取休渔期政策后15年内渔业资源状况得到了一定保护,但在高捕捞强度下,对于恢复资源量的作用并不显著[31]。采用Ecopath模型对大亚湾生态系统结构和功能研究较少,但由于文章调查数据和站位有限,其结论尚需进一步验证。时空变化显著影响渔业资源变动,文章所研究数据的时间序列有待补充,同时,今后需要在Ecopath模型中加入管理策略变量、空间变量和环境变量对大亚湾生态系统结构和功能影响的分析,并以此制定和完善渔业管理策略和保护措施,为进一步保护和促进海洋生物资源的可持续利用提供重要参考。

  • 图  1   空白罗非鱼样品添加2 μg · kg-1水平的4种硝基呋喃类代谢物的MRM离子流图

    Figure  1.   MRM chromatograms of a tilapia sample extract fortified with 2 μg · kg-1 of four nitrofuran metabolites

    表  1   液相色谱条件

    Table  1   Condition of liquid chromatography

    步骤 step t/min A/% B/%
    0 0 5 95
    1 5.0 60 40
    2 5.5 90 10
    3 6.0 90 10
    4 6.5 5 95
    5 14.0 5 95
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    表  2   质谱条件

    Table  2   Condition of mass spectrometry

    被测物
    analyte
    母离子/(m/z)
    precursor ion
    子离子/(m/z)
    product ion
    DP/V CE/V
    AMOZ 335.3 291.1* 35 18
    262.1 35 25
    AMOZ-D5 340.2 296.1 35 18
    SEM 209.1 166 35 15
    192 35 17
    SEM·HCl-13C-15N2 212.1 168 35 16
    AHD 249.1 134.1 42 19
    104 42 33
    AHD-13C3 252.1 134 42 19
    AOZ 236.1 134.1 40 19
    104.1 40 33
    AOZ-D4 240.1 134 40 19
    注:带*的离子为定量离子
    Note:The ion with "*" is qualitative ion
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    表  3   标准及优化方法测定4种硝基呋喃类代谢物的回收率与精密度

    Table  3   Recovery and precision of standard and optimized methods for determining four nitrofuran metabolites

    被测物
    analyte
    方法
    method
    加标量/μg·kg-1
    added amount
    回收率/% recovery 平均值/%
    mean
    相对标准偏差/%
    RSD
    数据1
    Data 1
    数据2
    Data 2
    数据3
    Data 3
    数据4
    Data 4
    数据5
    Data 5
    数据6
    Data 6
    AMOZ 优化 optimization 0.5 90.9 91.4 99.8 91.6 98.8 91.5 94.0 4.39
    1.0 88.5 94.5 92.0 89.5 88.0 91.5 90.7 2.72
    2.0 86.3 90.5 88.8 93.3 87.3 90.3 89.4 2.81
    4.0 93.9 92.6 93.0 90.3 89.9 94.1 92.3 1.95
    标准 standard 0.5 101.0 92.0 97.2 101.0 97.8 92.6 96.9 4.05
    1.0 90.5 91.5 88.0 89.5 85.0 95.0 89.9 3.75
    2.0 92.8 90.8 88.5 90.0 94.5 94.0 91.8 2.59
    4.0 94.0 94.9 96.6 91.8 92.4 91.8 93.6 2.07
    SEM 优化 optimization 0.5 94.0 97.0 98.6 80.0 98.2 91.1 93.2 7.56
    1.0 95.0 98.0 89.0 80.0 81.5 87.5 88.5 8.07
    2.0 90.8 89.5 97.0 92.8 95.0 96.8 93.7 3.34
    4.0 94.3 89.6 92.8 94.5 97.9 90.1 93.2 3.31
    标准 standard 0.5 99.0 97.5 94.2 88.6 87.2 83.7 91.7 6.67
    1.0 92.0 87.0 86.5 91.5 87.5 92.5 89.5 3.10
    2.0 97.5 89.8 87.3 87.5 84.3 94.3 90.1 5.45
    4.0 85.8 89.5 86.8 92.9 89.9 91.4 89.4 3.01
    AHD 优化 optimization 0.5 89.9 102.0 94.4 94.3 96.8 94.4 95.3 4.17
    1.0 92.5 95.0 89.0 99.5 96.5 95.5 94.7 3.79
    2.0 99.6 93.0 90.0 93.3 92.3 93.5 93.6 3.42
    4.0 94.0 92.0 99.8 101.0 95.9 96.5 96.5 3.53
    标准 standard 0.5 101.0 99.6 97.0 104.0 93.0 96.0 98.4 3.97
    1.0 89.5 93.5 94.0 95.5 89.5 85.0 91.2 4.27
    2.0 96.3 95.8 99.5 89.0 92.8 90.8 94.0 4.13
    4.0 93.4 91.6 98.5 98.8 101.0 97.6 96.8 3.69
    AOZ 优化 optimization 0.5 97.6 99.4 104.0 96.2 99.7 91.8 98.1 4.14
    1.0 97.5 91.0 94.5 99.5 90.5 96.5 94.9 3.80
    2.0 94.3 93.0 88.5 96.3 98.8 98.5 94.9 4.08
    4.0 91.1 91.6 91.6 99.5 95.1 94.6 93.9 3.42
    标准 standard 0.5 98.2 99.8 98.5 95.0 97.5 98.1 97.9 1.63
    1.0 89.5 94.5 92.5 97.5 87.5 90.0 91.9 3.99
    2.0 91.3 94.5 88.0 99.8 93.5 94.0 93.5 4.17
    4.0 89.6 94.0 95.4 91.8 91.8 91.3 92.3 2.24
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    表  4   标准与优化方法在各个添加水平测定4种硝基呋喃类代谢物回收率的t检验结果

    Table  4   T-test result of recoveries determined of four nitrofuran metabolites at each spiked level by standard and developed methods

    加标量/μg·kg-1 added amount AMOZ SEM AHD AOZ
    0.5 0.233 0.711 0.196 0.884
    1.0 0.668 0.755 0.134 0.181
    2.0 0.124 0.166 0.843 0.550
    4.0 0.259 0.043 0.891 0.327
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出版历程
  • 收稿日期:  2015-01-18
  • 修回日期:  2015-02-14
  • 刊出日期:  2015-12-04

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