合浦珠母贝主要形态性状与体质量的灰色关联分析

谭才钢, 刘宝锁, 张东玲, 牛志凯, 张博, 陈明强, 范嗣刚, 姜松, 黄桂菊, 李有宁, 陈素文, 喻达辉

谭才钢, 刘宝锁, 张东玲, 牛志凯, 张博, 陈明强, 范嗣刚, 姜松, 黄桂菊, 李有宁, 陈素文, 喻达辉. 合浦珠母贝主要形态性状与体质量的灰色关联分析[J]. 南方水产科学, 2015, 11(2): 35-40. DOI: 10.3969/j.issn.2095-0780.2015.02.005
引用本文: 谭才钢, 刘宝锁, 张东玲, 牛志凯, 张博, 陈明强, 范嗣刚, 姜松, 黄桂菊, 李有宁, 陈素文, 喻达辉. 合浦珠母贝主要形态性状与体质量的灰色关联分析[J]. 南方水产科学, 2015, 11(2): 35-40. DOI: 10.3969/j.issn.2095-0780.2015.02.005
TAN Caigang, LIU Baosuo, ZHANG Dongling, NIU Zhikai, ZHANG Bo, CHEN Mingqiang, FAN Sigang, JIANG Song, HUANG Guiju, LI Youning, CHEN Suwen, YU Dahui. Analysis of grey relationship between morphological traits and body weight of pearl oyster (Pinctada fucata)[J]. South China Fisheries Science, 2015, 11(2): 35-40. DOI: 10.3969/j.issn.2095-0780.2015.02.005
Citation: TAN Caigang, LIU Baosuo, ZHANG Dongling, NIU Zhikai, ZHANG Bo, CHEN Mingqiang, FAN Sigang, JIANG Song, HUANG Guiju, LI Youning, CHEN Suwen, YU Dahui. Analysis of grey relationship between morphological traits and body weight of pearl oyster (Pinctada fucata)[J]. South China Fisheries Science, 2015, 11(2): 35-40. DOI: 10.3969/j.issn.2095-0780.2015.02.005

合浦珠母贝主要形态性状与体质量的灰色关联分析

基金项目: 

国家自然科学基金项目 31372525

现代农业产业技术体系建设专项资金 CARS-48

广东省海洋渔业科技推广专项项目 A201201A08

广东省海洋渔业科技推广专项项目 A201301A02

广东省海洋渔业科技推广专项项目 A201301A08

广东省海洋渔业科技推广专项项目 B201300B08

广东省科技计划项目 2012B050700004

中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金(中国水产科学研究院南海水产研究所)资助项目 2013YD02

中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金(中国水产科学研究院南海水产研究所)资助项目 2013YD04

中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金(中国水产科学研究院南海水产研究所)资助项目 2014TS08

详细信息
    作者简介:

    谭才钢(1989-),男,硕士研究生,从事水产动物遗传育种与生态养殖研究。E-mail: tancaiganggxu@163.com

    通讯作者:

    喻达辉(1963-),男,研究员,从事水产养殖与生物技术研究。E-mail: pearlydh@163.com

  • 中图分类号: S968.31+6.1

Analysis of grey relationship between morphological traits and body weight of pearl oyster (Pinctada fucata)

  • 摘要:

    文章采用灰色关联分析方法对合浦珠母贝(Pinctada fucata)12个家系的壳长、壳高、壳宽和绞合线长4个形态性状与体质量的关联度进行了分析和评价。结果显示,12个家系的平均体质量、壳长、壳高、壳宽和绞合线长分别为35.96 g、57.36 mm、59.24 mm、23.55 mm和56.93 mm。各个性状的变异系数较大(8.30%~21.30%),其中壳高和壳宽的变异系数相对较小,而体质量的变异系数相对较大。体质量与各形态性状灰色关联系数之和以壳高为最大(8.950 8),且家系间较均一,壳长为最小(8.189 8),但家系间变化幅度较大。体质量与4个形态性状的关联度大小趋势为壳高(0.745 9)>绞合线长(0.714 8)>壳宽(0.705 9)>壳长(0.682 5)。根据上述结果,可将壳高作为间接选育合浦珠母贝体质量性状的重要评价指标,以提高体质量的选育效率。

    Abstract:

    We conducted a grey relational analysis to examine the relationship between shell traits and body weight of 12 selective breeding families of Pinctada fucata. The results show that the average body weight, shell length, shell height, shell width and hinge length were 35.96 g, 57.36 mm, 59.24 mm, 23.55 mm and 56.93 mm, respectively. The coefficients of variation in body weight and shell traits were ranked as follows: body weight (21.30%) > shell length (9.91%) > hinge length (9.12%) > shell height (8.85%) > shell width (8.30%). The grey relational degrees between each shell trait and body weight were ranked as follows: shell height (0.745 9) > hinge length (0.714 8) > shell width (0.705 9) > shell length (0.682 5). It is suggested that shell height which had the closest relationship with body weight could be regarded as an important factor for evaluation of P.fucata breeding practice for high growth lines selection and improvement of selection efficiency.

  • 克氏原螯虾 (Procambarus clarkii),俗称小龙虾,属于淡水螯虾[1]。2019年中国克氏原螯虾养殖总产量达208.96×104 t,成为产量第一的淡水养殖经济虾类[2]。克氏原螯虾在养殖过程中,可离水存活较长时间,故在其流通过程中多采用干法运输[3]

    干法运输时水产动物常遭受干露胁迫,干露胁迫主要包括失水胁迫和低氧胁迫[4]。失水胁迫使机体水分丧失,打破细胞内外水平衡,造成组织结构损伤;低氧胁迫下机体氧供应不足,制约有氧呼吸,最终导致生理代谢失衡[5-6]。已有研究表明,干露胁迫会影响脊尾白虾[7] (Exopalaemon carinicauda) 的呼吸代谢和日本囊对虾[8] (Marsupenaeus japonicus) 的抗氧化应激,降低三疣梭子蟹[9] (Portunus trituberculatus) 的成活率。克氏原螯虾幼虾免疫系统尚未发育完全,体质弱、抗逆性差,在进行干法运输时成活率低,影响经济效益,有些地区专以运输成虾的方法获得亲本,通过繁育获得虾苗以保证当地的规模养殖[10]

    目前关于干露对克氏原螯虾成虾影响的研究尚未见报道,本研究采用温度为 (16±1) ℃、相对湿度 (Relative humidity, RH) 为 (55±5)%的干露条件对雌、雄成虾进行不同时间的干露胁迫,通过记录成虾死亡时间、测定相关代谢酶、H.E染色的方法,研究了干露对克氏原螯虾成虾的存活、相关代谢酶和组织结构的影响,为调整其运输时间,改善其运输方式,提高其运输成活率提供参考依据。

    实验时间为2019年9月,克氏原螯虾取自上海海洋大学崇明基地,选择附肢健全、活力旺盛的雌、雄虾各90尾,将雌、雄各30尾分别暂养于单个循环水槽 (长293 cm×宽80 cm×高20 cm,水深15 cm) 7 d。养殖用水为经充分曝气的自来水,水温为 (23.0±1.0) ℃,pH为7.5±0.5,持续充氧以保证水中溶氧充足。在养殖水桶中放入适量假水草,供克氏原螯虾栖息,且减少个体之间互相打斗。每天17时用虹吸管吸出残饵与粪便,并换水1/3以确保养殖水质清洁,投喂虾体质量3%~5%的配合饲料 (大北农水产科技集团股份有限公司)。实验前24 h停止投喂;雄虾体质量为 (44.4±6.5) g,体长为 (79.2±3.6) mm;雌虾体质量为 (41.9±5.9) g,体长为 (82.5±3.4) mm。

    实验在崇明基地实验室内进行,提前24 h调节加湿器 (广东容声电器,PH-88) 和除湿机 (GEDRYC20C),并通过温湿度记录仪 (精创RC-4HC) 显示情况,控制房间温度为 (16±1) ℃,RH为 (55±5)%。

    取雌、雄虾各8尾,单尾分别装于1 000 mL的聚丙烯 (PP) 盒 (14.9 cm×6.2 cm×15.0 cm),观察并统计克氏原螯虾死亡时间。根据死亡率与时间进行回归分析,建立回归方程,根据方程求得干露条件下的半致死时间 (LT50)。

    雌、雄虾各60尾,干露前擦干体表水分后称质量,即为初始湿体质量 (WO),于上述温湿度条件下进行干露胁迫,每6 h观察虾体存活情况,以晃动PP塑料盒虾体包括触角无反应判定虾体死亡,分别在第0、第3、第6、第12、第24、第36、第48、第60、第72、第96、第132和第144小时随机挑选雌、雄虾各4尾进行采样。

    采样时将克氏原螯虾体表水分擦干后称质量 (WT),计算其体质量消耗率后 [体质量消耗率=(WOWT)/WO×100%],置于解剖盘上,剪开头胸甲和腹部,取出肝胰腺和肌肉,解剖盘上将其快速切割成约0.2 g的小块,分装于0.2 mL离心管中,液氮速冻后放入−80 ℃冰箱中保存用于酶活力测定。另取适量肝胰腺、鳃和肌肉组织于Bouin's液中固定,用于后续组织切片的制作与观察。

    样品按质量体积比1∶9加入0.9%生理盐水,冰上研磨将其制成10%的组织匀浆,离心取上清液待测。乳酸脱氢酶 (LDH) 活力采用苏州科铭生物技术有限公司的试剂盒进行测定,琥珀酸脱氢酶 (SDH) 活力和乳酸 (LA) 浓度采用南京建成生物工程研究所试剂盒测定,具体方法参照试剂盒说明书操作。LDH酶活的单位定义为每克组织每分钟催化产生1 nmol丙酮酸定义为1个酶活力 (U·g−1)。SDH酶活的单位定义为每毫克蛋白每分钟使反应体系的吸光度降低0.01为1个比活性单位。

    Bouin's液固定24 h后换70%乙醇并进行乙醇梯度脱水,二甲苯透明,石蜡包埋,切片机 (LEICA RM2125 RTS) 5~7 μm切片,苏木精-伊红染色,中性树胶进行封片,研究级显微镜 (ECLIPES 80i) 观察并拍照。

    采用SPSS 19.0软件进行数据分析,实验结果以“平均值±标准差 ($\overline { X}\pm { \rm {SD}} $)”表示,不同干露时间点数据运用单因素方差分析 (One-way ANOVA) 进行比较,差异显著时采用Duncan's多重比较,P<0.05认为差异显著。

    预实验雌、雄克氏原螯虾死亡情况见图1。实验开始第75小时雄虾开始出现死亡,在干露258 h后全部死亡;雌虾第82小时开始死亡,在干露272 h后全部死亡。将雌、雄虾死亡率与时间进行回归分析,分别得到干露时间与累积死亡率的直线关系,线性显著相关。由线性回归方程可以得到该干露胁迫条件下克氏原螯虾雄虾的LT50为148.36 h,雌虾的LT50为144.01 h。

    图  1  干露胁迫下克氏原螯虾的死亡率
    Figure  1.  Mortality of P. clarkii in air exposure periods

    克氏原螯虾成虾的体质量消耗率随干露时间的延长逐渐增大 (图2)。干露前期雌、雄虾体质量消耗率无显著差异,雄虾体质量消耗率在干露第72和第132小时出现显著升高 (P<0.05),雌虾体质量消耗率在干露第36、第60和第72小时出现显著升高 (P<0.05),干露48 h后,在同一干露时间雌虾的体质量消耗率均高于雄虾。

    图  2  干露胁迫下克氏原螯虾的体质量消耗率
    大写字母不同表示雄虾不同胁迫时间组的差异显著 (P<0.05),小写字母不同表示雌虾不同胁迫时间组的差异显著 (P<0.05)。
    Figure  2.  Mass consumption rate of P. clarkii in air exposure periods
    Values with different uppercase and lowercase letters indicate significantly difference in male and female crayfish among different groups, respectively (P<0.05).

    雄虾肝胰腺LDH活力在第6、第12、第24和第36小时呈逐级递增趋势 (图3-a),在第36小时达到最大 (204.16 U·g−1),在随后的第48、第60和第72小时 LDH活力仍显著高于0 h组 (P<0.05),但相比前期胁迫稍有降低。在第96、第132和第144小时雄虾LDH活力无明显变化 (P>0.05)。雌虾肝胰腺LDH活力在整个干露时间段内呈现先上升后下降的趋势 (图3-b),在干露第3和第6小时LDH活力显著降低 (P<0.05),在第12、第24和第48小时LDH相比0 h组有所升高 (P<0.05),在第24小时达到峰值 (154.17 U·g−1)。干露第36小时无显著差异 (P>0.05)。在干露后期的第60、第72和第96小时雌虾肝胰腺LDH显著低于干露0 h组 (P<0.05)。

    图  3  干露胁迫对克氏原螯虾雄虾 (a) 和雌虾 (b) 肝胰腺乳酸脱氢酶活力的影响
    *. 各组与0 h组的差异显著 (P<0.05);不同字母上标表示除0 h组外不同胁迫时间组的差异显著 (P<0.05);后图同此。
    Figure  3.  Effect of dry exposure on hepatopancreas LDH activity of male (a) and female (b) P. clarkii
    *. Significant difference between each group and 0 h group (P<0.05); different letters represent significant difference among different groups except 0 h group (P<0.05). The same case in the following figures.

    雄虾肌肉LDH活力见图4-a,在干露24、第36、第48和第60小时显著高于0 h组,在第48小时达到峰值 (120.22 U·g−1),随后LDH活力与0 h组无显著差异 (P>0.05)。随着干露时间的延长,雄虾肌肉LDH活力整体呈现先升高后下降的趋势。干露期间雌虾肌肉LDH活力先升高后下降 (图4-b),在第132小时达到最低 (40.88 U·g−1)。雌虾肌肉LDH活力在第6、第12、第24和第36小时显著高于0 h组 (P<0.05),在第36小时达到最大活力值 (104.63 U·g−1),干露48~96 h阶段LDH活力与干露0 h组无显著差异 (P>0.05)。

    图  4  干露胁迫对克氏原螯虾雄虾 (a) 和雌虾 (b) 肌肉乳酸脱氢酶活力的影响
    Figure  4.  Effect of dry exposure on muscle LDH activity of male (a) and female (b) P. clarkii

    雄虾肝胰腺SDH活力在干露期间呈现先下降后升高趋势 (图5-a),在干露第48小时达到最低 (4.36 U·mg−1),第60小时达到峰值 (11.65 U·mg−1)。而雌虾肝胰腺SDH活力在干露前期梯度递减 (图5-b),第36小时达到最低 (1.97 U·mg−1),在第48和第60小时明显激增,但与0 h组无显著差异 (P>0.05),在干露60 h后活力显著降低 (P<0.05)。

    图  5  干露胁迫对克氏原螯虾雄虾 (a) 和雌虾 (b) 肝胰腺琥珀酸脱氢酶活力的影响
    Figure  5.  Effect of dry exposure on hepatopancreas SDH activity of male (a) and female (b) P. clarkii

    雄虾肌肉SDH活力见图6-a,在干露第24和第60小时明显降低 (P<0.05),在第36小时达到最大 (9.76 U·mg−1)。雌虾肌肉SDH活力在第12小时达到最低 (7.18 U·mg−1),第36小时后随干露时间的延长显著降低 (P<0.05,图6-b)。

    图  6  干露胁迫对克氏原螯虾雄虾 (a) 和雌虾 (b) 肌肉琥珀酸脱氢酶活力的影响
    Figure  6.  Effect of dry exposure on muscle SDH activity of male (a) and female (b) P. clarkii

    雌、雄虾肌肉LA水平随干露时间的延长呈现先升高后下降的变化 (图7),其中雄虾LA水平在第48小时达到最大值 (732.33 µmol·g−1),雌虾在第60小时达到峰值 (706.01 µmol·g−1)。

    图  7  干露胁迫对克氏原螯虾雄虾 (a) 和雌虾 (b) 肌肉乳酸质量摩尔浓度的影响
    Figure  7.  Effect of dry exposure on muscle LA molar concentrations of male (a) and female (b) P. clarkii

    干露0 h组雌、雄虾肝胰腺肝小管排列紧密,细胞结构正常,细胞界限清晰 (图8图9)。随着干露时间的延长,雄虾肝小管形态有明显膨胀,管壁外侧基膜在第72小时开始有离散现象,在第96小时更为明显;管腔内壁基膜逐渐扩张,形状呈不规则多边形,尤其在第36小时之后明显变大;肝小管内部细胞收缩,B细胞以及内部运转泡体积增大,数量增多,雌虾此现象较雄虾明显。雌虾肝小管在持续干露时间段内除第132小时外始终紧密排列,内部基膜扩张明显,管腔随干露时间逐渐变大,在第132小时达到最大;内部细胞在第48、第96和第132小时结构模糊,细胞界限不清晰。随着干露时间的增加,雌、雄虾柱状上皮细胞的细胞质内均出现许多空泡,空泡随干露时间数量增多、体积增大,干露终期细胞空泡化严重。雌、雄虾干露期间肝胰腺R细胞数量无明显变化。

    图  8  干露胁迫对雄性克氏原螯虾肝胰腺显微结构的影响
    a—i分别代表干露胁迫0、12、24、36、48、60、72、96和132 h;B. B细胞;R. R细胞;F. F细胞;L. 管腔;BM. 基膜;TV. 转运泡;图9同此。
    Figure  8.  Effect of dry exposure on hepatopancreas microstructure of male P. clarkii
    a–i represent dry exposure of 0, 12, 24, 36, 48, 60, 72, 96 and 132 h, respectively; B. B cell; R. R cell; F. F cell; L. Lumen; BM. Basement membrane; TV. Transferred vacuoles; the same case in Figure 9.
    图  9  干露胁迫对雌性克氏原螯虾肝胰腺显微结构的影响
    Figure  9.  Effect of dry exposure on hepatopancreas microstructure of female P. clarkii

    干露0 h组雌、雄虾鳃叶结构完整,鳃膜薄且平整光滑、形状规则整齐 (图10图11),正常内部呼吸上皮细胞单层逐个相连围成微血管腔,微血管腔内有血细胞和血淋巴液。在干露第12小时出现雄虾鳃膜边缘结构模糊,雌虾鳃丝轻微肿大现象。在随后的干露时间,鳃膜皆出现褶皱弯曲,表面有严重粗糙感,尤其在干露第24和第36小时上皮细胞有部分脱落现象,随着干露时间延长,雌、雄虾鳃组织上皮细胞脱落、坏死愈发严重。干露后期的第96和第132小时鳃细胞数量减少,鳃膜受损严重,微血腔中的血淋巴液弥散严重,基本失去正常鳃细胞结构。

    图  10  干露胁迫对雄性克氏原螯虾鳃显微结构的影响
    GM. 鳃膜;H. 血细胞;CL. 微血管腔;REC. 呼吸上皮细胞;图11同此。
    Figure  10.  Effect of dry exposure on gill microstructure of male P. clarkii
    GM. Gill membranes; H. Hemocytes; CL. Capillary lumen; REC. Respiratory epithelium cells; the same case in Figure 11.
    图  11  干露胁迫对雌性克氏原螯虾鳃显微结构的影响
    Figure  11.  Effect of dry exposure on gill microstructure of female P. clarkii

    肌肉组织变化见图12图13,干露0 h组肌肉组织结构排列较为整齐,肌纤维间隙紧致、平整,雄虾在干露第12、第36、第60、第72和第96小时,雌虾在干露第24、第36、第48、第60、第96和第132小时组织肌纤维弯曲呈波浪状,间隙褶皱疏松。

    图  12  干露胁迫对雄性克氏原螯虾肌肉显微结构的影响
    Figure  12.  Effect of dry exposure on muscle microstructure of male P. clarkii
    图  13  干露胁迫对雌性克氏原螯虾肌肉显微结构的影响
    Figure  13.  Effect of dry exposure on muscle microstructure of female P. clarkii

    半致死时间能反映生物对胁迫因子的耐受能力[11]。克氏原螯虾成体在水中的窒息点低至0.061 mg·L−1[12],在本研究 (16±1) ℃、RH (55±5)% 干露胁迫条件下,雄虾LT50为148 h,雌虾为144 h。三疣梭子蟹[9]幼蟹在15 ℃干露4 h后全部死亡;未抱卵天津厚蟹[13] (Helice tientsinensis) 在RH 50%~60% 下5 d后全部死亡;克氏原螯虾[14]幼虾在20 ℃、RH 50%干露24 h后成活率为53.3%。相比来说,克氏原螯虾成虾对干露环境的耐受能力较好。机体的耐干露时间与自身的保水能力有关[15-16],克氏原螯虾具有独特的羽毛状鳃丝,在扩大与水体接触面积的同时也能保留大部分水分[17],从而能够在失水环境中存活一段时间。另外,干露耐受时间与自身水分丧失速度有关[15-16],体质量消耗率可反映机体的水分丧失,雄、雌虾体质量消耗率分别在第60和第48小时后急剧增加,第48小时后雌虾体质量消耗率皆高于雄虾,因而其干露耐受时间小于雄虾。雌虾体质量消耗率急剧升高的时间早于雄虾的原因还有待进一步研究。

    本研究干露初期第3和第6小时,雌、雄虾肝胰腺、肌肉的LDH活力及LA浓度与0 h组相比变化不显著,机体脱离水体刚进入干露环境,鳃部仍留有一定水分,以维持正常的呼吸代谢[18]。随着干露时间的延长,在干露12~48 h 阶段,雌、雄虾的肝胰腺和肌肉LDH活力呈上升趋势,LA浓度变化趋势与LDH相同。LDH作为机体无氧代谢的标志酶[19],陶易凡等[20]在研究低pH对克氏原螯虾鳃的呼吸代谢酶的影响时指出,LDH活力上升,表明此时机体有氧代谢受阻,会迅速提高无氧代谢强度来满足自身缺氧条件下的能量需求。类似的呼吸代谢变化在日本囊对虾[21]干露胁迫第1和第3小时也有发生。本研究在12~48 h干露时间内LDH活力升高,表明机体无氧呼吸代谢强度增加,LDH催化还原丙酮酸致使LA逐渐积累[22],同时SDH作为有氧呼吸中琥珀酸转变为延胡索酸的关键脱氢酶,其在干露期间活力降低也同样反映了机体有氧代谢水平的下降[23-24],克氏原螯虾的呼吸方式逐渐从有氧代谢向无氧代谢转变。在干露48~132 h阶段,LDH活力和LA浓度逐渐降低,脊尾白虾[7]在常温干露胁迫末期也出现类似的酶活力下降变化,推测过长的胁迫时间导致机体的代谢系统受到影响,LA浓度的下降是机体应对严重的低氧胁迫将LA转化为葡萄糖来维持内环境稳态所做的调整[25],这种调整是机体短时间内为消耗过量LA而采取的糖异生作用[25],但长时间的干露胁迫,使机体耐受能力到达极限,致使酶的调节功能丧失,内稳态失衡,造成不可逆损伤[5]

    组织结构变化反映出机体生理状态的改变[26]。肌肉组织拥有致密的结缔组织,蛋白质是肌肉组织的主要组成成分。有研究指出,肌肉蛋白溶解性与蛋白持水性息息相关[27],尼罗罗非鱼 (Oreochromis niloticus) 在冷藏期间肌肉肌原纤维蛋白含量下降,肌肉蛋白溶解性降低[28]。本研究中雄、雌虾在干露第24小时后肌肉纤维出现有规律的疏松、褶皱、弯曲现象,推测可能是在干露条件下肌肉肌原纤维蛋白含量和持水量下降,导致肌肉收缩,从而产生组织损伤。

    鳃作为参与气体交换和离子调节的重要器官,通常最先受到环境胁迫影响并造成损伤[29]。本研究中克氏原螯虾的鳃组织在干露第12小时出现轻微损伤,第24和第36小时大部分呼吸上皮细胞脱落。有研究表明呼吸上皮细胞的脱落使机体气体交换的能力减弱,造成组织缺氧[20],而本研究中干露第24和第36小时无氧代谢酶LDH处于活力最大值,LA浓度增大,无氧代谢水平增强,结合组织结构变化可知,干露胁迫导致机体鳃组织损伤,损伤的鳃组织使机体获氧能力下降,缺氧条件下机体通过提高无氧代谢水平满足自身能量需求[20,30]。克氏原螯虾鳃组织随着干露时间的延长损伤加剧,本研究干露第96和第132小时的损伤与过量的硫酸锌 (ZnSO4) 胁迫[30]条件下克氏原螯虾鳃组织出现情况类似,包括鳃膜和呼吸上皮细胞分离,许多呼吸上皮细胞坏死、脱落,失去正常鳃细胞结构。干露条件下鳃缺少用于有氧呼吸的溶解氧,同时鳃组织的严重损伤进一步降低了自身氧气的利用,严重影响了机体的离子代谢和渗透调节功能[31],制约了呼吸代谢的进行,造成克氏原螯虾死亡。

    肝胰腺是克氏原螯虾重要的代谢器官,具有消化、吸收、储存和排泄的功能[32]。对于不同胁迫,甲壳动物的肝胰腺细胞会出现一些相似的变化,盐度9.0暴露下的三疣梭子蟹[33]、氨氮 (NH4-N) 胁迫15 d后的中华绒螯蟹[34] (Eriocheir sinensis) 以及在低pH胁迫下的克氏原螯虾[20]皆出现了B细胞内部空泡增多、体积增大的现象。B细胞具有消化、吸收营养物质的功能,其数量多少反映机体消化能力的强弱[35]。本研究中B细胞及内部转运泡增多、体积增大,可能有助于加快营养物质的运输[33],进而有助于克氏原螯虾消耗营养物质来提供能量[26]。R细胞除具有吞噬作用外,还可以储存脂肪和糖原。本研究中R细胞空泡化可能是细胞中营养物质的消耗造成的[33,36],尤其在干露48 h后空泡化的细胞数量增多,约占据整个细胞的80%,甚至出现肝细胞溶解的现象。此外,随着干露胁迫时间的延长,肝胰腺细胞管腔逐渐变大,在干露第132小时约占细胞体积的50%。干露胁迫下伴随失水胁迫,肝小管收缩变形,进一步表明机体细胞严重失水,过长时间的胁迫已严重破坏肝胰腺的正常组织结构,可能影响机体的正常生理功能。

    综上,鳃组织在干露第12小时即出现损伤,随着干露时间的延长肝胰腺组织损伤愈严重,两者在干露第36小时均受到严重损伤,影响了基本结构功能。雌虾体质量在干露第48小时后下降显著,而雄虾在第60小时后下降明显,同时以无氧呼吸代谢为主的呼吸强度减弱,机体面临耐受极限。因此,克氏原螯虾雌、雄成虾抗干露胁迫能力存在差异,在进行成体运输时干露时间不宜超过36 h。

  • 图  1   合浦珠母贝不同家系5个性状的箱线图

    盒子由中位数、第一四分位数和第三四分位数组成;温和异常值和极端异常值分别用“○”和“*”表示

    Figure  1.   Box plots of five traits of different families of P.fucata

    The medium, 25th and 75th percentiles are plotted as boxes; mild outliers and extreme outliers are shown as ○ and *, respectively.

    表  1   合浦珠母贝不同家系生长性状无量纲化结果

    Table  1   Nondimensionalization of growth traits of different P.fucata families

    性状trait 变量编号No. of variables 家系编号No.of family
    1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
    体质量/g body weight X′0 -0.261 4 0.443 2 1.005 9 -0.901 4 -1.628 4 -0.089 6 -1.048 3 -0.704 7 -0.107 1 1.777 8 1.167 8 0.346 1
    壳长/mm shell length X′1 0.310 3 0.742 5 0.7721 -1.009 9 -0.702 0 -0.382 3 -1.385 8 0.298 5 1.381 9 1.660 1 -0.873 7 -0.811 6
    壳高/mm shell height X′2 -0.002 8 0.239 1 0.580 2 -1.049 5 -1.241 7 -1.109 2 -1.341 0 -0.042 5 1.388 5 1.584 0 0.477 6 0.517 3
    壳宽/mm shell width X′3 0.670 5 0.345 0 1.189 4 -0.143 3 -1.221 6 0.741 8 -0.489 1 -0.946 9 -1.964 2 1.362 3 0.223 0 0.233 1
    绞合线长/mm hinge length X′4 -0.313 2 0.728 9 0.403 5 -1.214 5 -0.763 9 -1.189 5 -1.311 6 0.553 7 0.547 4 2.059 0 0.397 2 0.103 0
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    表  2   合浦珠母贝不同家系关联系数母序列和子序列的绝对差值

    Table  2   Absolute difference between reference array and comparative array of different P.fucata families

    绝对差值absolute difference (Δi) 家系编号No.of family
    1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
    Δ1 0.571 7 0.299 3 0.233 8 0.108 5 0.926 4 0.292 7 0.337 5 1.003 2 1.489 0 0.117 7 2.041 5 1.157 7
    Δ2 0.258 6 0.204 1 0.425 7 0.148 1 0.386 7 1.019 6 0.292 7 0.662 2 1.495 6 0.193 8 0.690 2 0.171 2
    Δ3 0.931 9 0.098 2 0.183 5 0.758 1 0.406 8 0.831 4 0.559 2 0.242 2 1.857 1 0.415 5 0.944 8 0.113 0
    Δ4 0.051 8 0.285 7 0.602 4 0.313 1 0.864 5 1.099 9 0.263 3 1.258 4 0.654 5 0.281 2 0.770 6 0.243 1
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    表  3   合浦珠母贝5个性状的描述性统计量

    Table  3   Descriptive statistics of five traits of P.fucata

    性状trait 平均值mean 最大值maximum 最小值minimum 极差ranges 标准差SD 变异系数/% CV
    体质量/g body weight 35.96 68.81 17.27 51.54 7.66 21.30
    壳长/mm shell length 57.36 80.84 43.82 37.02 5.69 9.91
    壳高/mm shell height 59.24 81.58 45.07 36.51 5.24 8.85
    壳宽/mm shell width 23.55 31.50 17.25 14.25 1.96 8.30
    绞合线长/mm hinge length 56.93 78.68 42.36 36.32 5.19 9.12
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    表  4   合浦珠母贝不同家系体质量与各形态性状的灰色关联系数

    Table  4   Grey relational coefficient between body weight and each morphological trait of different P.fucata families

    家系编号No. of family 关联系数(ξi) relational coefficient
    ξ1 ξ2 ξ3 ξ4
    1 0.673 5 0.838 4 0.549 3 1.000 0
    2 0.812 5 0.875 7 0.958 5 0.821 0
    3 0.854 9 0.741 5 0.890 6 0.660 8
    4 0.949 8 0.917 6 0.602 9 0.804 1
    5 0.550 8 0.762 1 0.751 3 0.568 9
    6 0.816 6 0.525 7 0.579 1 0.505 8
    7 0.789 7 0.816 6 0.678 9 0.835 3
    8 0.529 9 0.637 3 0.849 2 0.470 6
    9 0.427 4 0.426 2 0.372 7 0.640 2
    10 0.942 1 0.883 1 0.746 8 0.823 8
    11 0.350 2 0.626 9 0.545 7 0.598 7
    12 0.492 3 0.899 8 0.946 0 0.848 6
    合计total 8.189 7 8.950 9 8.471 0 8.577 8
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    表  5   合浦珠母贝不同家系各形态性状对体质量的灰色关联度

    Table  5   Grey relational degree of each shell trait of different P.fucata families

    性状trait 关联度relational degree 关联序relational order
    壳长/mm shell length 0.682 5 4
    壳高/mm shell height 0.745 9 1
    壳宽/mm shell width 0.705 9 3
    绞合线长/mm hinge length 0.714 8 2
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  • [1] 郭华阳, 陈明强, 王雨, 等. 黄边糙鸟蛤野生群体主要经济性状间的相关性及通径分析[J]. 南方水产科学, 2013, 9(2): 1-8. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2013.02.001
    [2] 刘伟, 苏胜彦, 董在杰, 等. 3个鲤群体的微卫星标记与生长性状相关性分析[J]. 南方水产科学, 2012, 8(3): 17-24. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2012.03.003
    [3] 肖述, 喻子牛, 符政君. 香港巨牡蛎雌雄群体的数量性状通径分析[J]. 南方水产科学, 2011, 7(4): 1-9. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2011.04.001
    [4] 刘永新, 刘英杰, 周勤, 等. 牙鲆主要生长性状与体质量的灰色关联度分析[J]. 中国水产科学, 2014, 21(2): 205-213. doi: 10.3724/SP.J.1118.2014.00205
    [5] 王玉涛, 郭丽君, 邓勇, 等. 利用皮特兰作父系商品猪肉品质的灰色关联度分析[J]. 上海交通大学学报: 农业科学版, 2008, 26(6): 524-527. doi: 10.3969/j.issn.1671-9964.2008.06.005
    [6] 李世凯, 江敏, 潘若雷, 等. 罗氏沼虾养殖塘叶绿素a与水质因子的灰色关联分析[J]. 生态与农村环境学报, 2014, 30(2): 257-261. doi: 10.3969/j.issn.1673-4831.2014.02.019
    [7] 权月伟, 米换房, 翟雷霞, 等. 棉花品种主要数量性状与皮棉产量的灰色关联分析[J]. 棉花科学, 2013, 35(4): 33-36. doi: 10.3969/j.issn.2095-3143.2013.04.006
    [8] 马文清, 郭强, 邱文武, 等. 利用灰色关联分析法评价甘蔗自育新品系[J]. 广东农业科学, 2014, 41(5): 71-78. doi: 10.3969/j.issn.1004-874X.2014.05.017
    [9] 吕耀平. 影响越冬罗非鱼死亡率环境因子的灰色关联分析[J]. 水产科学, 2005, 24(8): 14-16. doi: 10.3969/j.issn.1003-1111.2005.08.005
    [10] 苏胜彦, 董在杰, 曲疆奇, 等. 3个鲤群体杂交后代生长性状的灰色关联及复合杂交后代的体重预测分析[J]. 水产学报, 2011, 35(1): 20-26. doi: 10.3724/SP.J.1231.2011.17109
    [11] 龙敏明, 黄桂菊, 邹记兴, 等. 育珠对合浦珠母贝N19和Prismalin-14基因表达水平的影响[J]. 南方水产科学, 2013, 9(5): 58-63. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2013.05.010
    [12] 罗会, 刘宝锁, 黎火金, 等. 合浦珠母贝不同地理群体的形态差异和判别分析[J]. 广东农业科学, 2013, 40 (12): 171-174. doi: 10.3969/j.issn.1004-874X.2013.12.052
    [13]

    TAKASHI A, TAKASHI I, NARIAKI I, et al. Post-operative care of implanted pearl oysters Pinctada fucata in low salinity seawater improves the quality of pearls[J]. Aquaculture, 2014, 422/423: 232-238. doi: 10.1016/j.aquaculture.2013.12.022

    [14]

    OKAMOTO C, KOMARU A, HAYASHI M, et al. Variation of shell-closing strength among several families in pearl oyster, Pinctada fucata martensii[J]. Aquac Sci, 2006, 54(4): 525-529. doi: 10.11233/aquaculturesci1953.54.525

    [15]

    ISHIKAWA T, OKAMOTO C, HAYASHI M, et al. The heritability of the shell-closing strength in the Japanese pearl oyster, Pinctada fucata martensii[J]. Aquac Sci, 2009, 57(1): 77-82. doi: 10.11233/aquaculturesci.57.77

    [16] 黎火金, 刘宝锁, 罗会, 等. 合浦珠母贝幼贝生长性状的遗传参数估计[J]. 中国水产科学, 2013, 20(6): 1-6. doi: 10.3724/SP.J.1118.2013.01182
    [17]

    HE M X, GUAN Y Y, YUAN T, et al. Realized heritability and response to selection for shell height in the pearl oyster Pinctada fucata (Gould)[J]. Aquac Res, 2008, 39(8): 801-805. doi: 10.1111/j.1365-2109.2008.01889.x

    [18]

    DENG YW, FU S, DU X D, et al. Realized heritability and genetic gain estimates of larval shell length in the Chinese pearl oyster Pinctada martensii at three different salinities[J]. N Am J Aquac, 2009, 71(4): 302-306. doi: 10.1577/A08-024.1

    [19]

    YU S, HE M X. Differential gene expression identified by RNA-Seq and qPCR in two sizes of pearl oyster (Pinctada fucata)[J]. Gene, 2014, 538(2): 313-322. doi: 10.1016/j.gene.2014.01.031

    [20]

    LIU W G, HUANG X D, LIN J S, et al. Effect of temperature on gene expression in the pearl oyster Pinctada fucata[J]. J Ocean Univ China, 2014, 13(3): 509-515. doi: 10.1007/s11802-014-2147-y

    [21] 喻达辉, 王小玉, 黄桂菊, 等. 合浦珠母贝遗传连锁图谱的构建[J]. 中国水产科学, 2007, 14(3): 361-368. https://www.nstl.gov.cn/paper_detail.html?id=f3613d6f72cb32b3e95aeffe0a13e956
    [22] 何毛贤, 史兼华, 林岳光, 等. 马氏珠母贝生长性状的相关分析[J]. 海洋科学, 2006, 30(11): 1-4. https://cstj.cqvip.com/Qikan/Article/Detail?id=23295382&from=Qikan_Article_Detail
    [23]

    DENG Y W, DU X D, WANG Q H, et al. Correlation and path analysis for growth traits in F1 population of pearl oyster Pinctada martensii[J]. Mar Sci Bull, 2008, 10(2): 68-73. https://www.researchgate.net/publication/267423852_Correlation_and_Path_Analysis_for_Growth_Traits_in_F_1_Population_of_Pearl_Oyster_Pinctada_martensii

    [24] 陈飞飞, 黄桂菊, 陈明强, 等. 合浦珠母贝三亚养殖群体生长性状的相关与通径分析[J]. 广东农业科学, 2012, 39(9): 122-125. doi: 10.3969/j.issn.1004-874X.2012.09.040
    [25] 谷龙春, 李金碧, 喻达辉, 等. 合浦珠母贝双列杂交家系的建立与遗传分析[J]. 水产学报, 2010, 34(1): 26-31. doi: 10.3724/SP.J.1231.2010.06498
    [26] 李建立, 王春德, 李朝霞, 等. 紫扇贝和海湾扇贝杂交家系的生长和通径分析[J]. 海洋科学, 2012(8): 15-20. https://www.nstl.gov.cn/paper_detail.html?id=13d0b46ad914629fc344d8e145bcf16c
    [27] 孙泽伟, 郑怀平, 杨彦鸿, 等. 近江牡蛎养殖群体数量性状间的相关及通径分析[J]. 中国农业通报, 2010, 26(6): 332-336. doi: 10.11924/j.issn.1000-6850.2009-2269
    [28] 刘广文, 林坚士, 何毛贤. 不同贝龄华贵栉孔扇贝数量性状的通径分析[J]. 南方水产科学, 2012, 8(1): 43-48. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2012.01.007
    [29] 严福升, 王志刚, 刘旭东, 等. 3月龄牙鲆形态性状对体质量的通径分析[J]. 渔业科学进展, 2010, 31(2): 45-50. http://journal.yykxjz.cn/yykxjz/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20100207&flag=1
    [30] 王凯, 刘海金, 刘永新, 等. 牙鲆形态性状对体重的影响效果分析[J]. 上海水产大学学报, 2008, 17(6): 655-660. http://shhydxxb.ijournals.cn/shhy/article/abstract/200806161
  • 期刊类型引用(12)

    1. 王文君,王东亮,王磊,汪顺周,孙利东,杜燕. 凡纳滨对虾温棚工厂化养殖中主要水质因子的变化特点及相关性分析. 鲁东大学学报(自然科学版). 2022(04): 301-310 . 百度学术
    2. 王伟萍,童水明,贺刚,方春林,张桂芳,张志红,王庆萍,吴斌. 中华鳖养殖池塘水质的昼夜变化研究. 安徽农业科学. 2019(24): 111-113 . 百度学术
    3. 吴凯,马旭洲,王友成,郎月林,李星星. 河蟹生态养殖池塘不同水层水质变化的研究. 上海农业学报. 2018(01): 46-51 . 百度学术
    4. 徐煜,徐武杰,文国樑,胡晓娟,苏浩昌,杨铿,李卓佳,曹煜成. 颤藻浓度和水温对凡纳滨对虾响应颤藻粗提液毒性的影响. 南方水产科学. 2017(01): 26-32 . 本站查看
    5. 曹煜成,文国樑,李卓佳,袁翠霖,杨莺莺,胡晓娟,林小涛. 池塘水体微生物群落代谢活性的动态变化及其与水质的关系. 安全与环境学报. 2015(01): 280-284 . 百度学术
    6. 李玉全,王仁杰,姜令绪. 密度胁迫对日本囊对虾生长和水环境的影响. 海洋科学. 2013(10): 53-57 . 百度学术
    7. 张加润,江世贵,林黑着,黄忠,牛津,黄建华,王芸. 不同品牌饲料对斑节对虾生长及水质影响的研究. 南方水产科学. 2013(06): 20-26 . 本站查看
    8. 黄翔鹄,刘梅,周美华,古滨河. 波吉卵囊藻对养殖水体溶解态氮吸收规律的研究. 渔业现代化. 2012(03): 34-39 . 百度学术
    9. 夏新建,许忠能,林小涛,谢钊毅,靳祖雷,马叶胜. 不同池塘养殖模式的环境氮磷负荷及其水质特征. 海洋科学. 2012(05): 87-92 . 百度学术
    10. 曹煜成,王少沛,李卓佳,文国樑,陈素文. 微绿球藻、隐藻和颤藻竞争氮磷营养的通径分析. 渔业科学进展. 2012(04): 99-106 . 百度学术
    11. 徐升. 海水循环水养殖系统生物脱氮技术研究进展. 江西农业学报. 2012(03): 151-155 . 百度学术
    12. 陈金玲,赖秋明,苏树叶,柯杨勇. 精养虾池主要生态因子变化特点与相关性分析. 南方水产科学. 2012(04): 49-56 . 本站查看

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出版历程
  • 收稿日期:  2014-07-27
  • 修回日期:  2014-09-01
  • 刊出日期:  2015-04-04

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