Anti-mold effect of fat soluble extract of Angelica sinensis by-product on pellet feed and biochemical indicators of tissues in Cyprinus carpio var. Jian
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摘要:
当归粗提物属于饲料原料，但其提取获得率及对饲料和鱼的作用尚不明确。探索了当归副产物脂溶性提取物 (Fat soluble extract of Angelica sinensis by-product, FSE) 对颗粒饲料霉菌生长和建鲤 (Cyprinus carpio var. Jian) 组织生化指标的影响，为开发FSE作为鱼饲料的功能性原料提供理论依据。首先，使用溶剂萃取法获得当归副产物的4种极性提取物，通过将其石油醚提取物 (Petroleum ether extract, PEE) 和乙酸乙酯提取物 (Ethyl acetate extract, EAE) 合并获得FSE。然后，将当归副产物提取物加入饲料并投喂建鲤。结果显示，FSE显著抑制了颗粒饲料霉菌生长，同时影响建鲤多项生化指标：降低血浆血红蛋白 (Hb) 含量、各组织过氧化氢 (H2O2) 水平、肠道丙二醛 (MDA)含量及红细胞高铁血红蛋白 (MetHb) 含量；提高甘油三酯 (TG) 和葡萄糖 (GLU) 含量、多个组织还原型谷胱甘肽 (GSH) 含量及关键酶 [包括乳酸脱氢酶 (LDH)、脂肪酶 (LPS)、α-淀粉酶 (AMS)、Na+/K+-ATP酶、碱性磷酸酶 (AKP) 等消化代谢相关酶，以及过氧化氢酶 (CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GPx)、超氧化物歧化酶 (SOD) 等抗氧化酶] 活性。研究表明，FSE对颗粒饲料具有防霉效果，还能改善建鲤的消化吸收、呼吸功能及抗氧化能力。
Abstract:As feed raw materials, the crude extracts of Angelica sinensis's yield and their effects on feed and fish are still unclear. Therefore, we explored the effects of fat soluble extract of A. sinensis by-product (FSE) on the growth of fungi in pellet feed and the biochemical indicators in various tissues and organs of carp (Cyprinus carpio var. Jian), in order to provide a theoretical basis for the development of FSE as a functional raw material for fish feed. Firstly, we obtained four polar extracts of A. sinensis by-product by using solvent extraction method, and obtaied FSE by mixing petroleum ether extract (PEE) and ethyl acetate extract (EAE) of A. by-product. Then, we formulated the experimental diets by adding extracts of A. sinensis by-product to the basal diet, and fed the carps with diets containing different levels of FSE. The results show that FSE inhibited the growth of mold in pellet feed significantly while affecting multiple physiological parameters in fish. It decreased the plasma hemoglobin (Hb) levels, tissue hydrogen peroxide (H2O2) levels, intestinal malondialdehyde (MDA) levels, and red blood cell methemoglobin (MetHb) levels, while increased the levels of triglycerides (TG) and glucose (GLU), multiple tissue reduced glutathione (GSH) levels, and key enzyme activities, including lactate dehydrogenase (LDH), lipase (LPS), alpha amylase (AMS), Na+/K+-ATPase, alkaline phosphatase (AKP) and other digestive metabolism related enzymes, as well as antioxidant enzymes such as catalase (CAT), glutathione peroxidase (GPx), and superoxide dismutase (SOD). The study indicates that FSE exhibits antifungal effects in pellet feed and can improve the digestive, absorption, and respiratory function as well as antioxidant capacity in C. carpio var. Jian.
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深海网箱是发展现代海洋渔业的一种重要养殖装备，其组成一般包括框架系统、网衣系统和锚碇系统。其中锚碇系统作为保障网箱安全运行的关键组成部分[1]，一直是网箱抗风浪性能研究的重点。深海网箱系泊形式主要分为多点式和单点式。多点式采用多个锚点固定网箱，网箱活动范围稳定、占用海域面积小，与其相关的水动力特性研究较多。宋协法等[2]根据Morison公式建立数学模型，采用Goodman-Lance方法求得网箱受力，并基于此方法对网箱的锚泊系统进行设计。Hou等[3-4]研究了极限状态下网格式系泊系统的可靠性，通过对网箱系泊系统疲劳损失的研究，建立数值模型用以预测系泊系统的失效概率。
然而，传统的多点式系泊网箱一般需要通过精确调整以使每个锚所受荷载相当，安装工艺较为复杂[5]，加上多点系泊网箱的活动范围较为固定，常年大规模养殖容易造成局部海洋环境污染，不利于养殖生产优质水产品。相比较多点式系泊方式，单点系泊网箱能够随着涨落潮在风浪流作用下进行360°全方位旋转，即风标效应，有效增加网箱的活动区域，大幅减少鱼饵残料、鱼排泄物等废弃物的海底沉积，并且单点系泊方式所需的硬件、安装和维护成本上也能大幅降低[6]。因此，单点式系泊被推荐为多点式系泊的替代方案[7]，国内外已有较多企业、科研机构开展相关研究，尤其在高海况条件下单点系泊网箱的安全性分析吸引了广泛关注。如2018年由挪威NSK公司研发设计、中集来福士公司负责建造的“Havfarm 1”深海养殖工船采用外转塔单点系泊系统[8]，采用单点系泊系统的大型船型养殖设施，往往需要考虑极限状态对系泊系统进行优化设计，以保证锚泊足够的安全可靠性[9]。由于实际海况环境条件下网箱所受的动力荷载是实时变化的，在研究分析单点系泊系统时需要考虑系泊系统和网箱之间的耦合以及网箱的运动响应[10]。目前常用的研究方法有数值模拟、物理模型试验、现场测量等。中国台湾学者Huang等[11-12]、Huang和Pan[13]采用数值模拟和现场测量的方法研究网箱的系泊受力，验证数值模型的有效性，并评估了缆绳失效的风险。Xu等[14]建立数值模型研究网箱前部刚性框架、连接点深度以及锚绳斜率对波流作用下单点系泊重力式网箱锚绳拉力的影响，并将结果与物理模型试验[15-17]进行比对，验证了该数值模型的可靠性。Huang等[18]通过物理模型试验，比较了3种不同的单点系泊方式并基于其中锚绳受力最小的系泊方式研究了网箱在波浪流作用下的运动响应。
本文针对一种船型桁架结构网箱的单点系泊系统 (Single-point mooring, SPM)，通过模型比尺为1∶40的网箱水动力物理模型试验，研究分析了在不同系泊方式、波浪流和有无网衣条件下网箱系泊受力情况，旨在了解网箱单点系泊系统的安全性能，为深海养殖网箱的安全性评估及锚泊系统的科学设计提供理论依据和关键数据支撑。
1. 材料与方法
1.1 设备与仪器
本研究船型桁架结构网箱单点系泊受力试验在中国水产科学研究院江苏如东试验基地进行。试验水池长50 m、宽26 m、深1.2 m，造波机总宽24 m，单块造波板宽度为0.5 m。水池前端及两侧配备直立式消能网，尾端为斜坡式消能网，用以减少波浪反射对试验的影响。浪高测量仪器为大连理工大学海岸及近海工程国家重点实验室研制的LYL-Ⅲ型浪高仪，量程介于0~50 cm，测试相对误差小于1%。系泊力测量采用应变式水下拉力计，具有良好的温度特性和水密性能，测力计量程200 N，误差小于1%。水流流速采用ADV声学多普勒流速仪测量，该仪器采样频率为200 Hz，测量量程为1 m∙s–1，精度为测量值的0.5%。对边界测量、底部测量和贴近水面的测量均能获得非常理想的数据。
1.2 网箱模型与布置
网箱采用全锚链单点系泊系统，主体为船型桁架与浮体混合结构，能够在台风大浪来临时自适应调整自身位置，大幅减小风浪对网箱的冲击，具备安全性高、结构稳定性强等特点，网衣铺设固定在桁架内侧，即使在大水流的作用下也能保证网箱的养殖空间 (图1)。同时可通过网箱前、后端浮体压载水实现平台的整体上浮和下潜，满足养殖过程的操作需求。原型网箱长102.2 m、宽35.1 m、型深9 m，艏部浮体高17.5 m，艉部浮体高17 m，正常吃水8.2 m。锚链采用直径62 mm的AM 3级锚链钢，其单位长度质量为84.2 kg∙m–1。
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图 1 船型桁架结构深海养殖网箱设计示意图Fig. 1 Schematic diagram of design of deep-sea aquaculture cage with ship-type truss structure本试验采用正态模型，根据《波浪模型试验规程》(JTJ/T 234—2001) 相关规定，同时考虑设备的综合能力，模型比尺设定为1∶40。根据重力相似准则，时间比尺为1∶
$\sqrt {40} $ ，动力相似比尺为1∶64 000，网箱结构主要参数见表1，模型试验布置见图2。由于原型网衣的网目及线径尺寸较小，若按照1∶40的比尺进行缩放，现实试验中往往很难实现，关于这方面的研究各国学者也开展了很多工作，谢璇[19] 详细探讨了关于网衣的相似准则及应用的合理性。本试验采用桂福坤等[20]、李玉成等[21]提出的网衣变尺度相似准则，即网衣三维大尺度的长宽高采用大比尺1∶40，网目及目脚直径采用小比尺，设定为1∶1，网衣材质采用与原型网衣相同的聚乙烯 (PE) 网，网衣底部与桁架底端连接固定。为了最大程度减小边界效应的影响，同时满足试验规程的相关要求，网箱模型布置与造波板距离应大于6倍波长。表 1 网箱结构主要参数Table 1 Main parameters of cage组件
Component参数
Parameter模型值
Model value原型值
Prototype value桁架
Truss长度 Length/m 2.55 102.2 宽度 Width/m 0.88 35.1 型深 Height/m 0.225 9 吃水 Draft/m 0.205 8.2 质量 Mass/kg 8.17 523.4×103 网衣
Netting高度 Height/m 0.225 9 网目 Mesh size/mm 45 45 目脚直径
Twine diameter/mm2 2 材料 Material PE PE 锚链
Anchor chain长度 Length/m 2.25 90 单位质量
Mass/(g∙m–1)52.6 84.18×103 材料 Material 304不锈钢链条 AM3级锚链钢 浮体
Buoyant hull高度 Height/m 0.43和0.44 17和17.5 形状 Shape 八棱柱组合体 八棱柱组合体 1.3 波浪要素和数据采集
根据重力相似原理，几何比尺1∶40，试验波浪流要素见表2。模型放置之前，先进行凑波、凑流试验，波浪平均波高和波周期偏差控制在±3%，水流平均流速偏差控制在±5%。规则波采用10~20个波的平均波高，每组工况进行多次试验，分析结果，剔除明显错误或重复性不好的试验组次，保留3组重复性较好的试验组次，取平均值。
表 2 试验波浪参数Table 2 Wave parameters in physical model test波流要素
Wave-stream
element原型工况
Full-scale
condition模型工况
Model-scale
condition波高 Wave height 3 m 7.5 cm 4 m 10.0 cm 5 m 12.5 cm 6 m 15.0 cm 7 m 17.5 cm 周期 Wave period/s 9 1.4 11 1.7 13 2.1 流速 Current velocity/(m∙s–1) 0.6 9.5 0.9 14.2 1.2 19.0 1.4 试验方案设计
本试验主要研究网箱2种系泊方式网箱受力，一种为正常工况，单点双侧“Y”字型系泊 (图3-a)，另一种基于“Y”字型的单侧失效工况 (图3-b中“一”字型系泊)。
双侧“Y”字型系泊，前段两根1.5 m长锚链与网箱艏部两端相连，后段一根0.75 m长锚链与锚固点连接，节点处悬一挂重，质量78 g (原型5 t)。测量该系泊方式下的网箱受力需两个测力计，分别布置在图3-a中①和②号点，网箱系泊受力数据采用两个测力计在网箱中线上的合力，计算方式如下：
$$ F = \left( {{F_1} + {F_2}} \right) \times \cos {15^ \circ } $$ (1) “一”字型系泊，作为“Y”字型系泊一侧失效的情况，通过一根2.25 m长的锚链与网箱艏部相连，在锚链距离底端0.75 m处悬一相同挂重。该种布置方式只需一个测力计，放置在锚链末端图3-b中③号点位置，该点受力即为网箱系泊受力，计算方式如下：
$$ F = {F_3} $$ (2) 式 (1) 和 (2) 中：F为网箱系泊受力合力；F1、F2、F3分别为①、②、③号点的测力计所测网箱受力。
通过波浪试验对比分析2种系泊方式条件下的网箱受力变化，了解“Y”字型系泊一侧失效后会引起网箱的受力如何变化，从安全性、稳定性等方面评估其风险。在此基础上，进一步开展“Y”字型系泊网箱受外界环境和自身结构等因素影响的相关试验研究。外界环境因素主要分析波浪流对网箱受力的影响，自身结构因素主要分析网箱在有网衣和无网衣时的受力，旨在为网箱系泊系统的设计安装、维护及运行等提供数据参考和理论依据。
2. 结果与分析
2.1 2种系泊方式受力比较
采用“一”字型和“Y”字型2种不同系泊方式时，网箱在不同波高和周期的规则波作用下受力变化情况见图4。2种系泊方式的网箱受力均随着波高的增加而增大，相同波况条件，“一”字型系泊网箱受力总比“Y”字型系泊大，增幅见表3。波高H=7.5 cm时网箱受力的增幅最大，H=15 cm时增幅最小。这是因为小波高条件下网箱的运动响应程度较低，2种系泊方式的网箱受力较小，随着波高的增加，网箱运动响应程度显著提升，网箱受力也随之明显增大。但2种系泊方式的网箱受力在增量上虽有所差异却没有形成数量级差，因此整体上网箱受力增幅的变化趋势为随波高的增加而减小。
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图 4 不同系泊方式下网箱随波高、周期变化受力曲线Fig. 4 Stress curves of net cage with wave height and period under different mooring modes表 3 单侧失效后网箱受力变化Table 3 Force change of cages after unilateral failure周期1.4 s Wave period 1.4 s 周期1.7 s Wave period 1.7 s 波高
7.5 cm波高
10 cm波高
12.5 cm波高
15 cm波高
7.5 cm波高
10 cm波高
12.5 cm波高
15 cm增幅 Amplification/% 68.20 31.90 62.60 49.90 75.40 34.40 17.60 16.10 增量 Increment/N 0.58 0.9 4.91 9.68 0.49 0.86 1.24 2.48 同时，也正因为小波高时的网箱受力较小，受外界影响的相对误差更大，比值关系将进一步放大误差，仅采用增长幅度或比值作为分析依据难以更好地说明试验结果，因此考虑结合绝对值增量进行对比分析。可以看出，不管是“一”字型系泊还是“Y”字型系泊，网箱受力均随着波高的增加而增大，周期较小(T=1.4 s)时这种变化趋势更为明显。但同时两者之间的差值也越来越大 (表3)，单侧失效后网箱受力增量随波高的增加而增大。
系泊方式的改变会引起网箱受波浪作用后的整个形态发生较大变化，采用“Y”字型系泊时，潜浮式网箱艏部梯形挡板结构是影响网箱水阻力大小的主要原因，采用“一”字型系泊时，影响网箱受力大小除艏部挡板外还有侧边网箱的桁架结构。如网箱由“Y”字型系泊一侧失效后变为“一”字型系泊，艏部挡板会由正向面对波浪 (图3-a)，转动一定角度变为侧向面对波浪 (图3-b)，网箱桁架结构也更多地暴露在波浪冲击之下，造成两者之间的受力大小差异。
2.2 大浪条件下网箱系泊受力
获取网箱在环境较恶劣时的受力数据，对于评估其安全性和稳定性必不可少，同时还可作为锚泊系统规格选择和安装的参考依据，为此围绕“Y”字型系泊网箱在大浪条件下的受力特性开展了试验研究。图5是波高12.5~17.5 cm、周期为1.4~2.1 s时的网箱系泊受力变化。相同周期时网箱系泊受力随波高的增加而增大、周期为1.4 s时波高从12.5 cm增大到17.5 cm，网箱系泊受力分别增长了147.4%、162.4%；周期为1.7 s时分别增长了118.4%、141.8%；周期为2.1 s时分别增长了122.2%、112.7%。随着周期的增加，网箱受力增幅有所下降。在相同波高条件下网箱受力随周期的增加逐渐减小，这是因为随着周期的增加，相同波高的波陡减小，使得波浪拍击在网箱上的有效受力面积减小，同时波浪“击打”的频率也减小，导致网箱受力随之减小。
2.3 流速对网箱系泊受力的影响
波流联合作用是确定网箱恶劣环境最大受力的重要方式。图6是在大浪条件下加入3个不同的流速后网箱系泊力变化曲线。流速介于9.5~19 cm∙s–1，网箱系泊受力随着流速的增加而增大，随波浪周期的增加而减小。波浪和水流的变化对网箱系泊受力均有较大影响，波高12.5 cm、周期1.4~2.1 s时，流速由9.5 cm∙s–1增大至19 cm∙s–1，系泊力分别增加了102%、109%、90%。
与纯波作用时的网箱受力相比，波流共同作用下，受力有增也有减。一般情况下，增大流速会使得网箱的受力增加，但小流速大波高时存在波流作用下的网箱系泊受力较纯波作用小的现象。这可能是因为大波高时，小流速一定程度上会减小网箱的纵荡运动，使其小于单纯波浪条件下的纵荡幅度，网箱因纵荡幅度减小，由于惯性运动作用于锚绳上的脉冲效应也相应减小，最终导致锚绳受力小于单纯波浪条件下的受力。而当水流较大时，水流自身作用于网箱的荷载超过了网箱惯性运动产生的脉冲效应影响，从而导致锚绳受力大于单纯波浪条件下的受力。
2.4 网衣对网箱系泊受力的影响
网衣系统是深海网箱的重要组成部分，网箱添加网衣后，会增加网箱的自重和水阻力，造成网箱周边的流场变化，影响网箱受力。本组试验将网箱网衣拆除，以系泊受力为研究对象，重点开展在无网衣时网箱受波浪流作用下的受力研究。将试验结果与网箱有网衣时的受力进行比较，旨在了解网衣对网箱系泊受力的影响，为网箱的运行管理提供理论依据和数据参考。
表4和表5为网箱有、无网衣时在纯波和波流联合作用下的受力变化。无论是纯波还是波流联合，当网箱增加网衣后，其系泊力明显增大。工况1—4即纯波作用下，网箱增加网衣后系泊力分别增加了138.3%、254.7%、136.9%、159.6% (表4)。同周期时，随着波高的增加系泊力增幅也有所增大。
表 4 网箱有、无网衣时在纯波作用下的受力Table 4 Force of net cage with or without netting under pure wave action序号
No.波况
Wave condition系泊力
Mooring force/N无网衣
Non-netting有网衣
Netting1 T=1.4 s, H=12.5 cm 3.29 7.84 2 T=1.4 s, H=15.0 cm 5.47 19.4 3 T=1.7 s, H=12.5 cm 2.98 7.06 4 T=1.7 s, H=15.0 cm 5.94 15.42 表 5 网箱有、无网衣时在波流联合作用下的受力Table 5 Force of net cage with or without netting under combined action of wave and current序号
No.波流工况
Wave-current condition系泊力
Mooring force/N无网衣
Non-netting有网衣
Netting5 v=9.5 cm∙s–1, H=12.5 cm 16.09 23.22 6 v =9.5 cm∙s–1, H=15.0 cm 19.14 30.79 7 v =14.2 cm∙s–1, H=12.5 cm 34.72 44.62 8 v =14.2 cm∙s–1, H=15.0 cm 42.13 56.08 注：波流试验中，规则波周期为T=1.4 s Note: Regular wave period T=1.4 s in wave-current test 工况5—8即波流联合作用下的网箱受力，相较于单纯的波浪作用，增大水流后网箱的整体受力均大幅增加，如工况1和7，网箱系泊受力在无网衣和有网衣时分别增加了9.55和4.69倍 (表5)。这与Colbourne和Allen[22]、Cifuentes和Kim[23]得出的结论一致，即在波流联合作用下，波高和水流流速对网箱系泊力存在同向影响，但其中流速起主导作用。波浪在水流中的变形，使得一定波高下的波浪对网箱受力的影响减小；另外，因为网箱艏部为梯形挡板结构，水流的存在会一直推着整个网箱向水流方向移动，使得锚链一直处于有一定预应力的状态，减弱了波浪的脉冲作用。因此可以看出，波流作用下网箱增加网衣后其系泊力增大幅度为44.3%、60.9%、28.5%、33.1%，较纯波作用时均有所减小。
3. 结论
本文首先通过对比2种单点系泊方式下的网箱系泊受力，分析了系泊失效后引起的网箱受力变化，发现当“Y”字型系泊一侧失效后，将导致网箱安全性明显降低。在此基础上，进一步开展“Y”字型系泊网箱受外界环境 (波浪流作用) 和自身结构 (有无网衣) 等因素影响的相关试验研究。得出如下结论：
1) 2种系泊条件下，网箱受力均随波高的增加而增大。当一侧系缆失效，即由“Y”字型系泊变为“一”字型系泊时网箱的受力明显增大，在本试验工况下 (原型波高3~6 m，周期9、11 s)，网箱受力的增幅达16.1%~75.4%。
2) 大浪条件下网箱受力随波高的增加而急剧上升，尤其是对于大而陡峭的波，即波高大、周期短的波浪，网箱受力增幅更为明显。
3) 波流试验中，网箱系泊受力与流速变化呈正相关，与周期变化呈负相关。与纯波试验相比，仅在小流速大波高时网箱系泊受力因所受惯性力差异影响而有所减小，多数情况下网箱受力处于增大的变化趋势。
4) 网箱有网衣和无网衣其系泊受力有较大差异。在本文纯波试验中网箱增加网衣后其系泊受力均增大了1倍以上；波流共同作用时，增加网衣后的网箱系泊受力增大，但增幅较纯波时小得多。在表5中5—8工况 (原型波高5、6 m，周期9 s，流速0.6、0.9 m∙s–1)下，网箱受力增幅介于30%~60%。
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图 1 添加当归副产物提取物的鱼饲料的霉菌生长图片
Figure 1. Image of mold growth in fish feed containing extracts of A. sinensis by-product
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图 2 添加当归副产物提取物的饲料霉菌生长水平与其黄酮类物质和藁本内酯含量的关系
注：霉菌生长水平以“+”的个数表示。
Figure 2. Correlation of flavonoid (a) and ligustilide (b) content with level of mold growth in fish feed containing extracts ofA. sinensis by-product
Note: The level of mold growth is represented by the number of “+”.
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图 3 添加不同浓度当归副产物脂溶性提取物的颗粒饲料的霉菌生长图片
Figure 3. Image of mold growth in pellet feed containing different concentration of fat soluble extract of A. sinensis by-product
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图 4 添加不同水平的当归副产物脂溶性提取物的颗粒饲料霉菌生长水平的多项式回归分析
Figure 4. Polynomial regression analysis of level of mold growth in pellet feed containing different concentration of fat soluble extract of A. sinensis by-product
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图 5 投喂不同水平当归副产物脂溶性提取物的鲤血浆血红蛋白含量和乳酸脱氢酶活性的回归分析
Figure 5. Regression analysis of content of hemoglobin (Hb) and activity of lactate dehydrogenase (LDH) in plasma of C. carpio var. Jian fed with diets containing different concentration of fat soluble extract of A. sinensis by-product
表 1 基础日粮组成及其营养含量
Table 1 Composition and nutrient contents in basal diet
成分Ingredient 质量分数 Mass fraction/% 营养Nutrient③ 质量分数 Mass fraction/% 鱼粉Fish meal 33.00 干物质Dry matter 93.33 葵花籽粕Sunflower seed meal 11.00 粗蛋白Crude protein 34.67 菜籽粕Rapeseed meal 11.00 粗脂肪Crude lipid 5.78 面粉Wheat flour 39.00 粗灰分Ash 5.97 DL-蛋氨酸DL-methionine 0.70 赖氨酸Lysine 0.50 苏氨酸Threonine 0.80 玉米油Corn oil 2.00 维生素预混料Vitamin mixture① 1.00 矿物质预混料Mineral mixture② 1.00 注：①维生素预混料为每千克饲粮提供：维生素A醋酸酯 (500 000 IU·g−1) 0.80 g；维生素D3 (500 000 IU·g−1) 0.48 g；DL-α-生育酚乙酸酯 (w, 50%) 20.00 g；维生素K3 (w, 23%) 0.43 g；维生素B1 (w, 90%) 0.11 g；核黄素 (w, 80%) 0.63 g；盐酸吡哆醇 (w, 81%) 0.92 g；维生素B12 (w, 1%) 0.10 g；抗坏血酸乙酸酯 (w, 93%) 7.16 g；D-泛酸钙 (w, 90%) 2.73 g；烟酸 (w, 99%) 2.82 g；D-生物素 (w, 2%) 5.00 g；内消旋肌醇 (w, 99%) 52.33 g；叶酸 (w, 96%) 0.52 g。②矿物质预混料为每千克饲粮提供：七水硫酸铁 (铁含量为20%) 69.70 g；五水硫酸铜 (铜含量为25%) 1.20 g；七水硫酸锌 (锌含量为23% ) 21.64 g；一水硫酸锰 (锰含量为32%) 4.09 g；五水亚硒酸钠 (硒含量为1% ) 2.50 g；碘化钾 (碘含量为4% ) 2.90 g；碳酸钙 897.98 g。③营养水平均为实测值。 Note: ①Per kg of vitamin mix: Retinyl acetate (500 000 IU g−1) 0.80 g; Cholecalciferol (500 000 IU g−1) 0.48 g; DL-α-tocopherol acetate (50%) 20.00 g; Menadione (23%) 0.43 g; Thiamin nitrate (90%) 0.11 g; Riboflavine (80%) 0.63 g; Pyridoxine HCl (81%) 0.92 g; Cyanocobalamin (1%) 0.10 g; Ascorhyl acetate (93%) 7.16 g; D-calcium pantothenate (90%) 2.73 g; Niacin (99%) 2.82 g; D-biotin (2%) 5.00 g; Meso-inositol (99%) 52.33 g; Folic acid (96%) 0.52 g. ②Per kg of mineral mix: FeSO4·7H2O (20% Fe) 69.70 g; CuSO4·5H2O (25% Cu) 1.20 g; ZnSO4·7H2O (23% Zn) 21.64 g; MnSO4·H2O (32% Mn) 4.09 g; Na2SeO3·5H2O (1% Se) 2.50 g; KI (4% I) 2.90 g; CaCO3, 897.98 g. ③Nutrient levels are all measured values. 
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表 2 鲤各组织器官测定的生化指标
Table 2 Biochemical indicators of various tissues and organs in carp
采样部位 Sampling issue 生化指标 Biochemical indicator 血浆 Plasma 血红蛋白 (Hb)、乳酸脱氢酶 (LDH)、碱性磷酸酶 (AKP)、酸性磷酸酶 (ACP)、甘油三脂 (TG)、葡萄糖 (GLU) 肝胰脏 Hepatopancreas 脂肪酶 (LPS)、α-淀粉酶 (AMS)、过氧化氢 (H2O2)、过氧化氢酶 (CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GPx)、还原型谷胱甘肽 (GSH) 肠道 Intestine α-淀粉酶 (AMS)、Na+/K+-ATP酶 ( Na+/K+-ATPase)、碱性磷酸酶 (AKP)、过氧化氢 (H2O2)、丙二醛 (MDA)、超氧化物歧化酶 (SOD)、过氧化氢酶 (CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GPx) 肌肉 Muscle 抗超氧阴离子 (ASA)、抗羟自由基 (AHR)、超氧化物歧化酶 (SOD)、还原型谷胱甘肽 (GSH) 鳃 Gill 抗超氧阴离子 (ASA)、过氧化氢酶 (CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GPx)、还原型谷胱甘肽 (GSH) 红细胞 Erythrocyte 高铁血红蛋白 (MetHb)、过氧化氢 (H2O2)、抗羟自由基 (AHR)、超氧化物歧化酶 (SOD)、过氧化氢酶 (CAT)
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表 3 不同当归副产物提取物对鱼饲料霉菌生长的影响
Table 3 Effect of different extracts of A. sinensis by-product on growth of mold in fish feed
提取物Extract “+”的个数Number of "+" 空白Control 5.00±0.00Dd 当归副产物石油醚提取物PEE 0.00±0.00Aa 当归副产物乙酸乙酯提取物EAE 0.33±0.47Aa 当归副产物乙醇提取物EE 2.67±0.47Bb 当归副产物水提取物AQE 3.67±0.47Cc 注：同列数据中，不同上标小写字母表示组间差异显著 (p<0.05)；不同上标大写字母表示差异极显著 (p<0.01)。 Note: Within the same column, different superscripts and lowercase letters represent significant differences among the groups (p<0.05); different superscripts with capital letters represent very significant differences (p<0.01).
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表 4 添加不同浓度的当归副产物脂溶性提取物的颗粒饲料的霉菌生长水平
Table 4 Level of mold growth in pellet feed containing different concentration of fat soluble extract ofA. sinensis by-product
当归副产物脂溶性提取物 FSE/% “+”的个数 Number of “+” 0.0 5.00±0.00Ee 0.2 5.00±0.00Ee 0.4 4.33±0.47Dd 0.8 4.33±0.47Dd 1.2 2.33±0.47Cc 1.6 1.00±0.00Bb 2.0 0.00±0.00Aa 注：同列数据中，不同上标小写字母表示组间差异显著 (p<0.05)；不同上标大写字母表示差异极显著 (p<0.01)。 Note: Within the same column, different superscripts and lowercase letters represent significant differences among the groups (p<0.05); different superscripts with capital letters represent very significant differences (p<0.01).
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表 5 投喂不同浓度当归副产物脂溶性提取物的鲤血浆生化指标值
Table 5 Biochemical indicators in plasma of C. carpio var. Jian fed diets containing different concentration of fat soluble extract of A. sinensis by-product
当归副产物脂溶性
提取物FSE/%血红蛋白
Hb/(g·L−1)乳酸脱氢酶
LDH/(U·L−1)碱性磷酸酶AKP/
(U·100 mL−1)酸性磷酸酶ACP/
(U·100 mL−1)甘油三酯
TG/(mmol·L−1)葡萄糖
GLU/(mmol·L−1)0.0 9.38±0.95Bc 839.67±82.27Aa 10.39±0.21Cc 5.29±0.09Aa 0.51±0.03Aa 6.08±0.70Aa 0.2 8.48±0.77ABbc 838.49±40.39Aa 10.07±0.09BCb 5.40±0.03Aa 0.89±0.18BCb 6.83±0.53Aa 0.4 6.94±1.39ABab 811.46±57.41Aa 9.79±0.14ABa 5.80±0.14ABab 0.80±0.01Bb 7.19±1.17Aa 0.8 5.54±0.24Aa 876.93±93.28Aab 9.74±0.08ABa 6.76±0.48Bbc 1.06±0.08CDc 10.18±0.77Bb 1.2 6.81±0.94ABab 1 000.15±153.38ABb 9.62±0.19Aa 6.32±0.51ABbc 1.19±0.16Dc 7.04±0.70Aa 1.6 6.89±0.82ABab 996.92±79.81ABb 9.65±0.07Aa 9.85±0.96Cd 0.85±0.04Bb 6.60±0.40Aa 2.0 14.89±2.84Cd 1 181.91±112.82Bc 9.53±0.28Aa 11.45±0.51De 0.83±0.03Bb 6.22±0.22Aa 注：同列数据中，不同上标小写字母表示组间差异显著 (p<0.05)；不同上标大写字母表示差异极显著 (p<0.01)。 Note: Within the same column, different superscripts and lowercase letters represent significant differences among the groups (p<0.05); different superscripts with capital letters represent very significant differences (p<0.01).
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表 6 投喂不同浓度当归副产物脂溶性提取物的鲤肝胰脏生化指标值
Table 6 Biochemical indicators in hepatopancreas of C. carpio var. Jian fed with diets containing different concentrations of fat soluble extract of A. sinensis by-product
当归副产物脂溶性
提取物FSE/%脂肪酶
LPS/(U·g−1)α-淀粉酶AMS/(U·mg−1) 过氧化氢H2O2/(mmol·g−1) 过氧化氢酶CAT/(U·mg−1) 谷胱甘肽过氧化物酶GPx/(U·mg−1) 还原型谷胱甘肽GSH/(mg·g−1) 0 29.09±3.17Aa 1.04±0.12Aa 15.28±1.09Bc 14.42±2.96Aa 451.33±12.17Aa 8.23±1.21a 0.2 40.23±6.01Bb 1.18±0.10ABab 11.93±1.26Aab 19.17±3.31ABab 463.16±19.54ABa 8.28±1.58a 0.4 56.91±6.99Cc 1.32±0.16BCbc 12.18±2.13Aab 25.36±2.31BCb 564.91±66.83Cbc 8.81±1.02ab 0.8 54.15±5.32Cc 1.32±0.18BCbc 10.62±0.54Aa 25.36±5.32BCb 581.35±24.57Cc 9.00±1.53ab 1.2 40.23±4.34Bb 1.33±0.06BCbc 11.38±1.23Aab 24.29±4.19BCb 536.62±50.16BCbc 10.57±1.32b 1.6 35.03±3.62ABab 1.39±0.03BCc 12.41±0.77Aab 35.72±5.53Dc 519.95±24.62ABCb 10.17±1.10ab 2.0 27.76±5.25Aa 1.46±0.05Cc 13.26±1.76ABb 32.18±4.28CDc 520.93±30.58ABCb 9.72±0.77ab 注：同列数据中，不同上标小写字母表示组间差异显著 (p<0.05)；不同上标大写字母表示差异极显著 (p<0.01)。 Note: Within the same column, different superscripts and lowercase letters represent significant differences among the groups (p<0.05); different superscripts with capital letters represent very significant differences (p<0.01).
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表 7 投喂不同含量当归副产物脂溶性提取物的鲤肠道生化指标值
Table 7 Biochemical indicators in intestine of C. carpio var. Jian fed with diets containing different concentrations of fat soluble extract of A, sinensis by-product
当归副产
物脂溶性
提取物FSE/%α-淀粉酶AMS/
(U·mg−1)Na+/K+-ATP酶Na+/K+-
ATPase/
(U·mg−1)碱性磷酸酶AKP/(U·g−1) 过氧化氢H2O2/
(mmol·g−1)丙二醛
MDA/
(nmol·mg−1)超氧阴离子歧化酶SOD/
(U·mg−1)过氧化氢酶CAT/
(U·mg−1)谷胱甘肽
过氧化物酶GPx/(U·mg−1)0.0 1.24±0.06a 4.39±0.73ABbc 159.85±8.17a 27.09±3.37Cc 14.00±3.79CDc 73.30±15.32Aa 19.19±0.56Aa 32.06±5.54Aa 0.2 1.32±0.11ab 4.30±0.39ABbc 156.40±11.52a 18.80±3.57Bb 7.58±1.99ABab 74.86±1.89Aa 18.35±0.53Aa 48.77±8.57ABab 0.4 1.41±0.05b 4.48±0.60ABbc 164.04±10.33ab 16.15±2.95ABb 3.03±0.360Aa 84.49±7.97ABab 19.39±0.76ABa 54.81±3.68ABb 0.8 1.41±0.10b 4.83±0.73Bc 168.76±10.12ab 11.28±2.58Aa 3.42±0.66Aa 87.96±8.89ABab 21.00±1.33Bb 61.87±2.40Bb 1.2 1.38±0.05ab 3.60±0.53ABab 176.85±11.80b 10.67±1.13Aa 10.38±1.15BCb 90.89±10.37ABb 19.04±0.70Aa 117.21±18.09Cc 1.6 1.36±0.06ab 3.57±0.63ABab 162.75±10.37ab 11.02±2.17Aa 12.78±2.40CDbc 92.44±5.49ABb 19.27±0.98Aa 119.03±10.54Cc 2.0 1.26±0.14a 3.35±0.44Aa 155.49±6.96a 18.24±3.88Bb 16.16±3.08Dc 97.81±13.39Bb 18.62±0.65Aa 113.58±20.05Cc 注：同列数据中，不同上标小写字母表示组间差异显著 (p<0.05)；不同上标大写字母表示差异极显著 (p<0.01)。 Note: Within the same column, different superscripts and lowercase letters represent significant differences among the groups (p<0.05); different superscripts with capital letters represent very significant differences (p<0.01).
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表 8 投喂不同含量当归副产物脂溶性提取物的鲤肌肉生化指标值
Table 8 Biochemical indicators in muscle of C. carpio var. Jian fed with diets containing different concentrations of fat soluble extract of A. sinensis by-product
当归副产物脂溶性
提取物FSE/%抗超氧阴离子
ASA/(U·mg−1)抗羟自由基
AHR/(U·mg−1)超氧阴离子歧化酶
SOD/(U·mg−1)还原型谷胱甘肽
GSH/(μmol·g−1)0.0 144.39±5.36Aa 180.79±11.54ABab 86.20±5.99Aa 5.41±0.72Aa 0.2 151.85±1.57ABa 199.88±14.26BCbc 98.43±8.02ABCab 9.51±1.78Bb 0.4 158.32±5.46ABab 213.22±11.42Cc 113.12±3.78BCDbc 11.37±1.65BCDbcd 0.8 173.60±3.18BCbc 185.57±6.15ABCab 118.74±11.06CDcd 12.02±1.77BCDcd 1.2 170.62±4.69BCbc 179.28±18.07ABab 133.96±3.92Dd 12.87±1.12CDd 1.6 191.67±20.56Cd 186.04±9.61ABCab 93.68±17.81ABa 13.58±1.43Dd 2.0 186.36±16.67Ccd 170.25±15.84Aa 89.34±14.01Aa 10.25±1.74BCbc 注：同列数据中，不同上标小写字母表示组间差异显著 (p<0.05)；不同上标大写字母表示差异极显著 (p<0.01)。 Note: Within the same column, different superscripts and lowercase letters represent significant differences among the groups (p<0.05); different superscripts with capital letters represent very significant differences (p<0.01).
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表 9 投喂不同含量当归副产物脂溶性提取物的鲤鳃生化指标值
Table 9 Biochemical indicators in gill of C. carpio var. Jian fed with diets containing different concentrations of fat soluble extract of A. sinensis by-product
当归副产物脂溶性
提取物FSE/%抗超氧阴离子
ASA/(U·mg−1)过氧化氢酶
CAT/(U·mg−1)谷胱甘肽过氧化物酶
GPx/(U·mg−1)还原型谷胱甘肽
GSH/(mg·g−1)0.0 43.06±2.05Aa 3.91±0.21Aa 61.75±11.49Aa 3.06±0.41Aa 0.2 48.83±9.67ABab 4.31±0.28ABab 74.23±12.46ABa 3.77±0.53Aa 0.4 48.67±1.75ABab 5.85±0.47CDcd 103.43±8.01Cc 5.65±0.53Ab 0.8 52.25±2.05ABabc 5.76±0.90CDcd 138.38±19.22Dd 12.87±1.45Dd 1.2 59.73±7.53Bc 6.36±0.85Dd 97.71±13.49BCbc 12.22±2.57CDd 1.6 57.35±7.86Bbc 5.11±0.17BCbc 81.12±10.59ABCab 10.22±1.24BCc 2.0 56.71±6.44Bbc 4.92±0.26ABCb 66.12±11.18Aa 9.04±0.51Bc 注：同列数据中，不同上标小写字母表示组间差异显著 (p<0.05)；不同上标大写字母表示差异极显著 (p<0.01)。 Note: Within the same column, different superscripts and lowercase letters represent significant differences among the groups (p<0.05); different superscripts with capital letters represent very significant differences (p<0.01).
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表 10 投喂不同含量当归副产物脂溶性提取物的鲤红细胞生化指标值
Table 10 Biochemical indicators in erythrocytes of C. carpio var. Jian fed with diets containing different concentrations of fat soluble extract of A. sinensis by-product
当归副产物脂溶性
提取物FSE/%高铁血红蛋白MetHb/(g·L−1) 过氧化氢H2O2/(mmol·g−1) 抗羟自由基AHR/(U·mg−1) 超氧阴离子歧化酶SOD/(U·mg−1) 过氧化氢酶CAT/(U·mg−1) 0.0 5.22±0.82Bb 38.62±3.86Cc 40.43±2.39Aa 73.63±3.81Aa 7.06±0.49Aa 0.2 4.57±0.03Aa 26.72±2.65ABa 42.71±3.25ABab 73.64±8.68Aa 7.19±0.24Aab 0.4 4.31±0.09Aa 26.79±4.87ABa 45.38±0.97ABbc 74.36±7.52Aa 8.29±0.72Ab 0.8 4.42±0.06Aa 23.19±0.99Aa 45.10±4.43ABbc 74.20±2.46Aa 7.85±0.39Aab 1.2 4.49±0.04Aa 22.62±3.01Aa 46.91±3.60ABbc 79.20±5.82Aab 7.89±0.59Aab 1.6 4.44±0.05Aa 32.21±3.07BCb 48.84±1.89Bc 86.09±2.66Ab 8.25±0.87ABb 2.0 4.53±0.16Aa 35.73±4.68Cbc 46.75±3.04ABbc 110.51±12.86Bc 9.54±1.09Bc 注：同列数据中，不同上标小写字母表示组间差异显著 (p<0.05)；不同上标大写字母表示差异极显著 (p<0.01)。 Note: Within the same column, different superscripts and lowercase letters represent significant differences among the groups (p<0.05); different superscripts with capital letters represent very significant differences (p<0.01).
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