不同脱腥方法对薛氏海龙肽粉的脱腥效果比较

陈茂森, 黄晟, 于刚, 赖世钦, 蔡冰娜, 陈华, 邓琬波, 唐科, 杨文华, 王琴, 肖更生, 潘剑宇, 李骏

陈茂森, 黄晟, 于刚, 赖世钦, 蔡冰娜, 陈华, 邓琬波, 唐科, 杨文华, 王琴, 肖更生, 潘剑宇, 李骏. 不同脱腥方法对薛氏海龙肽粉的脱腥效果比较[J]. 南方水产科学, 2025, 21(1): 1-13. DOI: 10.12131/20240195
引用本文: 陈茂森, 黄晟, 于刚, 赖世钦, 蔡冰娜, 陈华, 邓琬波, 唐科, 杨文华, 王琴, 肖更生, 潘剑宇, 李骏. 不同脱腥方法对薛氏海龙肽粉的脱腥效果比较[J]. 南方水产科学, 2025, 21(1): 1-13. DOI: 10.12131/20240195
CHEN Maosen, HUANG Sheng, YU Gang, LAI Shiqin, CAI Bingna, CHEN Hua, DENG Wanbo, TANG Ke, YANG Wenhua, WANG Qin, XIAO Gengsheng, PAN Jianyu, LI Jun. Comparison of deodorization effects of different deodorization methods on Syngnathus schlegeli peptide powder[J]. South China Fisheries Science, 2025, 21(1): 1-13. DOI: 10.12131/20240195
Citation: CHEN Maosen, HUANG Sheng, YU Gang, LAI Shiqin, CAI Bingna, CHEN Hua, DENG Wanbo, TANG Ke, YANG Wenhua, WANG Qin, XIAO Gengsheng, PAN Jianyu, LI Jun. Comparison of deodorization effects of different deodorization methods on Syngnathus schlegeli peptide powder[J]. South China Fisheries Science, 2025, 21(1): 1-13. DOI: 10.12131/20240195

不同脱腥方法对薛氏海龙肽粉的脱腥效果比较

基金项目: 国家自然科学基金青年科学基金项目 (42006103);海南省深远海渔业资源高效利用与加工重点实验室开放基金 (KLEU-2023-1);热带亚热带特色水产食品加工与营养健康重点实验室项目 (2023KSYS006);中国科学院大学生创新实践训练计划项目 (5350210400-3)
详细信息
    作者简介:

    陈茂森 (2001—),男,硕士研究生,研究方向为食品加工与安全。E-mail: maosen_chen@163.com

    通讯作者:

    潘剑宇 (1979—),男,研究员,博士,研究方向为海洋生物资源高值化利用。E-mail: jypan@scsio.ac.cn

    李 骏 (1990—),男,副研究员,博士,研究方向为水产原料营养与活性组分。E-mail: lijun@zhku.edu.cn

  • 中图分类号: TS 254.4

Comparison of deodorization effects of different deodorization methods on Syngnathus schlegeli peptide powder

  • 摘要:

    薛氏海龙 (Syngnathus schlegeli) 肽粉因固有的腥味,限制了其在后续深加工产品中的应用和开发。实验采用葡萄糖糖化法、β-环糊精包埋法和葡萄糖-β环糊精联用3种方法对薛氏海龙肽粉进行脱腥处理,并通过运用感官评定、电子鼻和气相色谱-质谱联用仪 (GC-MS) 等技术手段,评估了原料的腥味脱除效果。结果显示,葡萄糖糖化法处理,可通过美拉德反应产生酯类成分以降低原料腥味成分的相对含量,其中腥味物质三甲胺的脱除率为91%,但原料基本风味损失较明显;β-环糊精包埋法处理有一定脱腥效果,三甲胺脱除率为16%,但腥味与刺激性风味仍有残留;葡萄糖-β环糊精联用法处理,在降低部分原料基本风味损失的基础上,可脱除醛类刺激性风味物质并显著减少了主要腥味成分,三甲胺的脱除率为93%,并可产生令人愉悦的风味成分。研究表明,葡萄糖-β环糊精的复合应用是一种简洁、有效的脱腥方式,可显著改善薛氏海龙肽粉的风味,为薛氏海龙肽粉在功能食品等深加工产品上的开发提供理论依据与技术支撑。

    Abstract:

    Syngnathus schlegeli peptide powder has an inherent fishy odor, which affects the development and application of its subsequent deep-processed products. We applied three methods, glucose glycation, β-cyclodextrin embedding and glucose-β-cyclodextrin combination treatment, for the deodorization of S. schlegeli peptide powder. Then we assessed the deodorization effect of raw materials through sensory evaluation, electronic nose and gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS). The results show that the glucose glycation treatment could produce esters to reduce the relative content of fishy ingredients through the Maillard reaction, and the removal of fishy substance trimethylamine was 91%. However, the basic flavour of the raw material lost obviously; the β-cyclodextrin embedding treatment had a certain deodorization effect, with a 16% trimethylamine removal rate, but the fishy and stimulating flavor were still left; the glucose-β-cyclodextrin combination treatment could significantly reduce the main fishy and aldehydes' irritating flavor substances as well as the loss of some basic flavor of raw materials, with a 93% trimethylamine removal rate and produced some pleasant flavor. It is showed that the application of glucose-β-cyclodextrin is a concise and effective method to remove fishy odors, which can significantly improve the flavor of S. schlegeli peptide powder. The research provides a theoretical basis and technical support for the development of S. schlegeli peptide powder in functional food and other deep processing products.

  • 神经肽是从神经系统和内分泌系统产生和释放,参与调节生物个体的生理活动,维持生物体内环境稳态的一类重要信号因子,是NEI系统中最重要的调节因子之一,在脊椎和无脊椎动物中均有免疫调节功能。其中FMRFamide (Phe-Met-Arg-Pheamide) 是一种酰胺化四肽,是类 FMRF酰胺肽 (FMRFarmide-related peptides, Farps或FMRFamide-like peptide, FLPs) 家族的成员。其在神经系统中合成并释放,能通过神经元直接传递信号,并作为神经递质、神经调质和神经激素发挥作用[1],是无脊椎动物中含量最丰富的一类神经肽[2]。此外,该神经肽也能通过内分泌系统调节摄食和运动行为[3]。近年来,FMRFamide的生理功能受到普遍关注,如Marciniak等[4]研究发现其具有特异性的心脏活性,能有效调节甲虫内脏肌肉的内源性收缩活性。Kim等[5]研究皱纹盘鲍 (Haliotis discus hannai) 发现,FMRFamide神经肽对海洋腹足类动物生殖调节有重要促进作用。FMRFamide也被发现能够通过抑制有丝分裂来保护细胞免受凋亡[6]。而作为无脊椎动物中特有的神经肽,一些研究也表明其可能参与了海洋无脊椎动物的免疫应答。如Li等[7]通过对太平洋牡蛎 (Crassostrea gigas) 炎症刺激后的FMRFanide多肽治疗,发现FMRFamide多肽不仅由神经内分泌系统合成,而且还在血细胞中合成加工,首次证实了该多肽存在于血细胞中。Guan等[8]对加利福尼亚海兔 (Aplysia california) 的研究发现FMRFamide可以通过激活P38丝裂原激活蛋白 (MAP) 激酶来调节突触的可塑性和调节免疫效应物。

    瘤背石磺 (Onchidium reevesii) 隶属于软体动物门、石磺科,又名土鸡、海赖子、涂龟、土海参等[9-10],常栖息在滩涂上的石缝中、植被的根部和阴暗潮湿的角落,主要分布于我国东部沿海地区[11-12]。瘤背石磺的中枢神经系统 (Central nervous system, CNS) 是一个简单的环状结构,体积大且易获得[13]。瘤背石磺不仅是研究无脊椎动物神经系统功能的模式种,而且由于其生活在潮间带,有良好的应激耐受机制,能适应波动的生存环境、各种重金属离子和病原体[14],对于研究无脊椎动物应对外界环境变化和病原入侵的免疫反应机制也有显著优势。为此,本研究在实验室瘤背石磺高通量转录组测序的基础上克隆得到了OrFMRFamide基因的全长,分析该基因的分子特征及其mRNA和多肽在组织中的分布,研究其在炎症刺激后的反应,从而为探究FMRFamide基因在瘤背石磺免疫机制中的作用提供了理论依据,也为进一步理解生活在潮间带的两栖类动物对恶劣环境的适应机理奠定基础。

    2020年6月初在江苏省盐城市沿海滩涂采集成体鲜活瘤背石磺,带回实验室后暂养于70 cm×120 cm×50 cm的塑料养殖箱内,养殖箱底部覆盖5~10 cm厚的海泥,种植滩涂采集的植被,放上瓦片,放养滩涂捕捉的螃蟹在泥中打洞,为石磺提供休息躲避的巢穴,尽可能地模拟自然生态环境,消除实验外干扰。每天早晚定时投喂玉米粉和喷洒海水保持土壤湿润,定期检查瘤背石磺生长状况,以确保其较高的成活率。暂养1周后,取5只体态均匀、健康有活力的瘤背石磺 [ 体长 (43.55±1.32) mm,体质量 (15.73±0.78) g],用超纯水清洗表面的泥沙,取血细胞、神经节、肝胰腺、肌肉、性腺、皮肤和腹足等组织用液氮速冻后放入–80 ℃冰箱备用,用于组织cDNA模板的制备。

    实验所用器皿均经180 ℃高温杀菌处理3 h或使用DEPC处理过后进行高压灭菌。实验开始前将所有器材预冷备用,全程在冰上操作,取–80 ℃保存的瘤背石磺各组织,按照Trizol (Invitrogen, 美国) 说明书提取各组织的总RNA。配制质量浓度为10 mg·mL−1的琼脂糖凝胶,135 V、电泳15 min检测RNA提取质量,在核酸检测仪上标定提取RNA的浓度和纯度。将神经节RNA按照PrimeScript II 1st Strand cDNA Synthesis Kit (TaKaRa) 说明书合成cDNA第一链,作为后续实验的RACE (Rapid-amplification of cDNA ends) 模板。将提取所得的各组织RNA按照PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (TaKaRa) 试剂盒说明书进行反转录,将获得的cDNA于–20 ℃保存备用。

    根据笔者实验室测得的转录组数据库 (未发表) 筛选得到目的基因的部分基因片段,使用Primer Premier 5.0软件设计2对引物,进行PCR扩增反应,反应产物用10 mg·mL−1的琼脂糖凝胶电泳检测,使用D2000 Ladder作为Maker,产物条带单一且清晰,送至苏州金唯智生物科技有限公司测序,测序结果在NCBI上BLAST比对,确认为FMRFamide基因片段,然后按照SMARTER® RACE5'/3'Kit及3'Full RACE Core Set With PrimerScriptTM RTase试剂盒的说明书在Primer Premier 5.0软件上设计5'和3' RACE特异性引物,通过RACE技术得到产物,产物经过1.0%琼脂糖凝胶电泳检测合格后送往苏州金唯智生物科技有限公司测序,将所得到的全部测序结果通过Sequebcher 5.0软件拼接得到OrFMRFamide基因的序列全长。

    把拼接得到的基因序列全长在NCBI上用ORF Finder (https://www.ncbi.nlm.nih.gov/orffinder/) 在线工具对OrFMRFamide基因开放阅读框 (Open reading frame, ORF) 及编码氨基酸进行预测,得到预测的编码氨基酸后在NCBI上用在线工具BLAST (https://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi) 进行同源性比较,使用NetNGlyc 1.0 Server (http://www.cbs.dtu.dk/services/NetNGlyc/) 在线工具确定糖基化位点,理化性质用ProtParam (http://web.expasy.org/protparam/) 在线工具分析,使用NetPhos 2.0 Server (http://www.cbs.dtu.dk/services/NetPhos–2.0/) 在线工具查找磷酸化位点,使用Signal 5.0 (http://www.cbs.dtu.dk/services/SignalP/) 在线工具查找信号肽。用MEGA-X软件基于比邻法,以1 000次Bootstraps构建瘤背石磺与其他物种FMRFamide基因的系统进化树。

    通过在线工具Genscrip (https://www.genscript.com/tools/real–time–pcr–taqman–primer–design–tool) 根据OrFMRFamide基因全长序列设计荧光定量引物 (表1),以18S作为内参基因,以上述验证过的瘤背石磺各组织cDNA为模板,使用 ChamQ Universal SYBR qPCR Master Mix (Vazyme,美国) 试剂盒在CFX-96 (Bio-Rad,美国) 进行荧光定量反应,每个样品和内参都设置3个平行对照,以Rnase-free双蒸水 (ddH2O) 为阴性对照,实时荧光定量PCR数据用2–ΔΔCT法进行分析。

    表  1  实验中所用引物序列
    Table  1.  Primers used in this experiment
    引物
    Primer
    引物序列 (5'–3')
    Primer sequence
    用途
    Function
    OrFMRFamide-F1 CTTAGGAGTGGGAACAGC 验证目的片段
    OrFMRFamide-R1 CGGCTGGAGATTTGATTG
    OrFMRFamide-F2 CGGACCAGTACGACCAAC
    OrFMRFamide-R2 GTTCAGTCCGCCCTAATG
    OrFMRFamide-3'RACE-inter ACTGGTTTGGGTAGCA 3'RACE 特异性引物
    OrFMRFamide-3'RACE-outer ATGGCAACAATGTCTTTCG
    OrFMRFamide-5'RACE-inter GAGCAGAAGATGGCGT 5'RACE 特异性引物
    OrFMRFamide-5'RACE-outer TCCTCGCTTTGCCTCA
    OrFMRFamide-RT-F AGCTGGAGGACACACTGAGGCA Real-time RT-PCR
    OrFMRFamide-RT-R TGCCACATCGCCCTCATCGG
    18S-F TCCGCAGGAGTTGCTTCGAT
    18S-R ATTAAGCCGCAGGCTCCACT
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    免疫组织化学取养殖箱暂养未经处理的5只瘤背石磺进行实验。采集未经处理的新鲜的神经节、肝胰腺、性腺、腹足、肌肉和皮肤,用4%的多聚甲醛固定6 h,转移至20%的蔗糖溶液固定过夜,然后转移至40%的蔗糖溶液固定到组织沉底,使用冰冻切片机 (莱卡CM1950) 切片后贴在黏附载玻片上,按照一步法免疫组化试剂盒 (凯基) 说明书完成免疫组化实验,用显微镜观察拍照。

    在养殖箱中暂养7 d后随机选取100只瘤背石磺,平均分为2组,暂养在2个养殖箱中,分别给每只瘤背石磺注射100 μL磷酸盐缓冲溶液 (Phosphate buffered saline, PBS) 和100 μL脂多糖 (LPS, 0.5 mg·mL–1,溶于PBS),经处理的瘤背石磺分别放回养殖箱暂养,分别在注射后第0、第6、第12、第24、第48小时取样,每次随机抽取9只石磺,将3只的血细胞、神经节、肝胰腺、肌肉、性腺、皮肤和腹足合并为1个样本,每个时间点采集3个平行样本。血细胞的采集是使用1 mL注射器从瘤背石磺腹部抽取血液,在800 ×g、4 ℃条件下离心10 min,获得血细胞后将其溶解在trizol中,用液氮速冻,于–80 ℃保存。其他组织取样后放入液氮速冻,于–80 ℃保存。用trizol法提取各组织RNA,用HiScript Q RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper, Vazyme,美国) 试剂盒进行反转录,得到的cDNA于–20 ℃备用。

    按照上述方法,以各组织各个时期刺激前后的cDNA为模板,18S为内参,进行实时荧光定量RT-PCR扩增实验,数据使用2–ΔΔCT法进行分析。

    使用SPSS 26.0软件对荧光定量的数据进行处理,单因素方差分析结果以“平均值±标准差 ($ \overline X \pm {\rm{SD}} $)”表示。P<0.05为差异显著,P<0.01为差异极显著。

    根据瘤背石磺转录组测序结果获得的OrFMRFamide基因片段,通过3'和5'-RACE扩增得到该基因全长序列为2 618 bp,开放阅读框 (Open reading frame, ORF)为882 bp,基因序列末端加尾信号AATAA与Poly (A) 之间有17个碱基 (图1)。ProtParam推测编码1个含有293个氨基酸的蛋白,分子量为33847.88 kD,理论等电点 (pI) 为9.25,不稳定指数为57.00,预测为不稳定蛋白,溶脂指数为55.67,平均疏水指数为–0.890。Server预测该蛋白不存在糖基位点。NetPhos 2.0 Server预测该蛋白含有12个磷酸化位点 [ 丝氨酸 (Ser):4;苏氨酸 (Thr):2;酪氨酸 (Tyr):6]。信号肽软件预测该基因有1个N端信号肽 (1~24)。

    图  1  FMRFamide基因的氨基酸序列及cDNA全长
    浅灰色阴影部分是该基因编码信号肽部分,起始密码子和终止密码子用方框标出,深灰色阴影是磷酸化位点,末端加尾信号AATAAA用下划线标出,poly (A) 用斜体表示
    Figure  1.  Amino acid sequence and full length cDNA of FMRFamide gene
    The light grey shaded portion is the signal peptide portion of the gene; the start and stop codons are boxed; the dark grey shaded portion is the phosphorylation site; the end plus tail signal AATAAA is underlined, and poly (A) is in italics.

    将预测得到的OrFMRFamide基因的氨基酸序列放到NCBI上进行BLAST比对,发现其与其他物种的FMRFamide基因有较高的同源性,下载这些物种的氨基酸序列,使用MEGA-X软件构建进化树 (图2)。结果显示,瘤背石磺和静水椎实螺 (Lymnaea stagnalis) 聚为一支,再与加利福尼亚海兔、棕蜗牛 (Cornu aspersum) 等腹足纲软体动物聚为一大支,与双壳纲海洋贝类聚为一大支,与环节动物和节肢动物各聚为一支。瘤背石磺与静水椎实螺进化关系最为接近。

    图  2  利用MEGA-X软件基于NJ法构建的FMRFamide系统进化树
    Figure  2.  NJ phylogenetic tree of FMRFamide by MEGA-X

    荧光定量RT-PCR结果显示,OrFMRFamide基因在神经节中的表达量极显著高于在其他组织的(P<0.01),此外,该基因也在血细胞、肝胰腺、皮肤、性腺组织中表达,几乎不在肌肉和腹足中表达 (图3)。以性腺的表达量为参照,血细胞、神经节、肝胰腺和皮肤的表达量分别约为性腺的2.33、1 025.47、36.96和6.86倍。

    图  3  OrFMRFamide在各组织的相对表达量
    **. 极显著性差异 (P<0.01)
    Figure  3.  mRNA relative expression of OrFMRFamide in different tissues
    **. Very significant at 0.01 level (P<0.01)

    利用免疫组织化学的方法分析瘤背石磺FMRFamide神经肽在神经节、肝胰腺、肌肉、性腺、皮肤和腹足中的分布情况 (图4),结果显示OrFMRFamide基因在不同组织中的表达模式和FMRFamide神经肽的分布水平相一致,在神经节中大量表达,在性腺、皮肤和肝胰腺中微量表达,在腹足和肌肉中几乎不表达。

    图  4  免疫组化结果
    a. 神经节;b. 腹足;c. 肝胰腺;d. 肌肉;e. 皮肤;f. 性腺;箭头表示FMRFamide多肽
    Figure  4.  Immunohistochemistry results
    a. Ganglia; b. Pleopod; c. Hepatopancreas; d. Muscle; e. Skin; f. Gonad; arrows represent FMRFamide polypeptides.

    基于瘤背石磺OrFMRFamide基因在不同组织中的相对表达量,研究该基因在LPS刺激后48 h内的表达变化 (图5)。LPS组肝胰腺中OrFMRFamide基因的表达量在注射后第12小时达最高值,与PBS组差异显著 (P<0.05),皮肤中OrFMRFamide基因的表达量随时间变化差异不大,但LPS组整体的表达量显著高于PBS对照组 (P<0.05),神经节中该基因的表达量在第12 小时达最高值,整体表达水平显著高于PBS对照组 (P<0.05),血细胞中该基因的相对表达量在第12小时达最高值,性腺中的表达量随时间变化的差异不显著,且LPS组和PBS组差异也不显著 (P>0.05)。

    图  5  OrFMRFamide基因在炎症刺激后在不同组织中的相对表达量
    图中不同字母表示差异显著 (P<0.05)
    Figure  5.  Relative expression of OrFMRFamide gene in different tissues after inflammatory stimulation
    Different letters in the figure indicate significant difference (P<0.05).

    本研究克隆了瘤背石磺FMRFamide基因,系统进化树显示其与静水椎实螺、棕蜗牛聚为一支,说明其与软体动物门腹足纲贝类的亲缘关系非常近,与软体动物双壳纲贝类明显区分开来。

    神经节、肝胰腺和血细胞属于NEI (神经节、肝胰腺、血细胞) 系统,有报道指出NEI系统在应激和感染过程中能维持机体内环境稳定,有效清除病原体,调节机体平衡,减少对宿主的伤害[15]。FMRFamide作为软体动物神经系统中的重要组成部分[16],实时荧光定量结果显示OrFMRFamide在神经节、血细胞和肝胰腺组织中均有较高的表达,在神经节中表达量最高,可能因为其参与神经系统中神经递质的合成和释放及神经内分泌系统的可塑性调节。杨金龙等[17]在研究厚壳贻贝 (Mytilus coruscus) 早期幼虫发育时也发现,FMRFamide大量存在于神经系统中。在其他软体动物如双壳纲[7,18]、腹足纲[19]、头足纲[20]中,FMRFamide多肽也被报道主要存在于神经系统、消化系统和血细胞中。FMRFamide在瘤背石磺NEI系统中的高表达说明该基因可能对瘤背石磺的稳态起重要作用,推测FMRFamide可能在神经节、肝胰腺和血细胞中合成和加工,然后通过自分泌/旁分泌信号通路释放到血细胞中来调节机体。荧光定量结果显示瘤背石磺FMRFamide还存在于皮肤中,高凤娟等[21]和Allan等[22]对花背蟾蜍 (Bufo raddei) 和北美木蛙 (Rana sylvatica) 的研究表明,两栖类动物皮肤具有先天免疫功能,说明瘤背石磺作为无贝壳的两栖型贝类,为适应潮间带恶劣的生存环境,FMRFamide多肽可能参与了其先天免疫。FMRFamide应用免疫组化学进一步证实了OrFMRFamide在不同组织中的分布和FMRFamide多肽的分布一致,这与Terrnina等[23]对猫肝吸虫 (Opisthorchis felineus) 和Allan等[22]对星虫 (Themiste lageniformis) 中FMRFamide的定位结果相似。

    炎症刺激实验结果显示,瘤背石磺神经节、肝胰腺和血细胞中FMRFamide基因相对表达量变化趋势为先上升后降低,在注射脂多糖12 h后的表达量达最大值,说明FMRFamide可能参与了免疫防御反应。在无脊椎动物中,血细胞被认为是宿主在免疫防御反应中起重要作用的免疫相关细胞[24],更有研究表明免疫细胞可以通过自分泌信号途径重新合成神经肽来调节肌体免疫反应[25-27]。Wang等[28]用寄生虫感染光滑双脐螺 (Biomphalaria glabrata),发现FMRFamide相对表达量高于对照组,FMRFamide表达量上升以抵抗寄生虫感染,这和本研究结果一致,可以推测FMRFamide多肽能保护机体免受侵害,响应免疫刺激,在维持机体稳态中发挥重要作用。炎症刺激后瘤背石磺性腺中FMRFamide相对表达量变化不显著,Hada等[29]研究发现FMRFamide还能影响根结线虫 (Meloidogyne graminicola) 的繁殖因子,Kerbl等[30]的研究也证实FMRFamide能作用于生殖腺,影响动物的交配行为,推测瘤背石磺性腺中的FMRFamide可能对瘤背石磺的繁殖有影响,但不参与维持自身稳态。

  • 图  1   不同处理方式的海龙肽粉电子鼻传感器雷达图分析

    注:W1C. 芳香族;W5S. 氮氧化合物;W3C. 氨及芳香成分;W6S. 氢化物;W5C. 烯烃及极性分子;W1S. 甲基类;W1W. 无机硫化物;W2S. 醇、醛、酮类;W2W. 有机硫化物;W3S. 烷烃及脂肪类。

    Figure  1.   Radar image analysis by electronic-nose sensors of Syngnathus peptide powder with different treatments

    Note: W1C. Aromatics; W5S. Nitrogen oxides; W3C. Ammonia and aromatic constituents; W6S. Hydrogen compounds; W5C. Olefins and polar molecules; W1S. Methyls; W1W. Inorganic sulfides; W2S. Alcohols, aldehydes, and ketones; W2W. Organosulfides; W3S. Alkanes and aliphatics.

    图  2   不同处理方式的海龙肽粉电子鼻PCA分析

    Figure  2.   PCA analysis by electronic nose for Syngnathus peptide powders with different treatments

    图  3   海龙肽粉脱腥处理前后风味物质数量变化

    Figure  3.   Changes in quantity of flavour substances before and after Syngnathus peptide powder deodorization treatment

    图  4   不同处理方式下各样品挥发性成分峰面积及相对内标质量分数的分布

    Figure  4.   Distribution of peak area and relative internal standard content of volatile components of each sample with different treatments

    图  5   脱腥处理前后海龙肽粉的挥发性成分聚类分析热图

    Figure  5.   Heatmap of clustering analysis of volatile components in Syngnathus peptide powder before and after deodorization treatment

    表  1   腥味感官评定标准

    Table  1   Sensory evaluation standards for deodorization effect

    评分标准  
    Scoring standard  
    分值
    Score
    无法接受 Unacceptable 1
    腥味过重,但还能接受
    Fishy flavour overpowering but acceptable
    2
    腥味明显 Fishy flavour is obvious 3
    腥味感知轻微 Fishy odor perception is slight 4
    无明显腥味 No obvious fishy odor 5
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    表  2   感官评定结果

    Table  2   Sensory evaluation result

    样品名称
    Sample name
    脱腥得分
    Fishy odor removal score
    海龙肽粉
    Syngnathus peptide powder
    1.86±0.69b
    葡萄糖-β环糊精处理
    Glucose-β cyclodextrin treatment
    4.14±0.90a
    葡萄糖处理
    Glucose treatment
    3.57±0.53a
    β-环糊精处理
    β-cyclodextrin treatment
    3.29±0.76a
    烘干处理
    Drying treatment
    3.29±1.11a
    注:同列中不同字母表示差异显著 (p<0.05)。 Note: Different letters within the same column represent significant differences (p<0.05).
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    表  3   不同处理方式下海龙肽粉挥发性物质的相对气味活度值

    Table  3   Relative odor activity values of volatile components of Syngnathus peptide powder with different treatments

    化合物种类
    Compound type
    化合物名称
    Compound name
    觉察阈值
    Perceptual
    threshold/
    (μg·g−1)
    气味特征
    Odor characteristics
    相对气味活度值 OAV (≥1)
    海龙肽粉
    Syngnathus
    peptide
    powder
    葡萄糖-β
    环糊精处理
    Glucose-β
    cyclodextrin
    treatment
    葡萄糖处理
    Glucose
    treatment
    β-环糊精处理
    β-cyclodextrin
    treatment
    烘干处理
    Drying
    treatment
    醛类
    Aldehydes
    2-甲基-2-丁烯醛
    2-Butenal, 2-methyl-
    0.500 0 坚果味、八角茴香、果香味 2.383
    2-甲基丁醛
    Butanal, 2-methyl-
    0.001 0 霉味、发酵烘培味 4 850.617 82.916
    巴豆醛
    2-Butenal
    0.000 3 泼辣刺激气味 905.382
    苯甲醛
    Benzaldehyde
    0.750 9 苦杏仁气味 10.430 1.177 1.075
    丙醛
    Propanal
    0.015 1 窒息性刺激气味 152.632 21.067
    丁醛
    Butanal
    0.002 0 窒息性醛味 630.953
    戊醛
    Pentanal
    0.012 0 刺激性气味、果味 220.717 184.591 117.836
    乙醛二乙缩醛
    Ethane, 1,1-diethoxy-
    0.004 9 泥土味、甜 85.364 86.528 107.321 99.581 96.247
    异丁醛
    Propanal, 2-methyl-
    0.001 5 刺激性的气味 668.966
    异戊醛
    Butanal, 3-methyl-
    0.001 1 刺激性气味、果味 15 511.368 426.557 386.893 2 177.683 1 538.387
    庚醛
    Heptanal
    0.002 8 醛脂肪气味 101.112 86.106 792.141 972.889
    壬醛
    Nonanal
    0.001 1 果香味、腊味、
    豌豆味
    1 145.376 4 858.036 2 605.545
    辛醛
    Octanal
    0.000 6 脂肪味、果香 201.025
    醇类
    Alcohols
    1-戊烯-3-醇
    1-Penten-3-ol
    0.358 1 黄油、草味 199.141 0.935 1.121 14.972 14.956
    2-乙基己醇
    1-Hexanol, 2-ethyl-
    0.800 0 甜味和淡淡的花香 30.249 22.252 17.300 30.786 26.494
    反-2-戊烯-1-醇
    2-Penten-1-ol,(E)-
    0.089 2 蘑菇味 112.242 9.934
    庚醇
    1-Heptanol
    0.005 4 微弱酒精气味 609.254
    己醇
    1-Hexanol
    0.005 6 酒精的气味、微甜 467.411 318.369 181.084 649.888 307.682
    蘑菇醇
    1-Octen-3-ol
    0.001 5 蘑菇、干草香气 8 465.010 1 163.567 782.360 1 677.544
    顺-2-戊烯醇
    2-Penten-1-ol,(Z)-
    0.720 0 果香味 40.162 0.136 3.711
    异戊醇
    1-Butanol,3-methyl-
    0.004 0 酒精味 506.084 487.818 531.540 541.167 456.423
    正戊醇
    1-Pentanol
    0.150 2 杂醇油味 30.659 0.922 0.948
    正辛醇
    1-Octanol
    0.125 8 醇类气味 9.673 5.272 6.427 9.456 8.595
    3-甲硫基丙醇
    1-Propanol,3-(methylthio)-
    0.123 2 肉类芬芳香气、
    硫磺味
    1.377 1.187 4.253 2.509
    异丁醇
    1-Propanol,2-methyl-
    0.033 0 清新果香 8.448 9.877
    正壬醇
    1-Nonanol
    0.045 5 玫瑰柑橘气味 7.113 6.549
    酮类
    Ketones
    (3E,5E)-辛-3,5-二烯-
    2-酮
    3,5-Octadien-2-one
    0.100 0 脂肪味 48.769 6.202
    2,3-丁二酮
    2,3-Butanedione
    0.006 0 辛辣气味 1 006.549 74.567 127.485 1 488.719 452.510
    2,3-戊二酮
    2,3-Pentanedione
    0.029 0 配制巧克力和奶油型香精 74.658 3.561 5.525 16.320
    2-丁酮
    2-Butanone
    0.008 0 微香气味 307.794 210.721 76.080
    2-庚酮
    2-Heptanone
    0.140 0 果味、草本木香 27.512 0.788 1.124 2.117 1.700
    2-癸酮 2-Decanone 0.110 0 花香 14.070
    2-甲基-3-庚酮
    3-Heptanone,2-methyl-
    0.075 0 果香 47.080 9.187 9.221 26.023 32.734
    2-壬酮
    2-Nonanone
    0.041 0 泥土草本气味 163.149
    2-辛酮
    2-Octanone
    0.230 0 泥土味、天然木质草本气息 20.169
    3-庚酮
    3-Octanone
    0.080 0 菠萝、黄油气味 34.389 7.113
    3-戊烯-2-酮
    3-Penten-2-one
    1.200 0 微香气味 1.024
    苯乙酮
    Acetophenone
    0.065 0 刺激性甜味 19.293
    酯类
    Esters
    γ-丁内酯
    Butyrolactone
    1.000 0 芳香气味 3.003 0.690 0.473 1.813 0.888
    己酸乙酯
    Hexanoic acid,ethyl ester
    0.820 0 甜味、果味 7.653 1.559 1.311
    乙酸乙酯
    Ethyl Acetate
    0.005 0 令人愉悦的果味 2 300.273 2 023.387 2 384.141 2 448.394 2 778.730
    乙酸异戊酯
    1-Butanol,3-methyl-,acetate
    0.005 0 香蕉味 710.472 373.016 365.725 489.516 579.955
    乙酸仲丁酯
    sec-Butyl acetate
    0.006 0 令人愉悦的气味 61.140 12.243
    2-甲基丁酸乙酯
    Butanoic acid,2-methyl-,ethyl ester
    0.000 5 甜美的青苹果味 689.350 617.648
    丁酸乙酯
    Butanoic acid,ethyl ester
    0.000 9 苹果或菠萝香气 4 030.175 4 179.960
    庚酸乙酯
    Heptanoic acid,ethyl ester
    0.001 9 果味干、朗姆酒混
    合味
    269.857 302.514
    异丁酸乙酯
    Propanoic acid,2-methyl-,ethyl ester
    0.000 1 酒香 604.013 613.705
    棕榈酸甲酯
    Methyl palmitate
    2.000 0 油性蜡质鸢尾草味 0.239
    乙酸甲酯
    Acetic acid,methyl ester
    1.500 0 微辛辣、甘香 1.357
    醚类
    Ethers
    二甲基二硫醚
    Disulfide,dimethyl
    1.000 0 含硫蔬菜洋葱气味 1.384 0.453 0.499
    二甲基三硫醚
    Dimethyl trisulfide
    0.470 0 硫磺煮熟的洋葱咸味肉味 11.907 1.259 0.932 6.194 7.918
    醚类
    Ethers
    丙二醇甲醚
    2-Propanol,1-methoxy-
    4.000 0 甜醚样气味 0.168 0.311 0.180 0.389 1.548
    酸类
    Acids
    丙酸
    Propanoic acid
    1.000 0 辛辣、奶酪的味道 32.120 38.494 39.176 24.651 22.849
    丁酸
    Butanoic acid
    2.400 0 酸奶酪味道 4.651 6.235 7.461 15.211 9.919
    己酸
    Hexanoic acid
    0.890 0 汗臭味 3.355 2.417 1.275 1.570 2.028
    乙酸
    Acetic acid
    99.000 0 刺鼻、类似醋的
    气味
    1.729 1.170 0.572 0.357 0.386
    异戊酸
    Butanoic acid,3-methyl-
    0.490 0 酸臭味 95.054 19.621 15.859 70.669 73.039
    烃类
    Hydrocarbons
    苯乙烯
    Styrene
    0.065 0 苦杏仁、刺激性
    甜味
    40.418 15.341
    柠檬烯
    D-Limonene
    0.034 0 柠檬气味 143.536 16.603 8.226 69.402 70.662
    β-月桂烯
    beta.-Myrcene
    0.001 2 香脂味 2 849.551 528.711 431.018 1 574.250 1 711.846
    十二烷
    Dodecane
    10.000 0 烷烃的味道 1.081 0.031 0.033
    芳香族类
    Aromatics
    1,2,4,5-四甲苯
    Benzene,1,2,4,5-tetramethyl-
    0.087 0 馊甜味 4.171 1.253
    对二甲苯
    p-Xylene
    1.000 0 芳香味 1.065 0.203
    甲苯
    Toluene
    0.300 0 芳香味 13.501 3.849 2.292 6.718 6.580
    间二甲苯
    Benzene,1,3-dimethyl-
    1.000 0 芳香味 4.446 0.169 0.906 0.604
    邻二甲苯
    o-Xylene
    0.450 2 类苯的特异芳香
    气味
    3.523 0.124 0.635 0.508
    苯乙醇
    Phenylethyl Alcohol
    0.564 2 玫瑰花香 0.897 0.687 0.831 1.313 1.436
    2,4-二叔丁基苯酚
    2,4-Di-tert-butylphenol
    0.500 0 芳香气味 1.841 9.059 42.046 19.785 9.132
    苯酚
    Phenol
    0.021 0 微甜味 24.313 41.788 42.925 27.982 24.244
    愈创木酚
    Phenol,2-methoxy-
    0.001 6 酚醛类气味、木香
    气味
    67.719 57.944 72.128 56.565
    其他
    Others
    2,3,5-三甲基吡嗪
    Pyrazine,trimethyl-
    0.050 0 坚果味、巧克力味 42.824 17.573 23.700
    2,5-二甲基吡嗪
    Pyrazine,2,5-dimethyl-
    1.820 0 烤土豆味 2.958 0.076 1.614
    2,5-二乙基吡嗪
    Pyrazine,2,5-diethyl-
    0.020 0 坚果味 61.889 20.958
    2,6-二乙基吡嗪
    Pyrazine,2,6-diethyl-
    0.006 0 坚果、烤面包味 325.048 36.592 15.879
    2-甲基萘
    Naphthalene,2-methyl-
    0.004 0 花木香味 16.042
    2-乙基-5-甲基吡嗪
    Pyrazine,2-ethyl-5-methyl-
    0.036 0 咖啡味 160.883 17.015 24.645
    2-乙基吡啶
    Pyridine,2-ethyl-
    0.057 0 草味 17.463
    其他
    Others
    2-乙基吡嗪
    Pyrazine,ethyl-
    0.060 0 坚果、烤可可味、
    木香
    19.133
    2-正戊基呋喃
    Furan,2-pentyl-
    0.005 8 果味 1 036.050 120.472 92.950 335.741 394.924
    草蒿脑
    Estragole
    0.016 0 草本香气 9.375 8.775 19.178
    乙偶姻
    Acetoin
    8.000 0 黄油味 0.294 0.641 1.111 0.696
    三甲胺
    Trimethylamine
    0.008 0 鱼腥味 32 856.098 2 305.109 2 951.725 27 529.033 18 147.904
    注:觉察阈值取自《化合物嗅觉阈值汇编: 原书第二版》[23],气味特征描述来源于 https://mffi.sjtu.edu.cn/databasehttps://www.flavornet.org/flavornet.html。 Note: Perception thresholds are referenced from the Compendium of Olfactory Thresholds for Compounds, 2nd Edition[23]; the odor profiles are referenced from https://mffi.sjtu.edu.cn/database. and https://www.flavornet.org/flavornet.html.
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出版历程
  • 收稿日期:  2024-08-27
  • 修回日期:  2024-09-13
  • 录用日期:  2024-09-24
  • 网络出版日期:  2024-10-08
  • 刊出日期:  2025-02-04

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