Phytoplankton community composition and its environmental impact factors in Pearl River Estuary during wet season
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摘要:
珠江口海域生态环境问题日益突出。浮游植物是评价水质、生态功能等的重要参考指标,可为该海域生态环境保护与治理提供科学依据。为了更全面地了解丰水期珠江口海域浮游植物的分布特征及环境状况,根据2020年9月和2021年5月珠江口海域浮游植物调查数据,分析了该海域丰水期浮游植物的群落结构特征及其环境影响因子。共鉴定出浮游植物7门56属102种,其中硅藻种类最多 (69种),占67.65%,甲藻次之(17种),占16.67%。浮游植物丰度水平在2021年5月 (
1191.86 ×104个·m−3)高于2020年9月(103.64×104个·m−3),均以硅藻为主,其次为蓝藻或甲藻;多样性指数和均匀度指数在2021年5月(2.08和0.49)高于2020年9月 (1.65和0.41),两者均相对较低。非度量多维尺度分析 (Non-metric multidimensional scaling, NMDS) 结果显示,该海域浮游植物以S8采样点为界分为南、北2个群落;浮游植物优势种在2020年9月主要为咸淡水种颗粒直链藻 (Melosira granulata) 和广盐性沿岸种假微型海链藻 (Thalassiosira pseudonana),2021年5月主要为耐盐性沿岸种短角弯角藻 (Eucampis zodiacus)。冗余分析 (Redundancy analysis, RDA) 显示,影响珠江口海域浮游植物群落结构特征的环境因子主要为氮 (N)、磷 (P)、氮磷比 (N/P)、硅酸盐 (SiO3 2−)、pH和盐度。丰水期冲淡水强度对珠江口海域浮游植物种类组成、丰度分布和多样性等均有很大影响。Abstract:The ecological environment of the Pearl River Estuary has become increasingly prominent. Phytoplankton is an important reference index for evaluating water quality, ecological functions, etc., which can provide a scientific basis for the protection and management of the ecological environment of this sea area. To better understand the distribution characteristics and environmental conditions of phytoplankton in the Pearl River Estuary during wet season, we analyzed the phytoplankton community structure characteristics and its environmental impact factors in the Pearl River Estuary during wet season, based on the phytoplankton survey data collected in this sea area in September 2020 and May 2021. A total of 102 species of phytoplankton belonging to 56 genera and 7 phyla were identified, among which diatom species (69 species) accounted for 67.65%, and dinoflagellate species (17 species) accounted for 16.67%. The abundance level in May 2021 (
1191.86 ×104 cells·m−3) was higher than that in September 2020 (103.64×104 cells·m−3), and the abundance composition was mainly diatoms, followed by cyanobacteria or dinoflagellate. The diversity index and evenness index in May 2021 (2.08, 0.49) were higher than those in September 2020 (1.65, 0.41), both of which were relatively low. Non-metric multidimensional scaling (NMDS) analysis shows that the phytoplankton community in this sea area can be divided into two groups, north and south, with S8 as the boundary. The dominant species were Melosira granulata (Brackish water species) and Thalassiosira pseudonana (Euryhaline coastal seawater species) in September 2020, while Eucampis zodiacus (Salt-tolerant coastal species) in May 2021. Redundancy analysis (RDA) shows that nitrogen, phosphorus, nitrogen to phosphorus ratio, silicate, pH and salinity were the main environmental factors affecting phytoplankton community in the Pearl River Estuary. The intensity of dilute water in wet season has a great impact on the species composition, abundance distribution and diversity of phytoplankton in the Pearl River Estuary.-
Keywords:
- Phytoplankton /
- Community structure /
- Nutrients /
- Wet season /
- Pearl River Estuary
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鳜(Siniperca chuatsi)肉嫩味美,是我国传统的名贵商品鱼和出口创汇的重要养殖品种。但近年来,鳜疾病十分严重,其中细菌性病原主要有嗜水气单胞菌[1-2] (Aeromonas hydrophila)、柱状嗜纤维菌[3-4](Cytophaga columnaris)、温和气单胞菌[5](A.sobria)、鲁氏不动杆菌(Acinetobacter lwoffii)[6]等。嗜水气单胞菌主要引起鳜发生以肌肉、鳍基出血为特征的细菌性败血病,在某些条件下也诱发鳜发生溃疡病[2]。我们从患溃疡病的鳜肾脏中分离了1株嗜水气单胞菌菌株—GYK1株,回归感染出现出血和溃疡2种症状,具β-溶血性和较强的毒力,PCR检测含嗜水气单胞菌特异性的毒力基因—气溶素基因[2]。本实验电泳分析了GYK1菌株与从鳜和白鲢、银鲫等分离的其他嗜水气单胞菌菌株的胞外产物的组成,分析其是否有共同条带,并进行胞外产物的特性分析和主要蛋白带的初步纯化,旨在为鳜嗜水气单胞菌的致病机理和胞外产物亚单位疫苗的研制提供基础。
1. 材料与方法
1.1 菌种
嗜水气单胞菌GYK1株,为鳜溃疡病的病原菌,本实验室2001年3月自广东省惠州市池塘养殖的鳜肾脏中分离。对照菌株共8株,其中,嗜水气单胞菌89-7-14和温和气单胞菌N-1-2,上海水产大学惠赠,其他6株嗜水气单胞菌为本实验室自行分离、鉴定(表 1)。
表 1 实验菌株来源、种类及所分离的鱼品种Table 1 The origins, species and the providers of the test bacteria strains1.2 胞外产物制备
胞外产物的提取采用玻璃纸覆盖技术[8],GYK1等9株气单胞菌接种于营养琼脂培养基(广东环凯微生物科技有限公司出品),用0.01 M pH 7.4 PBS洗下, 制成菌悬液涂于覆盖有灭菌玻璃纸的营养琼脂平板,28℃培养24 h,每平板中加入PBS 5.0 mL将菌洗于无菌三角瓶中,磁力搅拌器搅拌30 min,4℃ 12 000 rpm离心20 min除去菌体,上清液经孔径0.22 μm的纤维素膜过滤。即制得胞外产物,-20℃备用。
1.3 GYK1株胞外产物底物酶活性分析
分别用蒸馏水配置成无菌的含明胶(0.4%)、酪蛋白(0.4%)、淀粉(0.2%)、吐温80(1.0%)及尿素(2.0%,加酚红指示剂)的1%的琼脂平板,血平板(含5%脱纤维羊血)购自广东环凯微生物公司。平板置于37℃温箱过夜,去除培养基表面的水分。打孔,加入GYK1株的胞外产物20 μL,28℃湿盒孵育48 h。向明胶平板中加入酸性氯化汞溶液;酪蛋白平板中加入10%三氯乙酸溶液;淀粉平板中加入卢哥氏碘液。观察平板,以出现透明圈(明胶、酪蛋白、淀粉平板)或不透明圈(吐温80平板)或出现红色(尿素平板)为阳性;血平板测其溶血活性。
1.4 GYK1株胞外产物的纯化
GYK1株的胞外产物采用ÄKTA Prime层析系统(Amersham Pharmacia Biotech公司出厂)进行纯化,应用Hiprep 16/60 Sephacryl S-200柱(Pharmacia产品),上样2.50 mL,用0.01 M PBS(pH 7.4)洗脱,每管收集4 mL,洗脱体积240 mL,流速0.5 mL·min-1。层析仪连接的电脑收集自动检测的紫外吸收、电导率等数据,用Excel作图绘制洗脱曲线。并根据紫外吸收峰合并组分,用聚乙二醇20 000在4℃浓缩,用PB透析后得纯品。
用Bradford方法[9]测定粗制备和纯化后胞外产物的蛋白浓度。
1.5 SDS-PAGE电泳分析
GYK1等9株气单胞菌粗胞外产物和GYK1株胞外产物的纯品加电泳缓冲液稀释,沸水浴5 min处理,采用Mini-Protean Ⅲ型(Bio-Rad公司出品)不连续SDS-PAGE系统,浓缩胶为5%, 分离胶为12%,室温下150 V电泳1.5 h,考马斯亮蓝法染色[9]。
1.6 对动物红细胞溶血价的测定
参考陈怀青等[10]的方法略作修改。取GYK1株粗胞外产物50 μL,用生理盐水在微量血凝板上倍比稀释,然后分别加入1%鳜、加州鲈、银鲫、小鼠、兔、绵羊、人O型血的红细胞50 μL,37℃孵育1 h,4℃过夜,观察溶血情况。以50%红细胞溶解的最高稀释度为溶血价。
同样方法测定纯化过程中及纯化后的GYK1株胞外产物对鳜和小鼠红细胞的溶血价。
1.7 粗胞外产物对鳜、剑尾鱼、小鼠的毒性
经过预试验,将GYK1株粗胞外产物调整到适当浓度,2倍比稀释腹腔注射健康鳜(体重7.6~9.8 g,购自广东江门市蓬江区荷塘镇荷塘鱼苗场)、剑尾鱼(体重3.0~3.8 g,来源于珠江水产研究所水生实验动物培育基地)、小鼠(体重18~22 g,购自广东省医学实验动物中心),鳜每尾注射0.1 mL,剑尾鱼0.05 mL,小鼠每只0.5 mL,对照组注射无菌PBS,连续观察7 d, 按照Reed-Muench法计算粗胞外产物的LD50。
2. 结果
2.1 GYK1等9株实验菌株胞外产物的电泳图谱
从GYK1等9株气单胞菌胞外产物的电泳图谱(图 1)可以看出,除温和气单胞菌N-1-2外,嗜水气单胞菌GYK1、G010926、G0408M、NN13、SX1、Gui7、89-7-14和B7有35 kDa的条带,但B7菌的条带染色较弱;嗜水气单胞菌GYK1、G0408M、NN13、SX1、Gui7和89-7-14还有45 kDa的条带;G010926、G0408M、NN13、SX1、Gui7、89-7-14和B7均有32 kDa的条带。表明不同的嗜水气单胞菌菌株胞外产物具有某些共同的蛋白带。而温和气单胞菌N-1-2胞外产物的电泳图谱与8株嗜水气单胞菌有较大差异,如N-1-2染色深的条带较多,具有特异的18 kDa的蛋白带。
2.2 GYK1株胞外产物的纯化
嗜水气单胞菌GYK1株的粗胞外产物2.5 mL,Hiprep 16/60 Sephacryl(聚丙烯酰胺葡聚糖)S-200柱层析的洗脱曲线见图 2。结果表明,层析后获得3个峰,峰的坐标值(dilution volume,A280)分别为(44.12, 0.00149)、(108.92, 0.00974)、(141.76, 0.00534)。
SDS-PAGE电泳结果表明,葡聚糖层析后第2峰为35 kDa的单一蛋白带(图 3)。
2.3 GYK1株胞外产物的蛋白酶活性及溶血性
酶活性分析表明,嗜水气单胞菌GYK1株粗胞外产物具有酪蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、明胶酶活性,但不具备脲酶活性(表 2)。
表 2 嗜水气单胞菌GYK1菌株粗胞外产物的酶活性及溶血性Table 2 The enzyme activity of crude extracellular products of A.hydrophila GYK1淀粉酶
amylase明胶酶
gelatinase脂肪酶
lipase酪蛋白酶
caseinase脲酶
urease溶血性
hemolytic activity酶活性
enzyme activity++ + + + - +++ 注:“+” →“++”:活性由弱→强;“-”:无酶活性
Note: “+” →“++”denotes activity from weak to strong; “-”no enzyme activity.溶血性测定表明,嗜水气单胞菌GYK1株粗胞外产物在绵羊血平板上表现较强的溶血性(表 2),对各种动物细胞的溶血价在211~214之间(表 3)。但纯化后对鳜和小鼠红细胞的溶血价下降,粗胞外产物分别为213及212,35 kDa的纯化产物均为25。
表 3 粗胞外产物对鳜、加州鲈、银鲫、绵羊、小鼠、人O-型血红细胞的溶血价Table 3 The hemolytic titer of crude ECP of GYK1 to erythrocyte of mandarinfish, large-mouth bass, crucian carp, sheep, mouse, rabbit and human O-serotype红细胞
erythrocyte鳜
mandarinfish加州鲈
large-mouth bass银鲫
crucian carp兔
rabbit绵羊
sheep小鼠
mouse人O-型
human O-serotype溶血价
hemolytic titer213 212 214 212 211 212 211 2.4 GYK1株粗胞外产物对鳜、剑尾鱼、小鼠的毒性
GYK1株粗胞外产物腹腔注射动物,在5 h内就引起动物急性死亡。鳜、剑尾鱼出现出血性症状;小鼠呼吸减慢,运动减少,解剖死亡的小鼠,肠道积水肿胀。胞外产物各浓度组腹腔注射动物的死亡率见表 4。
表 4 粗胞外产物对鳜、剑尾鱼、小鼠的急性毒性Table 4 Virulent tests of the crude ECP on mandarinfish, swordtail fish, and mouse动物
tested animal鳜
mandarinfish剑尾鱼
swordtail fish小鼠
mouse注射浓度/μg·mL-1
injection concentration of crude ECP365 182.5 73 0 365 182.5 73 0 365 182.5 73 0 死亡尾数/试验尾数
number of death fish/number of experiment fish6/6 6/6 3/6 1/6 6/6 5/6 1/6 0/6 4/4 3/4 0/4 0/4 LD50/μg·mL-1 约98.8 约112.2 约140
LD50/μg·g-1体重1.19 1.65 3.5 结果表明,GYK1株粗胞外产物对鳜、剑尾鱼和小鼠有致死毒性。按Reed-Muench法计算,嗜水气单胞菌GYK1株胞外产物对鳜的LD50约为1.19 μg·g-1体重,对剑尾鱼的LD50约为1.65 μg·g-1体重,对小鼠的LD50约为3.5 μg·g-1体重。
3. 讨论
嗜水气单胞菌胞外产物的外毒素、蛋白酶等多种毒力因子,对动物有致病或致死毒性[11-13]。本研究从嗜水气单胞菌GYK1株提取的胞外产物, 具有溶解多种鱼和哺乳动物红细胞活性;粗胞外产物致死实验动物,使被试鳜、剑尾鱼和小鼠急性死亡。活性分析显示粗胞外产物具有淀粉酶、酪蛋白酶、明胶酶、脂肪酶活性及溶解鳜等动物的血细胞活性。由于淀粉酶具有分解糖原的作用,明胶酶、酪蛋白酶能分解胶原等蛋白成分,脂肪酶分解了脂类,所以当这些酶作用于鳜的体表,溶解了鳜的肌肉组织、结缔组织等而为该细菌提供了营养物质,随着时间的延长,细菌的增殖,胞外产物中的酶量增多,对鳜皮肤、肌肉的破坏程度也不断增加,引起鳜出血和溃疡。
嗜水气单胞菌的血清型众多,多数研究表明全菌疫苗仅对同血清型的细菌产生免疫保护,而对异型菌株无保护作用[14-17],因而提取共同的成分制备亚单位疫苗成为研究的热点。SHEN等[18]对6株嗜水气单胞菌的胞外产物分析,结果在不同培养条件下均具35 kDa的蛋白带,且此条带均能被鱼血清所识别;董传甫等[19]提取了24株嗜水气单胞菌的胞外产物,发现22株都存在分子量为35 kDa的蛋白带;CHOPRA等[20]将1株人源嗜水气单胞菌SSU的细胞紧张性肠毒素的编码基因克隆到科斯质粒载体pHC79中,SDS-PAGE分析该表达质粒在大肠杆菌的产物,其蛋白分子量为35 kDa,具有外毒素的生物活性。本研究亦显示,GYK1菌与其他7株嗜水气单胞菌胞外产物均具有35 kDa的共同蛋白带,且GYK1菌胞外产物经纯化后分离到分子量为35 kDa的蛋白带,此蛋白带具有溶解鳜和鼠血细胞的活性,但溶血价比粗胞外产物有所降低,此蛋白带的特性仍有待深入研究,纯化的最佳条件和优化步骤尚待探讨。
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图 5 珠江口海域2020年9月 (a) 和2021年5月 (b) 浮游植物与环境因子关系
注:D. 水深; S. 盐度; T. 水温;Tr. 透明度;Sp1. 假微型海链藻;Sp2. 颗粒直链藻;Sp3. 日本星杆藻;Sp4. 分叉辐杆藻;Sp5. 窄隙角毛藻;Sp6. 旋链角毛藻;Sp7. 柔弱角毛藻;Sp8. 垂缘角毛藻;Sp9. 洛氏角毛藻;Sp10. 爱氏角毛藻;Sp11. 细弱角毛藻;Sp12. 角毛藻;Sp13. 琼氏 圆筛藻;Sp14. 辐射圆筛藻;Sp15. 圆筛藻;Sp16. 布氏双尾藻;Sp17. 矮小短棘藻;Sp18. 太阳双尾藻;Sp19. 柔弱拟菱形藻;Sp20. 哈德半盘藻;Sp21. 中肋骨条藻;Sp22. 佛氏海毛藻;Sp23. 菱形海线藻;Sp24. 短角弯角藻;Sp25. 萎软几内亚藻;Sp26. 粗根管藻;Sp27. 掌状冠盖藻;Sp28. 叉角藻;Sp29. 梭角藻;Sp30. 三叉角藻;Sp31. 三角角藻;Sp32. 扁平原多甲藻。
Figure 5. Relationship between phytoplankton and environmental factors in Pearl River Estuary in September 2020 (a) and May 2021 (b)
Note: D. Water depth; S. Salinity; T. Water temperature; Tr. Transparency; Sp1. T. pseudonana; Sp2. M. granulata; Sp3. A. japonica; Sp4. Bacteriastrum furcatum; Sp5. Chaetoceros affinis; Sp6. C. curvisetus; Sp7. C. debilis; Sp8. C. laciniosus; Sp9. C. lorenzianus; Sp10. C. eibenii; Sp11. C. subtilis; Sp12. C. spp.; Sp13. Coscinodiscus jonesianus; Sp14. C. radiatus; Sp15. C. spp.; Sp16. Ditylum brightwellii; Sp17. Detonula pumila; Sp18. D. sol; Sp19. Pseudo-nitzschia delicatissma; Sp20. Hemidiscus hardmnnianus; Sp21. Skeletonema costatum; Sp22. Thalassiothrix frauenfeldii; Sp23. T. nitzschiodes; Sp24. Eucampis zodiacus;Sp25. Guinardia flaccida; Sp26. Rhizosolenia robusta; Sp27. Stephanopyxis palmeriana;Sp28. Ceratium furca; Sp29. C. fusus; Sp30. C. trichoceros; Sp31. C. tripos; Sp32. Protoperodinium depressum.
表 1 珠江口海域浮游植物优势种组成
Table 1 Dominant species of phytoplankton in Pearl River Estuary
优势种
Dominant species2020年9月 Sep. 2020 2021年5月 May 2021 优势度
Y出现频率
Occurrence frequency/%优势度
Y出现频率
Occurrence frequency/%假微型海链藻 Thalassiosira pseudonana 0.22 53.85 颗粒直链藻 Melosira granulata 0.16 61.54 柔弱拟菱形藻 Pseudo-nitzschia delicatissma 0.09 69.23 中肋骨条藻 Skeletonema costatum 0.03 92.31 日本星杆藻 Asterionella japonica 0.02 30.77 洛氏角毛藻 Chaetoceros lorenzianus 0.02 61.54 短角弯角藻 Eucampis zodiacus 0.45 61.54 掌状冠盖藻 Stephanopyxis palmeriana 0.02 61.54 琼氏圆筛藻 Coscinodiscus jonesianus 0.02 61.54 姓名 工作单位 姓名 工作单位 蔡 露 水利部中国科学院水工程生态研究所 施 雯 东北农业大学 蔡旺炜 河海大学 宋 超 山东大学 陈 治 海南热带海洋学院 宋 飞 华南师范大学 陈亮明 中国科学院深圳先进技术研究院 孙蕾蕾 烟台大学 程 晖 AKVA Group AS (挪威) 汪 蕾 华南师范大学 崔铭超 中国水产科学研究院渔业机械仪器研究所 王 腾 中国水产科学研究院南海水产研究所 段亚飞 中国水产科学研究院南海水产研究所 王润东 岭南师范学院 方 舟 上海海洋大学 王绍敏 中国水产科学研究院南海水产研究所 冯德军 浙江海洋大学 王思凯 中国水产科学研究院东海水产研究所 郭浩宇 浙江海洋大学 王学耕 华南师范大学 李 潮 华南师范大学 温 彬 上海海洋大学 李 根 中国水产科学研究院南海水产研究所 吴忠鑫 大连海洋大学 李 骏 仲恺农业工程学院 吴祖立 中国水产科学研究院东海水产研究所 李 雷 中国水产科学研究院黑龙江水产研究所 徐永江 中国水产科学研究院黄海水产研究所 李 为 中国科学院水生生物研究所 杨炳忠 中国水产科学研究院南海水产研究所 李春生 中国水产科学研究院南海水产研究所 杨移斌 中国水产科学研究院长江水产研究所 李飞鹏 上海理工大学 杨子拓 新加坡淡马锡生命科学研究所 李松林 上海海洋大学 尹纪元 中国水产科学研究院珠江水产研究所 梁 刚 北京市农林科学院 余 为 上海海洋大学 刘 永 中国水产科学研究院南海水产研究所 俞也频 广东省科学院动物研究所 刘春胜 海南大学 张 俊 上海海洋大学 刘世晶 中国水产科学研究院渔业机械仪器研究所 张 魁 中国水产科学研究院南海水产研究所 马华威 广西壮族自治区水产科学研究院 赵 建 浙江大学 庞国良 中国水产科学研究院南海水产研究所 钟立强 江苏省淡水水产研究所 邵 俭 贵州大学 朱克诚 中国水产科学研究院南海水产研究所 -
[1] FALKOWSKI P G, BARBER R T, SMETACEK V. Biogeochemical controls and feedbacks on ocean primary production[J]. Science, 1998, 281(5374): 200-206. doi: 10.1126/science.281.5374.200
[2] FIELD C B, BEHRENFELD M J, RANDERSON J T, et al. Primary production of the biosphere: integrating terrestrial and oceanic components[J]. Science, 1998, 281(5374): 237-240. doi: 10.1126/science.281.5374.237
[3] ROUND F E. The ecology of algae[M]. London: Cambridge University Press, 1981: 1-6.
[4] FINDLAY D L, KASIAN S E M, TURNER M T, et al. Responses of phytoplankton and epilithon during acidification and early recovery of a lake[J]. Freshwater Biol, 1999, 42: 159-175. doi: 10.1046/j.1365-2427.1999.00458.x
[5] 林卫强, 李适宇. 珠江口水域化学耗氧量、溶解氧、无机磷与有机磷的三维水质数学模拟[J]. 海洋学报, 2003, 25(3): 129-137. doi: 10.3321/j.issn:0253-4193.2003.03.015 [6] 张景平, 黄小平, 江志坚, 等. 2006—2007年珠江口富营养化水平的季节性变化及其与环境因子的关系[J]. 海洋学报, 2009, 31(3): 113-120. [7] 张伟, 孙健, 聂红涛, 等. 珠江口及毗邻海域营养盐对浮游植物生长的影响[J]. 生态学报, 2015, 35(12): 4034-4044. [8] 施玉珍, 赵辉, 王喜达, 等. 珠江口海域营养盐和叶绿素 a的时空分布特征[J]. 广东海洋大学学报, 2019, 39(1): 56-65. [9] 王菊英, 郑楠, 马德毅. 近海生态系统的人为营养盐输入及其控制对策浅析[J]. 海洋学报, 2020, 42(6): 1-8. [10] 何瑞, 李青峰, 彭松耀. 珠江八大口门冬季浮游植物优势种生态位及其种间联结性[J]. 人民珠江, 2024, 45(5): 46-54. doi: 10.3969/j.issn.1001-9235.2024.05.006 [11] 苏芯莹, 钟瑜, 李尧, 等. 珠江口典型海岛周边水域浮游植物分布特征及其影响因素[J]. 热带海洋学报, 2020, 39(5): 30-42. [12] 戴明, 刘华雪, 吴风霞, 等. 万山群岛海域网采浮游植物与环境因子的关系[J]. 海洋环境科学, 2019, 38(4): 540-554. doi: 10.12111/j.mes20190409 [13] 周卫文, 李芊, 葛在名, 等. 珠江口羽流锋浮游植物群落对大气沉降的生态响应[J]. 热带海洋学报, 2020, 39(4): 50-60. [14] 黄宗国, 林茂. 中国海洋生物图谱集第1册[M]. 北京: 海洋出版社, 2012: 1-283. [15] 杨世民, 董树刚. 中国海域常见浮游硅藻图谱[M]. 青岛: 中国海洋大学出版社, 2006: 1-267. [16] 金德祥, 陈金环, 黄凯歌. 中国海洋浮游硅藻类[M]. 上海: 上海科学技术出版社, 1965: 1-230. [17] 胡鸿钧, 魏印心. 中国淡水藻类[M]. 北京: 科学出版社, 2006: 1-1023. [18] 金德祥, 程兆第, 林均民, 等. 中国海洋底栖硅藻类(上卷)[M]. 北京: 海洋出版社, 1982: 1-323. [19] 金德祥, 程兆第, 刘师成, 等. 中国海洋底栖硅藻类(下卷)[M]. 北京: 海洋出版社, 1992: 1-437. [20] 傅明珠, 孙萍, 孙霞, 等. 锦州湾浮游植物群落结构特征及其对环境变化的响应[J]. 生态学报, 2014, 34(13): 3650-3660. [21] SHANNON C E, WEAVER W. The mathematical theory of communication[M]. Urbana: University of Illinois Press, 1963: 117-125.
[22] PIELOU E C. Species diversity and pattern diversity in the study of ecological succession[J]. J Theor Biol, 1966, 10(2): 370-383. doi: 10.1016/0022-5193(66)90133-0
[23] 粟丽, 黄梓荣, 罗艳. 大亚湾夏、冬浮游植物群落结构与环境因子[J]. 海洋科学进展, 2019, 37(2): 284-293. [24] 苏家齐, 朱长波, 张博, 等. 海陵湾网箱养殖区浮游植物群落结构及其与环境因子的关系[J]. 上海海洋大学学报, 2022, 31(4): 929-939. doi: 10.12024/jsou.20210103267 [25] WANG C, LI X H, LAI Z N, et al. Seasonal variations of Aulacoseira granulata population abundance in the Pearl River Estuary[J]. Estuar Coast Shelf S, 2009, 85(4): 585-592. doi: 10.1016/j.ecss.2009.09.031
[26] JIA H L, CHEN M R, SU W, et al. Structural characteristics and associated factors influencing phytoplankton abundance and species composition in Huangmaohai Bay, Pearl River Estuary[J]. J Coastal Res, 2018, 35(1): 72-81.
[27] ZHANG X, ZHANG J P, HUANG X P, et al. Phytoplankton assemblage structure shaped by key environmental variables in the Pearl River Estuary, South China[J]. J Ocean Univ China, 2014, 13(1): 73-82. doi: 10.1007/s11802-014-1972-3
[28] ZHONG Q, XUE B, NOMAN M A, et al. Effect of river plume on phytoplankton community structure in Zhujiang River estuary[J]. J Oceanol Limn, 2020, 39: 550-565.
[29] JIANG Z Y, WANG Y S, CHENG H, et al. Variation of phytoplankton community structure from the Pearl River estuary to South China Sea[J]. Ecotoxicology, 2015, 24: 1442-1451. doi: 10.1007/s10646-015-1494-9
[30] 高亚辉, 虞秋波, 齐雨藻, 等. 长江口附近海域春季浮游硅藻的种类组成和生态分布[J]. 应用生态学报, 2003, 14(7): 1044-1048. doi: 10.3321/j.issn:1001-9332.2003.07.003 [31] 戴明, 李纯厚, 贾小平, 等. 珠江口近海浮游植物生态特征研究[J]. 应用生态学报, 2004, 15(8): 1389-1394. [32] 庞勇, 聂瑞, 吕颂辉. 珠江口双胞旋沟藻Cochlodinium geminatum赤潮生消过程的环境特征初步分析[J]. 生态环境学报, 2015, 24(2): 286-293. [33] 赵春宇, 谭烨辉, 柯志新, 等. 珠江口赤潮爆发过程中水体及表层沉积物间隙水中营养盐与叶绿素的变化特征[J]. 海洋通报, 2016, 35(4): 457-466. doi: 10.11840/j.issn.1001-6392.2016.04.014 [34] 王超, 李新辉, 赖子尼, 等. 珠江口球形棕囊藻 (Phaeocystis globosa) 赤潮后期的浮游植物群落结构特征研究[J]. 生态科学, 2010, 29(2): 140-146. doi: 10.3969/j.issn.1008-8873.2010.02.009 [35] SHEN P P, LI G, HUANG L M, et al. Spatio-temporal variability of phytoplankton assemblages in the Pearl River estuary, with special reference to the influence of turbidity and temperature[J]. Cont Shelf Res, 2011, 31(16): 1672-1681. doi: 10.1016/j.csr.2011.07.002
[36] 李涛, 刘胜, 黄良民, 等. 大亚湾红海束毛藻赤潮生消过程研究[J]. 海洋环境科学, 2008, 27(3): 224-227. doi: 10.3969/j.issn.1007-6336.2008.03.007 [37] 林金美. 南海中部浮游甲藻类的生态研究[J]. 海洋通报, 1988, 7(3): 47-53. [38] 林金美. 厦门附近海域浮游甲藻类的分布[J]. 生态学报, 1990, 10(2): 139-144. doi: 10.3321/j.issn:1000-0933.1990.02.013 [39] 宋伦, 周遵春, 王年斌, 等. 辽东湾浮游植物多样性及与海洋环境因子的关系[J]. 海洋环境科学, 2007, 26(4): 365-368. doi: 10.3969/j.issn.1007-6336.2007.04.016 [40] 金敬林, 蔡丽萍, 余健涛. 2016−2017年夏季舟山近岸海域富营养化程度与浮游植物多样性[J]. 海洋开发与管理, 2020(1): 51-55. doi: 10.3969/j.issn.1005-9857.2020.01.010 [41] 冷宇, 赵升, 刘霜, 等. 黄河口海域夏季浮游植物的分布特征[J]. 水生态学杂志, 2013, 34(6): 41-46. doi: 10.3969/j.issn.1674-3075.2013.06.007 [42] 罗先香, 单宇, 杨建强. 黄河口及邻近海域浮游植物群落分布特征及与水环境的关系[J]. 中国海洋大学学报, 2018, 48(4): 16-23. [43] 王玉芳, 任金刚, 王永献, 等. 海河口浮游植物生态学特征[J]. 水文, 2016, 36(4): 70-75, 84. doi: 10.3969/j.issn.1000-0852.2016.04.013 [44] 刘凯然. 珠江口浮游植物生物多样性变化趋势[D]. 大连: 大连海事大学, 2008: 4. [45] 林旭吟. 香港海域浮游植物种类多样性与群落动态研究[D]. 厦门: 厦门大学, 2007: 11. [46] 贾海波, 唐静亮, 胡颢琰. 1992—2012杭州湾海域生物多样性的变化趋势及原因分析[J]. 海洋学报, 2014, 36(12): 111-118. doi: 10.3969/j.issn.0253-4193.2014.12.011 [47] THOMAS M K, KREMER C T, KLAUSMEIER C A, et al. A global pattern of thermal adaptation in marine phytoplankton[J]. Science, 2012, 338(6110): 1085-1088. doi: 10.1126/science.1224836
[48] 李永振. 广东沿海主要的浮游植物优势种[C]//余勉余, 马应良, 林幸青, 等. 广东海岛调查研究文集(II). 广州: 广东科技出版社, 1994: 72-82. [49] 林永水, 袁文彬. 珠江口浮游植物种类组成及群落结构[C]//唐永銮, 钟功甫, 赵焕庭, 等. 珠江口海岸带和海涂资源综合调查研究文集. 广州: 广东科技出版社, 1985: 1-5. [50] 董焕嫦, 黄春秀, 李扬. 中国沿海新报道的三种产毒拟菱形藻[J]. 水生生物学报, 2018, 42(5): 1057-1065. doi: 10.7541/2018.130