3种常见消毒药物对纤毛虫种群动力学的影响

张欣悦, 孙思涵, 崔雯婷, 刘家乐, 齐红莉

张欣悦, 孙思涵, 崔雯婷, 刘家乐, 齐红莉. 3种常见消毒药物对纤毛虫种群动力学的影响[J]. 南方水产科学, 2024, 20(6): 43-52. DOI: 10.12131/20240103
引用本文: 张欣悦, 孙思涵, 崔雯婷, 刘家乐, 齐红莉. 3种常见消毒药物对纤毛虫种群动力学的影响[J]. 南方水产科学, 2024, 20(6): 43-52. DOI: 10.12131/20240103
ZHANG Xinyue, SUN Sihan, CUI Wenting, LIU Jiale, QI Hongli. Effects of disinfectants on population growth of Fabrea salina[J]. South China Fisheries Science, 2024, 20(6): 43-52. DOI: 10.12131/20240103
Citation: ZHANG Xinyue, SUN Sihan, CUI Wenting, LIU Jiale, QI Hongli. Effects of disinfectants on population growth of Fabrea salina[J]. South China Fisheries Science, 2024, 20(6): 43-52. DOI: 10.12131/20240103

3种常见消毒药物对纤毛虫种群动力学的影响

基金项目: 山东省重大科技创新工程专项“海洋药源生物基础研究”(2018SDKJ0406-4);天津市高等学校大学生创新创业训练计划 (202310061058)
详细信息
    作者简介:

    张欣悦 (2000—),女,硕士研究生,研究方向为原生动物学。E-mail: 18522708246@163.com

    通讯作者:

    齐红莉 (1978—),女,副教授,硕士,研究方向为水生态毒理学及原生动物学。E-mail: qihl2000@163.com

  • 中图分类号: S 917.4

Effects of disinfectants on population growth of Fabrea salina

  • 摘要:

    盐蚕豆虫 (Fabrea salina) 可作为海水经济动物的开口饵料。为探究高锰酸钾、聚维酮碘、二溴海因3种消毒剂对盐蚕豆虫产生的毒性效应和种群动力学影响,采用静水实验法测定盐蚕豆虫在不同浓度的3种消毒剂下,种群的生长率 (r) 和世代时间 (G) 变化。结果表明,高锰酸钾、二溴海因、聚维酮碘对盐蚕豆虫的24 h 半数致死浓度 (Lethal concentration 50, LC50) 分别为1.182、1.067、18.451 mg∙L−1,48 h LC50分别为0.925、0.748、19.620 mg∙L−1;安全浓度 (Safe concentration, SC) 分别为0.170、0.110、6.655 mg∙L−1。盐蚕豆虫对3种消毒剂的敏感性依次为二溴海因>高锰酸钾>聚维酮碘。二溴海因、聚维酮碘、高锰酸钾的质量浓度分别为0.074 8、1.962 0、0.092 5 mg∙L−1时,对盐蚕豆虫的种群生长抑制最显著 (p<0.01),r分别为 (0.57±0.009)、(0.57±0.005)、(0.47±0.007) d−1G分别为 (1.23±0.2)、(1.22±0.011)、(1.30±0.078) d。研究获得的高锰酸钾、聚维酮碘、二溴海因的安全浓度均低于水产养殖中的施药量,因此当以盐蚕豆虫作为开口饵料时,应注意消毒剂的使用剂量。

    Abstract:

    Fabrea salina can be used as a first feed for marine economic animals. In order to investigate the toxic effects and population dynamics of three disinfectants (Potassium permanganate, povidoneiodine and dibromohydantoin) on F. salina, we conducted a static water test to study the growth rate (r) and generation time (G) changes of F. salina by different concentrations of these three disinfectants. The results show that the 24 h LC50 values of potassium permanganate, dibromo hydantoin and povidone iodine were 1.182, 1.067 and 18.451 mg∙L−1, respectively; the 48 h LC50 values were 0.925, 0.748 and 19.620 mg∙L−1, respectively; the safe concentrations (SC) were 0.170, 0.110 and 6.655 mg∙L−1, respectively. The sensitivity of F. salina to these disinfectants followed a descending order of dibromohydantoin > potassium permanganate > povidone iodine. Besides, the most significant inhibition for F. salina growth was observed at 0.074 8 mg∙L−1 of dibromo hydantoin, 1.962 mg∙L−1 of povidone iodine and 0.092 5 mg∙L−1 of potassium permanganate (p<0.01), with corresponding growth rates (r) of (0.57±0.009), (0.57±0.005) and (0.47±0.007) d−1, and generation times (G) of (1.23±0.2), (1.22±0.011) and (1.30±0.078) d, respectively. The safe concentrations of potassium permanganate, povidone iodine and dibromo hydantoin obtained in this test were all lower than the dosages employed in aquaculture. Thus, attention should be paied to the dosage of these disinfectants when using F. salina as a first feed.

  • 神经肽是从神经系统和内分泌系统产生和释放,参与调节生物个体的生理活动,维持生物体内环境稳态的一类重要信号因子,是NEI系统中最重要的调节因子之一,在脊椎和无脊椎动物中均有免疫调节功能。其中FMRFamide (Phe-Met-Arg-Pheamide) 是一种酰胺化四肽,是类 FMRF酰胺肽 (FMRFarmide-related peptides, Farps或FMRFamide-like peptide, FLPs) 家族的成员。其在神经系统中合成并释放,能通过神经元直接传递信号,并作为神经递质、神经调质和神经激素发挥作用[1],是无脊椎动物中含量最丰富的一类神经肽[2]。此外,该神经肽也能通过内分泌系统调节摄食和运动行为[3]。近年来,FMRFamide的生理功能受到普遍关注,如Marciniak等[4]研究发现其具有特异性的心脏活性,能有效调节甲虫内脏肌肉的内源性收缩活性。Kim等[5]研究皱纹盘鲍 (Haliotis discus hannai) 发现,FMRFamide神经肽对海洋腹足类动物生殖调节有重要促进作用。FMRFamide也被发现能够通过抑制有丝分裂来保护细胞免受凋亡[6]。而作为无脊椎动物中特有的神经肽,一些研究也表明其可能参与了海洋无脊椎动物的免疫应答。如Li等[7]通过对太平洋牡蛎 (Crassostrea gigas) 炎症刺激后的FMRFanide多肽治疗,发现FMRFamide多肽不仅由神经内分泌系统合成,而且还在血细胞中合成加工,首次证实了该多肽存在于血细胞中。Guan等[8]对加利福尼亚海兔 (Aplysia california) 的研究发现FMRFamide可以通过激活P38丝裂原激活蛋白 (MAP) 激酶来调节突触的可塑性和调节免疫效应物。

    瘤背石磺 (Onchidium reevesii) 隶属于软体动物门、石磺科,又名土鸡、海赖子、涂龟、土海参等[9-10],常栖息在滩涂上的石缝中、植被的根部和阴暗潮湿的角落,主要分布于我国东部沿海地区[11-12]。瘤背石磺的中枢神经系统 (Central nervous system, CNS) 是一个简单的环状结构,体积大且易获得[13]。瘤背石磺不仅是研究无脊椎动物神经系统功能的模式种,而且由于其生活在潮间带,有良好的应激耐受机制,能适应波动的生存环境、各种重金属离子和病原体[14],对于研究无脊椎动物应对外界环境变化和病原入侵的免疫反应机制也有显著优势。为此,本研究在实验室瘤背石磺高通量转录组测序的基础上克隆得到了OrFMRFamide基因的全长,分析该基因的分子特征及其mRNA和多肽在组织中的分布,研究其在炎症刺激后的反应,从而为探究FMRFamide基因在瘤背石磺免疫机制中的作用提供了理论依据,也为进一步理解生活在潮间带的两栖类动物对恶劣环境的适应机理奠定基础。

    2020年6月初在江苏省盐城市沿海滩涂采集成体鲜活瘤背石磺,带回实验室后暂养于70 cm×120 cm×50 cm的塑料养殖箱内,养殖箱底部覆盖5~10 cm厚的海泥,种植滩涂采集的植被,放上瓦片,放养滩涂捕捉的螃蟹在泥中打洞,为石磺提供休息躲避的巢穴,尽可能地模拟自然生态环境,消除实验外干扰。每天早晚定时投喂玉米粉和喷洒海水保持土壤湿润,定期检查瘤背石磺生长状况,以确保其较高的成活率。暂养1周后,取5只体态均匀、健康有活力的瘤背石磺 [ 体长 (43.55±1.32) mm,体质量 (15.73±0.78) g],用超纯水清洗表面的泥沙,取血细胞、神经节、肝胰腺、肌肉、性腺、皮肤和腹足等组织用液氮速冻后放入–80 ℃冰箱备用,用于组织cDNA模板的制备。

    实验所用器皿均经180 ℃高温杀菌处理3 h或使用DEPC处理过后进行高压灭菌。实验开始前将所有器材预冷备用,全程在冰上操作,取–80 ℃保存的瘤背石磺各组织,按照Trizol (Invitrogen, 美国) 说明书提取各组织的总RNA。配制质量浓度为10 mg·mL−1的琼脂糖凝胶,135 V、电泳15 min检测RNA提取质量,在核酸检测仪上标定提取RNA的浓度和纯度。将神经节RNA按照PrimeScript II 1st Strand cDNA Synthesis Kit (TaKaRa) 说明书合成cDNA第一链,作为后续实验的RACE (Rapid-amplification of cDNA ends) 模板。将提取所得的各组织RNA按照PrimeScript™ RT reagent Kit with gDNA Eraser (TaKaRa) 试剂盒说明书进行反转录,将获得的cDNA于–20 ℃保存备用。

    根据笔者实验室测得的转录组数据库 (未发表) 筛选得到目的基因的部分基因片段,使用Primer Premier 5.0软件设计2对引物,进行PCR扩增反应,反应产物用10 mg·mL−1的琼脂糖凝胶电泳检测,使用D2000 Ladder作为Maker,产物条带单一且清晰,送至苏州金唯智生物科技有限公司测序,测序结果在NCBI上BLAST比对,确认为FMRFamide基因片段,然后按照SMARTER® RACE5'/3'Kit及3'Full RACE Core Set With PrimerScriptTM RTase试剂盒的说明书在Primer Premier 5.0软件上设计5'和3' RACE特异性引物,通过RACE技术得到产物,产物经过1.0%琼脂糖凝胶电泳检测合格后送往苏州金唯智生物科技有限公司测序,将所得到的全部测序结果通过Sequebcher 5.0软件拼接得到OrFMRFamide基因的序列全长。

    把拼接得到的基因序列全长在NCBI上用ORF Finder (https://www.ncbi.nlm.nih.gov/orffinder/) 在线工具对OrFMRFamide基因开放阅读框 (Open reading frame, ORF) 及编码氨基酸进行预测,得到预测的编码氨基酸后在NCBI上用在线工具BLAST (https://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi) 进行同源性比较,使用NetNGlyc 1.0 Server (http://www.cbs.dtu.dk/services/NetNGlyc/) 在线工具确定糖基化位点,理化性质用ProtParam (http://web.expasy.org/protparam/) 在线工具分析,使用NetPhos 2.0 Server (http://www.cbs.dtu.dk/services/NetPhos–2.0/) 在线工具查找磷酸化位点,使用Signal 5.0 (http://www.cbs.dtu.dk/services/SignalP/) 在线工具查找信号肽。用MEGA-X软件基于比邻法,以1 000次Bootstraps构建瘤背石磺与其他物种FMRFamide基因的系统进化树。

    通过在线工具Genscrip (https://www.genscript.com/tools/real–time–pcr–taqman–primer–design–tool) 根据OrFMRFamide基因全长序列设计荧光定量引物 (表1),以18S作为内参基因,以上述验证过的瘤背石磺各组织cDNA为模板,使用 ChamQ Universal SYBR qPCR Master Mix (Vazyme,美国) 试剂盒在CFX-96 (Bio-Rad,美国) 进行荧光定量反应,每个样品和内参都设置3个平行对照,以Rnase-free双蒸水 (ddH2O) 为阴性对照,实时荧光定量PCR数据用2–ΔΔCT法进行分析。

    表  1  实验中所用引物序列
    Table  1.  Primers used in this experiment
    引物
    Primer
    引物序列 (5'–3')
    Primer sequence
    用途
    Function
    OrFMRFamide-F1 CTTAGGAGTGGGAACAGC 验证目的片段
    OrFMRFamide-R1 CGGCTGGAGATTTGATTG
    OrFMRFamide-F2 CGGACCAGTACGACCAAC
    OrFMRFamide-R2 GTTCAGTCCGCCCTAATG
    OrFMRFamide-3'RACE-inter ACTGGTTTGGGTAGCA 3'RACE 特异性引物
    OrFMRFamide-3'RACE-outer ATGGCAACAATGTCTTTCG
    OrFMRFamide-5'RACE-inter GAGCAGAAGATGGCGT 5'RACE 特异性引物
    OrFMRFamide-5'RACE-outer TCCTCGCTTTGCCTCA
    OrFMRFamide-RT-F AGCTGGAGGACACACTGAGGCA Real-time RT-PCR
    OrFMRFamide-RT-R TGCCACATCGCCCTCATCGG
    18S-F TCCGCAGGAGTTGCTTCGAT
    18S-R ATTAAGCCGCAGGCTCCACT
    下载: 导出CSV 
    | 显示表格

    免疫组织化学取养殖箱暂养未经处理的5只瘤背石磺进行实验。采集未经处理的新鲜的神经节、肝胰腺、性腺、腹足、肌肉和皮肤,用4%的多聚甲醛固定6 h,转移至20%的蔗糖溶液固定过夜,然后转移至40%的蔗糖溶液固定到组织沉底,使用冰冻切片机 (莱卡CM1950) 切片后贴在黏附载玻片上,按照一步法免疫组化试剂盒 (凯基) 说明书完成免疫组化实验,用显微镜观察拍照。

    在养殖箱中暂养7 d后随机选取100只瘤背石磺,平均分为2组,暂养在2个养殖箱中,分别给每只瘤背石磺注射100 μL磷酸盐缓冲溶液 (Phosphate buffered saline, PBS) 和100 μL脂多糖 (LPS, 0.5 mg·mL–1,溶于PBS),经处理的瘤背石磺分别放回养殖箱暂养,分别在注射后第0、第6、第12、第24、第48小时取样,每次随机抽取9只石磺,将3只的血细胞、神经节、肝胰腺、肌肉、性腺、皮肤和腹足合并为1个样本,每个时间点采集3个平行样本。血细胞的采集是使用1 mL注射器从瘤背石磺腹部抽取血液,在800 ×g、4 ℃条件下离心10 min,获得血细胞后将其溶解在trizol中,用液氮速冻,于–80 ℃保存。其他组织取样后放入液氮速冻,于–80 ℃保存。用trizol法提取各组织RNA,用HiScript Q RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper, Vazyme,美国) 试剂盒进行反转录,得到的cDNA于–20 ℃备用。

    按照上述方法,以各组织各个时期刺激前后的cDNA为模板,18S为内参,进行实时荧光定量RT-PCR扩增实验,数据使用2–ΔΔCT法进行分析。

    使用SPSS 26.0软件对荧光定量的数据进行处理,单因素方差分析结果以“平均值±标准差 ($ \overline X \pm {\rm{SD}} $)”表示。P<0.05为差异显著,P<0.01为差异极显著。

    根据瘤背石磺转录组测序结果获得的OrFMRFamide基因片段,通过3'和5'-RACE扩增得到该基因全长序列为2 618 bp,开放阅读框 (Open reading frame, ORF)为882 bp,基因序列末端加尾信号AATAA与Poly (A) 之间有17个碱基 (图1)。ProtParam推测编码1个含有293个氨基酸的蛋白,分子量为33847.88 kD,理论等电点 (pI) 为9.25,不稳定指数为57.00,预测为不稳定蛋白,溶脂指数为55.67,平均疏水指数为–0.890。Server预测该蛋白不存在糖基位点。NetPhos 2.0 Server预测该蛋白含有12个磷酸化位点 [ 丝氨酸 (Ser):4;苏氨酸 (Thr):2;酪氨酸 (Tyr):6]。信号肽软件预测该基因有1个N端信号肽 (1~24)。

    图  1  FMRFamide基因的氨基酸序列及cDNA全长
    浅灰色阴影部分是该基因编码信号肽部分,起始密码子和终止密码子用方框标出,深灰色阴影是磷酸化位点,末端加尾信号AATAAA用下划线标出,poly (A) 用斜体表示
    Figure  1.  Amino acid sequence and full length cDNA of FMRFamide gene
    The light grey shaded portion is the signal peptide portion of the gene; the start and stop codons are boxed; the dark grey shaded portion is the phosphorylation site; the end plus tail signal AATAAA is underlined, and poly (A) is in italics.

    将预测得到的OrFMRFamide基因的氨基酸序列放到NCBI上进行BLAST比对,发现其与其他物种的FMRFamide基因有较高的同源性,下载这些物种的氨基酸序列,使用MEGA-X软件构建进化树 (图2)。结果显示,瘤背石磺和静水椎实螺 (Lymnaea stagnalis) 聚为一支,再与加利福尼亚海兔、棕蜗牛 (Cornu aspersum) 等腹足纲软体动物聚为一大支,与双壳纲海洋贝类聚为一大支,与环节动物和节肢动物各聚为一支。瘤背石磺与静水椎实螺进化关系最为接近。

    图  2  利用MEGA-X软件基于NJ法构建的FMRFamide系统进化树
    Figure  2.  NJ phylogenetic tree of FMRFamide by MEGA-X

    荧光定量RT-PCR结果显示,OrFMRFamide基因在神经节中的表达量极显著高于在其他组织的(P<0.01),此外,该基因也在血细胞、肝胰腺、皮肤、性腺组织中表达,几乎不在肌肉和腹足中表达 (图3)。以性腺的表达量为参照,血细胞、神经节、肝胰腺和皮肤的表达量分别约为性腺的2.33、1 025.47、36.96和6.86倍。

    图  3  OrFMRFamide在各组织的相对表达量
    **. 极显著性差异 (P<0.01)
    Figure  3.  mRNA relative expression of OrFMRFamide in different tissues
    **. Very significant at 0.01 level (P<0.01)

    利用免疫组织化学的方法分析瘤背石磺FMRFamide神经肽在神经节、肝胰腺、肌肉、性腺、皮肤和腹足中的分布情况 (图4),结果显示OrFMRFamide基因在不同组织中的表达模式和FMRFamide神经肽的分布水平相一致,在神经节中大量表达,在性腺、皮肤和肝胰腺中微量表达,在腹足和肌肉中几乎不表达。

    图  4  免疫组化结果
    a. 神经节;b. 腹足;c. 肝胰腺;d. 肌肉;e. 皮肤;f. 性腺;箭头表示FMRFamide多肽
    Figure  4.  Immunohistochemistry results
    a. Ganglia; b. Pleopod; c. Hepatopancreas; d. Muscle; e. Skin; f. Gonad; arrows represent FMRFamide polypeptides.

    基于瘤背石磺OrFMRFamide基因在不同组织中的相对表达量,研究该基因在LPS刺激后48 h内的表达变化 (图5)。LPS组肝胰腺中OrFMRFamide基因的表达量在注射后第12小时达最高值,与PBS组差异显著 (P<0.05),皮肤中OrFMRFamide基因的表达量随时间变化差异不大,但LPS组整体的表达量显著高于PBS对照组 (P<0.05),神经节中该基因的表达量在第12 小时达最高值,整体表达水平显著高于PBS对照组 (P<0.05),血细胞中该基因的相对表达量在第12小时达最高值,性腺中的表达量随时间变化的差异不显著,且LPS组和PBS组差异也不显著 (P>0.05)。

    图  5  OrFMRFamide基因在炎症刺激后在不同组织中的相对表达量
    图中不同字母表示差异显著 (P<0.05)
    Figure  5.  Relative expression of OrFMRFamide gene in different tissues after inflammatory stimulation
    Different letters in the figure indicate significant difference (P<0.05).

    本研究克隆了瘤背石磺FMRFamide基因,系统进化树显示其与静水椎实螺、棕蜗牛聚为一支,说明其与软体动物门腹足纲贝类的亲缘关系非常近,与软体动物双壳纲贝类明显区分开来。

    神经节、肝胰腺和血细胞属于NEI (神经节、肝胰腺、血细胞) 系统,有报道指出NEI系统在应激和感染过程中能维持机体内环境稳定,有效清除病原体,调节机体平衡,减少对宿主的伤害[15]。FMRFamide作为软体动物神经系统中的重要组成部分[16],实时荧光定量结果显示OrFMRFamide在神经节、血细胞和肝胰腺组织中均有较高的表达,在神经节中表达量最高,可能因为其参与神经系统中神经递质的合成和释放及神经内分泌系统的可塑性调节。杨金龙等[17]在研究厚壳贻贝 (Mytilus coruscus) 早期幼虫发育时也发现,FMRFamide大量存在于神经系统中。在其他软体动物如双壳纲[7,18]、腹足纲[19]、头足纲[20]中,FMRFamide多肽也被报道主要存在于神经系统、消化系统和血细胞中。FMRFamide在瘤背石磺NEI系统中的高表达说明该基因可能对瘤背石磺的稳态起重要作用,推测FMRFamide可能在神经节、肝胰腺和血细胞中合成和加工,然后通过自分泌/旁分泌信号通路释放到血细胞中来调节机体。荧光定量结果显示瘤背石磺FMRFamide还存在于皮肤中,高凤娟等[21]和Allan等[22]对花背蟾蜍 (Bufo raddei) 和北美木蛙 (Rana sylvatica) 的研究表明,两栖类动物皮肤具有先天免疫功能,说明瘤背石磺作为无贝壳的两栖型贝类,为适应潮间带恶劣的生存环境,FMRFamide多肽可能参与了其先天免疫。FMRFamide应用免疫组化学进一步证实了OrFMRFamide在不同组织中的分布和FMRFamide多肽的分布一致,这与Terrnina等[23]对猫肝吸虫 (Opisthorchis felineus) 和Allan等[22]对星虫 (Themiste lageniformis) 中FMRFamide的定位结果相似。

    炎症刺激实验结果显示,瘤背石磺神经节、肝胰腺和血细胞中FMRFamide基因相对表达量变化趋势为先上升后降低,在注射脂多糖12 h后的表达量达最大值,说明FMRFamide可能参与了免疫防御反应。在无脊椎动物中,血细胞被认为是宿主在免疫防御反应中起重要作用的免疫相关细胞[24],更有研究表明免疫细胞可以通过自分泌信号途径重新合成神经肽来调节肌体免疫反应[25-27]。Wang等[28]用寄生虫感染光滑双脐螺 (Biomphalaria glabrata),发现FMRFamide相对表达量高于对照组,FMRFamide表达量上升以抵抗寄生虫感染,这和本研究结果一致,可以推测FMRFamide多肽能保护机体免受侵害,响应免疫刺激,在维持机体稳态中发挥重要作用。炎症刺激后瘤背石磺性腺中FMRFamide相对表达量变化不显著,Hada等[29]研究发现FMRFamide还能影响根结线虫 (Meloidogyne graminicola) 的繁殖因子,Kerbl等[30]的研究也证实FMRFamide能作用于生殖腺,影响动物的交配行为,推测瘤背石磺性腺中的FMRFamide可能对瘤背石磺的繁殖有影响,但不参与维持自身稳态。

  • 图  1   3 种药物浓度对数与概率单位回归分析

    Figure  1.   Regression analysis of logarithmic and probit for three drugs

    图  2   二溴海因对盐蚕豆虫种群生长曲线的影响

    Figure  2.   Effect of dibromo hydantoin on growth curve of F. salina population

    图  3   二溴海因对盐蚕豆虫最大种群密度的影响

    注: **. 与对照组相比差异极显著(p<0.01)。

    Figure  3.   Effect of dibromo hydantoin on maximum population density of F. salina

    Note: **. There are very significant differences compared with the control group (p<0.01).

    图  4   二溴海因对盐蚕豆虫的种群生长率和世代时间的影响

    注:相同字母为组间无显著性差异 (p>0.05),不同字母为组间有显著性差异 (p<0.05),生长率用小写字母表示,世代时间用大写字母表示。

    Figure  4.   Effect of dibromo hydantoin on population growth rate and generation time of F. salina

    Note: The same letters represent insignificant differences among the groups (p>0.05), while different letters represent significant differences among the groups (p<0.05). Growth rates are represented by lowercase letters, while generation time are represented by uppercase letters.

    图  5   聚维酮碘对盐蚕豆虫种群生长曲线的影响

    Figure  5.   Effect of povidone iodine on growth curve of F. salina population

    图  6   聚维酮碘对盐蚕豆虫最大种群密度的影响

    注: **. 与对照组相比差异极显著 (p<0.01)。

    Figure  6.   Effect of povidone iodine on maximum population density of F. salina

    Note: **. There are very significant differences compared with the control group (p<0.01).

    图  7   聚维酮碘对盐蚕豆虫的种群生长率和世代时间的影响

    注:相同字母为组间无显著性差异 (p>0.05),不同字母为组间有显著性差异 (p<0.05),生长率用小写字母表示,世代时间用大写字母表示。

    Figure  7.   Effect of povidone iodine on population growth rate and generation time of F. salina

    Note: The same letters represent insignificant differences among the groups (p>0.05), while different letters represent significant differences among the groups (p<0.05). Growth rates are represented by lowercase letters, while generation time are represented by uppercase letters.

    图  8   高锰酸钾对盐蚕豆虫种群生长曲线的影响

    Figure  8.   Effect of potassium permanganate on growth curve of F. salina population

    图  9   高锰酸钾对盐蚕豆虫最大种群密度的影响

    Figure  9.   Effect of potassium permanganate on maximum population density of F. salina

    图  10   高锰酸钾对盐蚕豆虫的种群生长率和世代时间的影响

    注:相同字母为组间无显著性差异 (p>0.05),不同字母为组间有显著性差异 (p<0.05),生长率用小写字母表示,世代时间用大写字母表示。

    Figure  10.   Effect of potassium permanganate on population growth rate and generation time of F. salina

    Note: The same letters represent insignificant differences among the groups (p>0.05), while different letters represent significant differences among the groups (p<0.05). Growth rates are represented by lowercase letters, while generation time are represented by uppercase letters.

    表  1   3种消毒药物急性毒性试验质量浓度

    Table  1   Mass concentration of three disinfectant drugs in acute toxicity test

    药物名称
    Drug name
    质量浓度
    Mass concentration/(mg∙L−1)
    二溴海因
    Dibromo hydantoin
    0 0.50 0.71 1.00 1.41 2.00
    聚维酮碘
    Povidone iodine
    0 14.45 16.60 19.05 21.90 25.00
    高锰酸钾
    Potassium permanganate
    0 0.52 0.63 0.76 0.90 1.10
    下载: 导出CSV

    表  2   3种消毒药物慢性毒性试验质量浓度

    Table  2   Mass concentration of three disinfectant drugs in chronic toxicity test

    药物名称
    Drug name
    质量浓度
    Mass concentration/(mg∙L−1)
    二溴海因
    Dibromo
    hydantoin
    0 0.015 0 0.018 7 0.024 9 0.037 4 0.074 8
    聚维酮碘
    Povidone iodine
    0 0.392 0 0.490 5 0.654 0 0.981 0 1.962 0
    高锰酸钾
    Potassium permanganate
    0 0.018 5 0.023 1 0.030 8 0.046 25 0.092 5
    下载: 导出CSV
  • [1] 李声平, 董靖, 杨移斌, 等. 过硫酸氢钾复合物粉对4种常见水产病原微生物的杀灭效果[J]. 南方水产科学, 2023, 19(4): 148-157.
    [2] 赵晓雨, 苏浩昌, 徐煜, 等. 渔用氧化剂对水源水和池塘水中磺胺类抗性基因sul1的去除作用[J]. 南方水产科学, 2021, 17(3): 46-53. doi: 10.12131/20200231
    [3] 张文伟, 黄忠, 段亚飞, 等. 不同消毒剂对凡纳滨对虾育苗水质和菌群结构的影响[J]. 南方水产科学, 2021, 17(2): 1-10.
    [4] 丁建鹤, 张志忠, 廖明军, 等. 消毒剂聚维酮碘对养殖水体沉积物中氮循环微生物的影响[J]. 水处理技术, 2024, 50(2): 51-56.
    [5] 付勇, 任崇乾. 水产养殖消毒类药物制剂的使用[J]. 渔业致富指南, 2024(1): 62-65.
    [6] 刘丽娟, 王亚军, 石存斌, 等. 水产常见消毒剂对鱼源柱状黄杆菌的抑菌和杀菌效果研究[J]. 科学养鱼, 2021(11): 47-49.
    [7] 刘波, 周群兰, 孙存鑫, 等. 聚维酮碘对池塘消毒效果研究[J]. 科学养鱼, 2023(7): 57-59.
    [8] 刘青, 崔延超, 李双宇, 等. 聚维酮碘对褶皱臂尾轮虫的毒性效应[J]. 大连海洋大学学报, 2015, 30(2): 149-154.
    [9] 蒋湘, 吕美霞, 许乐乐, 等. 3种消毒剂对早期卤虫幼体的毒性研究[J]. 水产养殖, 2022, 43(4): 12-16.
    [10]

    LYU K, GU L, SUN Y F, et al. Cyanobacterial effects on an aquatic keystone grazer are reshaped by presence of the herbicide atrazine[J]. Freshw Biol, 2024, 69(2): 212-225. doi: 10.1111/fwb.14203

    [11]

    WANG Z, CHI Y, LI T, et al. Biodiversity of freshwater ciliates (Protista, Ciliophora) in the Lake Weishan Wetland, China: the state of the art[J]. Mar Life Sci Technol, 2022, 4(4): 429-451. doi: 10.1007/s42995-022-00154-x

    [12]

    ZHANG L, YIN W, SHEN S Y, et al. ZnO nanoparticles interfere with top−down effect of the protozoan paramecium on removing microcystis[J]. Environ Pollut, 2022, 310: 119900. doi: 10.1016/j.envpol.2022.119900

    [13]

    ZHAO A Q, WANG Q L, XU H L, et al. Effects of continuous warming on homogeneity of periphytic protozoan fauna in marine ecosystems[J]. Mar Pollut Bull, 2024, 199: 116017. doi: 10.1016/j.marpolbul.2023.116017

    [14]

    ALI A, ZHONG X X, WANG Q L, et al. A community-based bioassay for the salinity stress on periphytic protozoan fauna in marine ecosystems[J]. Cont Shelf Res, 2024, 273: 105177. doi: 10.1016/j.csr.2024.105177

    [15]

    CHEN X, WANG C D, PAN B, et al. Single-cell genomic sequencing of three peritrichs (Protista, Ciliophora) reveals less biased stop codon usage and more prevalent programmed ribosomal frameshifting than in other ciliates[J]. Front Marine Sci, 2020, 7: 602323. doi: 10.3389/fmars.2020.602323

    [16]

    HOU C Y, SHI T Y, WANG W Y, et al. Toxicological sensitivity of protozoa to pesticides and nanomaterials: a prospect review[J]. Chemosphere, 2023: 139749.

    [17]

    KUMAR A, KUMAR V, PODDER T, et al. First report on ecotoxicological QSTR and I-QSTR modeling for the prediction of acute ecotoxicity of diverse organic chemicals against three protozoan species[J]. Chemosphere, 2023, 335: 139066. doi: 10.1016/j.chemosphere.2023.139066

    [18]

    RHODES M A, PHELPS R P. Evaluation of the ciliated protozoa, Fabrea salina as a first food for larval red snapper, Lutjanus campechanus in a large scale rearing experiment[J]. J Appl Aquac, 2008, 20(2): 120-133. doi: 10.1080/10454430802197383

    [19] 周永欣, 章宗涉. 水生生物毒性试验方法[M]. 北京: 农业出版社, 1989: 75-106.
    [20] 黄惠东. 概率单位分析法[J]. 现代引信, 1988(3): 56-66.
    [21]

    LEI Y L, XU K D. Methods for ecological studies of marine benthic protozoa[J]. Mar Sci, 2007, 31(5): 49-57.

    [22]

    XU H L, SONG W B, ZHU M Z, et al. Ecological functions of ciliated protozoa in marine ecosystem: effects on accumulation of ambient ammonia[J]. High Technol Lett, 2005, 11(1): 101-106.

    [23]

    YANG Z, LYU K, CHEN Y F, et al. The interactive effects of ammonia and microcystin on life-history traits of the Cladocera Daphnia magna: synergistic or antagonistic?[J]. PLoS One, 2017, 7(3): e32285.

    [24] 石雪, 吕湘琳, 齐红莉, 等. 硝酸钠和氯化铵对蠕形康纤虫的毒性影响[J]. 天津农学院学报, 2023, 30(3): 53-58.
    [25]

    SUN H J, LYU K, MINTER E J A, et al. Combined effects of ammonia and microcystin on survival, growth, antioxidant responses, and lipid peroxidation of bighead carp Hypophthalmythys nobilis larvae[J]. J Hazard Mater, 2012, 221: 213-219.

    [26] 齐红莉, 汤荣成, 徐海龙, 等. 三氯异氰尿酸对海洋拟阿脑虫种群生长的影响[J]. 水生态学杂志, 2018, 39(3): 94-98.
    [27] 潘莹, 姜勇, 张伟, 等. 不同温度对3种海洋纤毛虫种群增长的影响[J]. 应用与环境生物学报, 2010, 16(6): 807-811.
    [28] 李伟光, 李伟宪, 李丽敏, 等. 二溴海因绿色合成工艺条件的探究[J]. 山东化工, 2023, 52(18): 16-18.
    [29] 叶素兰, 余治平. 六种水产药物对草鱼鱼种的急性毒性试验[J]. 水产科学, 2007(10): 564-566.
    [30] 査智辉, 许文军, 谢建军, 等. 几种常见水产药品对日本黄姑鱼幼鱼的急性毒性试验[J]. 水生态学杂志, 2010, 31(5): 66-71.
    [31] 徐镇, 徐如卫, 周志明, 等. 四种常用渔药对秀丽白虾的急性毒性试验[J]. 水产科学, 2005(7): 29-31.
    [32] 菅玉霞, 李莉, 王晓龙, 等. 4种常用水产药物对黄姑鱼幼鱼的急性毒性[J]. 水产科技情报, 2022, 49(3): 143-149.
    [33] 陈志, 周洪磊, 林国明, 等. 4种消毒剂处理对岩虫的急性毒性效应分析[J]. 福建农业科技, 2023, 54(5): 15-20.
    [34] 戴瑜来, 王宇希, 许宝青, 等. 硫酸铜、敌百虫、聚维酮碘对吉富罗非鱼的急性毒性及组织病理学研究[J]. 南方水产科学, 2023, 19(6): 116-126.
    [35] 郭坤, 罗鸣钟, 阮国良, 等. 4种水产药物对宽体金线蛭幼苗的急性毒性研究[J]. 水产科学, 2020, 39(4): 596-601.
    [36] 孙侦龙, 朱永祥, 陈芸燕, 等. 3种水产消毒剂对暗纹东方鲀稚鱼的急性毒性试验[J]. 水产科学, 2015, 34(5): 277-281.
    [37] 黄智慧, 王庆敏, 马爱军, 等. 不同培养液对大菱鲆致病性纤毛虫: 贪食迈阿密虫种群增长及复壮毒力的影响[J]. 水产科技情报, 2022, 49(2): 95-98.
    [38] 王兴强, 马甡, 曹梅, 等. 二溴海因和碳水化合物水平对凡纳滨对虾生长和免疫的影响[J]. 海洋科学, 2010, 34(4): 25-31.
    [39] 谢钦铭, 赵伟伟. 三种药物对褶皱臂尾轮虫的急性毒性[J]. 南昌大学学报(理科版), 2007(1): 100-102.
    [40] 张港生, 孙鑫, 朱大玲. 基于光照和温度环境条件下杜氏盐藻的生长数学模型构建[J]. 盐科学与化工, 2023, 52(8): 22-29.
    [41] 杨治国, 胡安华, 马超, 等. 高锰酸钾在水产动物病害防治中的应用[J]. 河北渔业, 2010(10): 45-49.
    [42] 张恺. 聚维酮碘对小球藻毒性效应研究[D]. 扬州: 扬州大学, 2022: 14-21.
  • 期刊类型引用(1)

    1. QIU Jiayin,SUN Lianlian,LI Shuang,ZHOU Xu,CHI Changfeng,ZHENG Libing. Identification and Expression Profile of a Neuropeptide LFRFamide-Like Gene During Different Stages of Gonadal Development in the Cephalopod Sepia pharaonis. Journal of Ocean University of China. 2024(02): 499-508 . 必应学术

    其他类型引用(0)

图(10)  /  表(2)
计量
  • 文章访问数:  75
  • HTML全文浏览量:  19
  • PDF下载量:  12
  • 被引次数: 1
出版历程
  • 收稿日期:  2024-05-04
  • 修回日期:  2024-06-25
  • 录用日期:  2024-10-09
  • 网络出版日期:  2024-10-23
  • 刊出日期:  2024-12-04

目录

/

返回文章
返回