冷应激对黑鲷组织损伤及细胞凋亡基因表达的影响

卫明亮, 张志伟, 张志勇, 林志杰, 祝斐, 贾超峰, 孟乾, 徐大凤, 张曹进

卫明亮, 张志伟, 张志勇, 林志杰, 祝斐, 贾超峰, 孟乾, 徐大凤, 张曹进. 冷应激对黑鲷组织损伤及细胞凋亡基因表达的影响[J]. 南方水产科学, 2022, 18(5): 110-117. DOI: 10.12131/20210372
引用本文: 卫明亮, 张志伟, 张志勇, 林志杰, 祝斐, 贾超峰, 孟乾, 徐大凤, 张曹进. 冷应激对黑鲷组织损伤及细胞凋亡基因表达的影响[J]. 南方水产科学, 2022, 18(5): 110-117. DOI: 10.12131/20210372
WEI Mingliang, ZHANG Zhiwei, ZHANG Zhiyong, LIN Zhijie, ZHU Fei, JIA Chaofeng, MENG Qian, XU Dafeng, ZHANG Caojin. Effects of cold stress on black porgy tissue injury and apoptosis gene expression[J]. South China Fisheries Science, 2022, 18(5): 110-117. DOI: 10.12131/20210372
Citation: WEI Mingliang, ZHANG Zhiwei, ZHANG Zhiyong, LIN Zhijie, ZHU Fei, JIA Chaofeng, MENG Qian, XU Dafeng, ZHANG Caojin. Effects of cold stress on black porgy tissue injury and apoptosis gene expression[J]. South China Fisheries Science, 2022, 18(5): 110-117. DOI: 10.12131/20210372

冷应激对黑鲷组织损伤及细胞凋亡基因表达的影响

基金项目: 江苏省“333工程”科研资助项目 (BRA2020372);江苏省农业重大新品种创制项目 (PZCZ201744);江苏省水产良种保种项目 (2021-SJ-032);江苏省自然科学基金面上项目 (BK20221268)
详细信息
    作者简介:

    卫明亮 (1997—),男,硕士研究生,研究方向为鱼类遗传育种。E-mail: 1511226564@qq.com

    通讯作者:

    张志伟 (1977—),男,研究员,博士,从事鱼类遗传育种研究。 E-mail: zhzhwei2005@126.com

  • 中图分类号: S 917.4

Effects of cold stress on black porgy tissue injury and apoptosis gene expression

  • 摘要: 为探究黑鲷 (Acanthopagrus schlegelii) 在低温下的生理适应机制,设计了3个温度梯度 (15、10和5 ℃),以15 ℃为对照,低温胁迫24 h,分别研究了冷应激前后黑鲷的组织结构变化、生理生化反应及凋亡基因的表达。结果显示,随着温度的降低,黑鲷呈现出肝脏空泡化、腮小片收缩、肌纤维断裂等组织损伤现象;肝脏中的甘油三酯 (TG) 含量显著降低 (P<0.05),谷草转氨酶 (AST)、谷丙转氨酶 (ALT) 活性和总胆固醇 (T-CHO) 含量显著升高 (P<0.05),表明黑鲷遭受冷应激,肝脏功能紊乱、结构遭到破坏。q-PCR结果显示,10 ℃时黑鲷通过降低apaf-1、baxcaspase-1基因表达量,促进caspase-3、diablo基因表达,从而减少肝脏细胞丢失来降低冷应激的损伤;胁迫至5 ℃时,温度超过黑鲷自身生理调节阈值,肝脏细胞受损程度加重,黑鲷促进apaf-1、bcl-2和diablo基因表达,抑制caspase-3基因表达,最大限度维持了肝脏细胞的稳态。结果表明,随着温度的降低,黑鲷的肝脏、腮、肌肉损伤加重,其中肝脏通过调节AST、ALT、T-CHO、TG以及凋亡基因表达,以减少组织损伤带来的危害。
    Abstract: In order to explore the physiological adaptation mechanism of black porgy (Acanthopagrus schlegelii) under low temperature stress, we designed three temperature gradient groups (15, 10 and 5 ℃). Taking 15 ℃ as the control group and with a low temperature stress for 24 h, we studied the tissue structure changes, physiological, biochemical reactions and the expression of apoptosis genes before and after the cold stress. The results show that with the intensification of low temperature stress, the tissue damage such as liver vacuolation, gill lamellae contraction and breakage and muscle fiber breakage were aggravated. The content of triglyceride (TG) in the liver decreased significantly, while the activities of aspartate aminotransferase (AST) and alanine aminotransferase (ALT) as well as the content of total cholesterol (T-CHO) increased significantly, indicating that A. schlegelii had suffered from liver dysfunction and structural damage under cold stress condition. At 10 ℃, the liver reduced the damage of cold stress by decreasing expression levels of apaf-1, bax and caspase-1 genes, increasing expression of caspase-3 and diablo genes so as to reduce the loss of liver cells. When the temperature reached 5 ℃, the temperature exceeded A. schlegelii's physiological regulation threshold, so the degree of liver cell damage was aggravated. The expression of apaf-1, bcl-2 and diablo genes were promoted, while the caspase-3 gene expression was inhibited in order to maintain the homeostasis of liver cells to the greatest extent. It is showed that as the temperature decreased, the liver, gills and muscle damages of A. schlegelii increased. The liver regulated the expression of AST, ALT, T-CHO, TG and apoptotic pathway related genes to reduce the damage caused by tissue damage.
  • 耳石是真骨鱼类内耳中的一种硬组织,其形态结构常被用作物种鉴定[1-2]、摄食研究[3-4]、群体区分[5-6]等的重要工具。目前耳石形态学分析方法主要分为传统的框架分析法[7-9]和几何形态测量学法,后者又根据研究方式的不同进一步分为研究耳石轮廓的傅里叶分析法[10-12]以及基于笛卡尔地标的地标点法[13-15]。与其他形态学研究方法不同,地标点法工作的重点和难点在于地标点的选取,因此它除了可以分析轮廓上的特征外,还能就轮廓内部的地标点(如不同组织的分界点)进行分析和研究,并能以网格图的形式直观地显示出种间、甚至种内不同群体形态特征的差异变化[16-17],同时还能分析这些形态变化上的动态趋势[18]。由于地标点法能够有效地把握研究对象形态上的特征差异,所以即使样本量较小(n≤10),依旧可以明显地反映出不同群体的形态特征差异[17,19-20]。然而,目前地标点法应用于耳石的研究较少,现有的耳石地标点法的研究多集中于耳石轮廓上的地标点,而对于耳石近轴面,特别是主凹槽(也称“听沟”)的形态特征端点研究报道较少[14,16]

    凤鲚(Coilia mystus)和七丝鲚(C. grayii)属鲚属,是我国南部九龙江口、珠江口等河口水域的重要经济鱼类。我国分布的鲚属鱼类除这2种外,还有刀鲚(C. nasus)。遗传学分析结果显示,这3种鲚属鱼类中以凤鲚最为原始,而其余2种均很可能为后期演化过程中适应了不同气候环境而分化出来的物种[21-22]。作为洄游性鱼类,凤鲚[23]和七丝鲚[24]亲鱼均会选择通海江河作为其产卵场,而幼鱼则顺流而下回到河口半咸水甚至海水中生长、育肥。由此可见,其对应河口的资源群体与海区群体存在关联性,前者对后者存在资源补充的重要作用。值得注意的是,洄游的习性为鱼类提供了更为广阔的活动范围与栖息环境,同时也会使相关种类因栖息地环境的变化而衍生出新的群体[25]。同属的刀鲚即存在这种情况,除了洄游群体外,其在长江流域的太湖、鄱阳湖等水域存在淡水定居或陆封群体[23,26]。此外,即使在洄游型刀鲚群体的内部也会因产卵、孵化起源的河流不同,而分化为不同群体[27]。这种倾向于回到原来孵化场的产卵繁殖洄游的行为被称为“回归”行为[25]。因此,笔者假设九龙江和珠江的凤鲚群体间和七丝鲚群体间可能分属不同地理资源群。为了验证这一假说,同时为了解两者耳石形态的种间和种内差异,笔者以2个水域的凤鲚和七丝鲚的耳石形态作为切入点,对其差异性进行了较为深入的比较研究。

    笔者前期曾利用框架分析法研究过我国刀鲚、凤鲚、湖鲚(C. nasus taihunesis)的耳石形态特征,发现了湖鲚耳石形态与洄游型刀鲚有明显差异,同时瓯江刀鲚与长江口及周边黄海海域的刀鲚耳石形态有明显差异,表现为不同的群体特征[28]。由此可见,耳石形态学分析方法对我国鲚属鱼类的种间(刀鲚和凤鲚)和种内(湖鲚以及不同水域刀鲚)判别均具有较好的效果。然而,在随后的研究中,笔者同样利用框架法研究了刀鲚、短颌鲚(C. brachygnathus,刀鲚的一个淡水生态型)、凤鲚以及七丝鲚,结果发现该法在凤鲚和七丝鲚间发生了较多的误判[29]。鉴于此,本研究首次采用更能反映几何学差异的地标点法,来比较采集自珠江口和九龙江口凤鲚和七丝鲚的耳石形态特征,以期探究凤鲚和七丝鲚种间耳石形态的差异特征,为鲚属鱼类耳石形态学研究引入新的研究方法,以突破其他耳石形态学研究方法较难辨析同种不同群体或者生态类群的现状;另外也希望掌握珠江口和九龙江口同种鲚属鱼类不同地理群体间耳石形态的种内差异特征,并尝试分析不同地理群体间的关联性,以验证它们是否分属不同的地理资源群体。本研究结果也可为建立基于耳石地标学法的鲚属鱼类群体的识别技术体系,以及将其更广泛地应用于其他经济、珍稀、名贵鱼类群体资源的准确识别和合理评价提供新途径。

    于2016年8月在珠江口分别采集10尾凤鲚[全长(17.7±1.0) cm、体质量(16.0±2.3) g] 标本和10尾七丝鲚 [全长(19.4±1.5) cm、体质量(24.0±5.9) g] 标本,另于2016年9月在九龙江口分别采集10尾凤鲚 [全长(17.8±9.0) cm、体质量(14.8±2.4) g] 和10尾七丝鲚标本 [全长(20.2±1.8) cm、体质量(22.3±7.5) g] (图1)。标本采集后于– 20 ℃保存并运回实验室。

    图  1  珠江口 (SⅠ) 和九龙江口 (SⅡ) 凤鲚和七丝鲚采样点
    Figure  1.  Sampling sites of C. mystus and C. grayii in Pearl River estuary (SⅠ) and Jiulong River estuary (SⅡ)

    解剖鱼标本并摘取矢耳石。使用去离子水和乙醇去除耳石表面有机质,随后于室温下干燥保存待用。待耳石干燥后,将其以最长轴水平方向放置于电子显微镜(QX800HD720P3D,ASONE株式会社,日本)下,拍摄耳石近轴面(有主凹槽面)。

    本研究选取凤鲚和七丝鲚耳石形态上的耳石轮廓上端点(图2-1~6)和主凹槽轮廓拐点(图2-7~10)。地标点软件使用参考郑朝臣等[17],具体为利用tpsdig2.12软件根据以上选定好的地标点对耳石照片建立坐标点(图2),并获取相关坐标值建立相应数据文件;利用tipsmall 1.2软件进行最小平方和法则(least-square criterion)回归分析检验地标点选取的有效性;利用tpsRelw 1.46经普式叠加得出地标点,并对其进行一系列旋转、放大,并计算平均型(mean shape)和相对扭曲得分(relative warps scores);最后利用tpsRegr 1.36进行薄板样条分析以勾勒凤鲚和七丝鲚耳石网格图,并比较其与平均形之间的形态扭曲和变化差异。

    图  2  凤鲚 (a) 和七丝鲚 (b) 耳石地标点位置图
    Figure  2.  Landmark points for morphological measurements of C. mystus (a) and C. grayii (b)

    用SPSS 20.0对相对扭曲得分进行凤鲚和七丝鲚不同群体间的判别分析和聚类分析。

    最小平方回归分析结果显示,凤鲚和七丝鲚的切空间距离(distance in tangent space,y轴)和普式距离(procrustes distance,x轴)的回归系数为0.999,接近于1,说明本研究所选地标点有效,去除了在地标点选取时发生的位置、取向和比例等的变化。进一步分析各地标点的相对扭曲贡献率发现,虽然外部轮廓上地标点3贡献率达12.6%,但总体而言,主凹槽上地标点的贡献率(76.1%)要远高于余下的耳石外部轮廓上的地标点(23.9%,表1),说明本研究在区分不同水域凤鲚和七丝鲚耳石形态差异中,主凹槽上地标点的作用较大。凤鲚和七丝鲚种间耳石形态差异以及珠江口和九龙江口凤鲚和七丝鲚种内不同群体间形态差异均主要表现在主凹槽的末端(8、9)以及头颈部(7、10)。

    表  1  不同地标点贡献率
    Table  1.  Contribution rate of different landmarks
    地标点
    landmark
    贡献率/%
    contribution rate
    1 1.9
    2 5.3
    312.6
    4 0.7
    5 0.4
    6 3.0
    716.3
    819.3
    930.7
    10 9.8
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    为了更好地分析不同水域凤鲚和七丝鲚耳石形态特征差异,在利用tpsRegr 1.36软件进行平均形计算后,对结果进行绝对扭曲、回归分析和置换检验,对最后的结果进行网格化和差异矢量化处理,并将结果进行10倍放大。通过网格图不难发现,凤鲚和七丝鲚间耳石轮廓上的地标点4和6区别较明显,具体为凤鲚较七丝鲚地标点4更向内而地标点6更向外,表现在耳石形态上即七丝鲚翼叶部分较凤鲚更向外凸出,而凤鲚较七丝鲚耳石腹部更向外凸出。而在主凹槽轮廓上,凤鲚耳石上地标点7、8、9、10均较七丝鲚向外变化,表现为前者主凹槽更宽(图3)。

    图  3  珠江口和九龙江口凤鲚及七丝鲚耳石形态判别分析及网格变形图与变异可视化 (变异扩大10倍)
    a1. 九龙江七丝鲚(□);a2. 九龙江凤鲚(◇);b1. 珠江七丝鲚(△);b2. 珠江凤鲚(○);×. 组质心
    Figure  3.  Discriminate analysis plots, grid deformation and variation visualization of otolith for C. mystus (CM) and C. grayii (CG) (variation enlarged 10 times)
    a1. C. grayii from the Jiulong River estuary (□); a2. C. mystus from the Jiulong River estuary (◇); b1. C. grayii from the Pearl River estuary (△); b2. C. mystus from the Pearl River estuary (○); ×. group center

    比较不同水域同种鱼类耳石形态可以发现珠江口的凤鲚和七丝鲚较九龙江的凤鲚和七丝鲚耳石形态变化更为明显,特别是地标点6和8;表现为珠江的七丝鲚翼叶要较九龙江明显,而凤鲚则相反;珠江的七丝鲚主凹槽较九龙江更窄,而珠江凤鲚则较九龙江凤鲚更宽(图3)。进一步利用16个相对扭曲得分建立判别函数,结果显示4个群体间差异较为明显(图3),判正率为100%,不存在误判个体(表2)。

    表  2  珠江口和九龙江口凤鲚和七丝鲚耳石形态判别分析结果
    Table  2.  Discriminate analysis for otolith of C. mystus (CM) and C. grayii (CG) from Pearl River estuary (PRE) and Jiulong River estuary (JRE)
    实际组
    actual group
    预测组 (判正率) prediction group (accuracy rate)
    九龙江口七丝鲚
    CG from JRE
    九龙江口凤鲚
    CM from JRE
    珠江口七丝鲚
    CG from PRE
    珠江口凤鲚
    CM from PRE
    九龙江口七丝鲚 CG from JRE10 (100%)000
    九龙江口凤鲚 CM from JRE010 (100%)00
    珠江七口丝鲚 CG from PRE0010 (100%)0
    珠江口凤鲚 CM from PRE00010 (100%)
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    层次聚类结果显示,本研究中4个鲚属群体间,珠江口凤鲚和九龙江口凤鲚聚为第一小类,其个体的平方欧式距离为0.01;而珠江口七丝鲚和九龙江口七丝鲚聚为第二小类,其个体的平方欧式距离为0.03;凤鲚和七丝鲚两者间平方欧式距离则为0.06 (图4)。

    图  4  珠江口和九龙江口凤鲚和七丝鲚耳石形态聚类分析结果
    Figure  4.  Dendrogram for hierarchical cluster analysis by otolith morphology of C. mystus and C. grayii from Pearl River estuary and Jiulong River estuary

    在鱼类资源调查和保护工作中,群体识别工作十分重要。在洄游习性的作用下,不同地理群体的个体往往会发生交流,特别是具有海洋生活史的鱼类,其在幼鱼阶段可以通过扩散作用将很大范围内的群体互相关联[30-32];换言之,空间上不同水域的鱼类资源,其部分群体的起源往往来自相同群体,不同群体间由于资源补充的作用而互相关联。虽然遗传学手段已被证实为研究物种分类的一种十分有效的手段,然而受限于遗传水平需较长时间才会形成足够的差异[33],故在一些遗传分化不明显的群体上并不十分有效。而对于这部分群体的研究,形态学分析则显得更具优势。由于其同时受到遗传和环境因子的共同作用[34],某种意义上形态学特征更能反映出不同地理群体间的差异。然而,由于传统形态学研究手段的限制,研究对象所含的形态学信息无法充分提取出来,从而使得形态学判别效果不及其他判别方法[35-36]。随着科学技术的进步,特别是傅里叶法和地标点法的加入,形态学研究也得到了长足的发展。前者可用于提取研究对象较全面的轮廓信息,后者则针对研究对象的某些特征地标点深入分析,才使得前述局限大为改观。本研究利用地标点法对珠江口和九龙江口的凤鲚和七丝鲚的耳石形态进行分析和研究,并探究其群体结构和关联性,结果明显显示相较于耳石轮廓上的地标点,其主凹槽上的地标点更能反映出2种鲚属鱼类不同群体间的差异。尤其值得注意的是,虽然本研究样本量较少,但通过比较前人类似样本量受限的研究报道[17,19-20],笔者认为本研究所用样本量亦能够反映出不同群体的差异;同时从结果来看,地标点法对前期利用框架法较难区分的凤鲚和七丝鲚耳石[29]均已能够有效地进行判别(判正率均达100%)。由此可见,在基于耳石形态的鱼类种群识别上,地标点法具有传统形态学研究方法不可比拟的优势。

    主凹槽是鱼类耳石表面的凹槽,其主要作用是连接听觉神经与耳石,并被证实可以用来作为鱼类种间和种内形态分析的重要工具[37]。本研究发现,凤鲚与七丝鲚主凹槽形态差异明显,主要表现为凤鲚较七丝鲚更宽,而在种间不同地理群体间,珠江个体比九龙江个体的变异程度更大,具体表现为珠江的七丝鲚主凹槽较九龙江更窄,但珠江凤鲚则较九龙江凤鲚更宽。值得注意的是,与多选择河口以及通海河流等作为栖息地的七丝鲚相比[24],凤鲚更多选择河口以及离岸较远的高盐度海水栖息[23]。由此可见,耳石上主凹槽的发达程度或许与其洄游履历的复杂程度有一定相关性。类似情况也可从种内不同地理群体间的比较中发现,珠江口较九龙江口更宽,地理条件更为复杂,是以倾向于河口及外海栖息的凤鲚群体内珠江口群体的耳石主凹槽较九龙江口群体更宽;而又由于珠江较九龙江河口更宽、流量更大,所以能为七丝鲚提供一个更为稳定的偏低盐度水体环境,因此与凤鲚不同群体的情况正好相反,即珠江口七丝鲚群体耳石主凹槽较九龙江口群体更窄。当然,耳石主凹槽是否与其生境履历的复杂程度有关尚待进一步证实。

    根据本研究的结果不难发现,珠江口和九龙江口2种鲚属鱼类种内不同群体间存在一定差异,判别分析结果显示判正率均达100%。相似的结果也可见于遗传学分析研究,周晓犊等[38]就长江凤鲚和珠江凤鲚的线粒体基因分析发现,两者间遗传距离较远,可能达到了种或亚种级差异水平;程起群等[39]曾就长江、闽江和珠江的凤鲚进行线粒体cyt b基因分析,发现三者间差异明显,甚至可能达亚种水平。由此可见,位于闽江更南端的九龙江口凤鲚与珠江口凤鲚群体很有可能在遗传上也发生了一定的分化,两者应属于不同的地理群体。相较于凤鲚的研究,我国七丝鲚的研究较少。在针对珠江口七丝鲚的洄游生态学研究中,笔者曾发现其生活习性更类似于刀鲚,在孵化和早期生活相当长的一段时间内仔稚鱼均需要在淡水生境(通海江河)中生活,而在随后的生活中也更多地选择靠近河口或者近岸的水域栖息[24]。因此,七丝鲚较凤鲚更易产生地理隔离,从而形成互相独立的地理群体。聚类分析结果也支持这种设想,2种鲚属鱼类间的形态差异大于种内形态差异,2种凤鲚群体间的差异要小于2种七丝鲚。

    本研究结果表明,利用地标点法能够有效地获取凤鲚和七丝鲚种间形态差异特征,未见有误判情况。2种鲚属鱼耳石形态上的差异主要表现在主凹槽,具体表现为前者较后者更宽;同时该方法对九龙江口和珠江口的种内不同地理群体也有很高的辨识效果(判正率均达100%),显示为两处水域同种鲚属鱼类应属于不同地理群体。综上所述,地标点法能够较为有效地揭示凤鲚和七丝鲚种间、种内耳石的形态差异,并可用于同种不同地理群体的识别。地标点法突破了其他形态学分析方法上对于耳石表面形态特征和轮廓特征较难综合分析的瓶颈,从新的角度为研究鲚属鱼类种间和种内群体差异提供了有效工具,并为今后在其他鱼类种群生态学研究上的应用提供了重要的基础资料和技术支持。在下一步的研究中,除了增大样本量、补充不同地理群体、增加更多的特征地标点以更全面地了解我国七丝鲚、凤鲚耳石形态特征外,今后拟将地标点法应用到更多经济、珍稀及名贵鱼类群体资源学的研究中,以期了解这些鱼类耳石形态在种间和种内群体间的特征,有效破解其资源群体关联性及种群演化方面更多的自然之谜。

    致谢:本研究九龙江口凤鲚和七丝鲚样品的收集得到了厦门大学黄邦钦教授和丁少雄教授的大力支持,谨此致谢!

  • 图  1   冷应激对黑鲷肝脏、腮、肌肉组织结构的影响 (10×40 倍)

    注:a. 肝脏,15 ℃ 对照组;b. 肝脏,10 ℃ 处理组;c. 肝脏,5 ℃ 处理组;d. 腮,15 ℃ 对照组;e. 腮,10 ℃ 处理组;f. 腮,5 ℃ 处理组;g. 肌肉,15 ℃ 对照组;h. 肌肉,10 ℃ 处理组;i. 肌肉,5 ℃ 处理组。

    Figure  1.   Effects of cold stress on tissue structure of liver, gill and muscle of A. schlegelii (10×40 times)

    Note: a. Liver, 15 ℃ control group; b. Liver, 10 ℃ treatment group; c. Liver, 5 ℃ treatment group; d. Gill, 15 ℃ control group; e. Gill, 10 ℃ treatment group; f. Gill, 10 ℃ treatment group; g. Muscle, 15 ℃ control group; h. Muscle, 10 ℃ treatment group; i. Muscle, 5 ℃treatment group.

    图  2   冷应激对黑鲷肝脏组织的谷草转氨酶、谷丙转氨酶、甘油三酯和总胆固醇的影响

    注:方柱上相同字母表示组间差异不显著 ( P>0.05),不同字母表示组间差异显著 (P<0.05);图3同此。

    Figure  2.   Effects of cold stress on AST, ALT, TG and T-CHO in liver tissue of A. schlegelii

    Note: The same letters above the column indicate no significant difference between groups (P>0.05), while different letters indicate significant difference between groups (P<0.05). The same case in Fig. 3.

    图  3   冷应激下黑鲷肝脏中apaf-1、baxbcl-2、caspase-1、caspase-3和diablo基因的 mRNA 相对表达量

    Figure  3.   mRNA relative expression changes of apaf-1, bax, bcl-2, caspase-1, caspase-3 and diablo genes in liver of A. schlegelii under cold stress

    表  1   引物信息

    Table  1   Primer information

    引物
    Primer
    引物序列 (5'—3')
    Primer sequence (5'–3')
    产物长度
    Length of product/bp
    退火温度
    Annealing temperature/℃
    β-actin-F CGACGGTCAGGTCATCAC 91
    β-actin-R GCCAGCAGACTCCATTCC
    apaf-1-F AGACTACGAAGCTGCACACGTCCT 135 59
    apaf-1-R ATCCCGTCCTGCCATCACGTACC
    bax-F AAGGCGCTGACCACCAACC 150 58
    bax-R GGCTACTGTCCTCCACCGAGA
    bcl-2-F ACCATCGTCACCTCCGACTCC 115 56
    bcl-2-R ACTTTGGGCGAGTTCTTTGTCGT
    caspase-1-F GAGACAGCCCGATCCACTCCCAC 150 58
    caspase-1-R AGCAGAGACCCTTTGACCGAGTGT
    caspase-3-F ATGGACTACCCCAGCCTCGGAAC 101 57
    caspase-3-R GCAGCATCAACATCCGTCCCGTT
    diablo-F CAATGCTGTCAACCTGTG 146 55
    diablo-R TCTTATCTGCGTCTGCTG
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  • [1]

    JI L Q, JIANG K Y, LIU M, et al. Low temperature stress on the hematological parameters and HSP gene expression in the turbot Scophthalmus maximus[J]. Chin J Oceanol Limnol, 2016, 34(3): 430-440. doi: 10.1007/s00343-016-4367-z

    [2] 刘丽丽, 朱华, 闫艳春, 等. 鱼类低温耐受机制与功能基因研究进展[J]. 生物技术通报, 2018, 34(8): 50-57.
    [3]

    BEN S R, TOMMY N, WILLIAM R D. The benefit of being still: energy savings during winter dormancy in fish come from inactivity and the cold, not from metabolic rate depression[J]. Proc Roy Soc B, 2018, 285(1886): 1-10.

    [4] 王晓煜, 胡春兰, 程鹏丽, 等. 低温驯化对斑马鱼ZF4细胞凋亡和ROS的影响[J]. 基因组学与应用生物学, 2020, 39(10): 4475-4480.
    [5]

    SUNG C H, DO H M, LEE M K, et al. Histopathological observation of liver in cultured black rock fish Sebastes schlegeli in low temperature season[J]. J Fish Pathol, 2011, 24(3): 225-236. doi: 10.7847/jfp.2011.24.3.225

    [6] 蔡润佳, 张静, 黄建盛, 等. 低温胁迫对军曹鱼幼鱼脂代谢相关生理生化的影响[J]. 广东海洋大学学报, 2021, 41(3): 123-130. doi: 10.3969/j.issn.1673-9159.2021.03.016
    [7] 邵彦翔, 陈超, 李炎璐, 等. 低温胁迫对云纹石斑鱼(♀)×鞍带石斑鱼(♂)杂交后代血清生化指标的影响[J]. 渔业科学进展, 2017, 38(2): 70-76. doi: 10.11758/yykxjz.20160103001
    [8] 施兆鸿, 谢明媚, 彭士明, 等. 温度胁迫对银鲳 (Pampus argenteus) 幼鱼消化酶活性及血清生化指标的影响[J]. 渔业科学进展, 2016, 37(5): 30-37.
    [9] 管敏, 张厚本, 王龙, 等. 急性低温胁迫对史氏鲟幼鱼抗氧化和免疫指标的影响[J]. 淡水渔业, 2018, 48(6): 17-22. doi: 10.3969/j.issn.1000-6907.2018.06.003
    [10] 谭连杰, 林黑着, 黄忠, 等. 当归多糖对卵形鲳鲹生长性能、抗氧化能力、血清免疫和血清生化指标的影响[J]. 南方水产科学, 2018, 14(4): 72-79. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2018.04.009
    [11] 李向. 小肽和维生素D3对大口黑鲈 (Micropterus salmoides) 生长、肝脏代谢和肠道微生物的影响[D]. 上海: 上海海洋大学, 2020: 21-34.
    [12] 李丹丹, 陈丕茂, 朱爱意, 等. 黑鲷幼鱼力竭运动后代谢酶活性的恢复水平[J]. 南方水产科学, 2018, 14(6): 59-65. doi: 10.12131/20180064
    [13] 陈旭, 王一福, 周胜杰, 等. 低温胁迫下甘草对尖吻鲈幼鱼血清和肝脏免疫酶及鳃Na+-K+-ATP酶活性的影响[J]. 中国渔业质量与标准, 2020, 10(5): 18-24. doi: 10.3969/j.issn.2095-1833.2020.05.004
    [14] 陈智. 低温胁迫对荷那龙罗非鱼血液生理生化指标的影响[D]. 湛江: 广东海洋大学, 2011: 10-32.
    [15] 郭双, 邢栋, 吕勃. 细胞凋亡及细胞程序性坏死和细胞焦亡的研究进展[J]. 中华实用诊断与治疗杂志, 2021, 35(3): 321-324.
    [16]

    ZHANG Y Y, CHEN X, CYRIL G, et al. Plasma membrane changes during programmed cell deaths[J]. Cell Res, 2018, 28(1): 9-21. doi: 10.1038/cr.2017.133

    [17] 杨静, 许明君, 王钇力, 等. 千金藤碱通过MAPK/ERK信号通路对鼻咽癌大鼠的防治作用及对SurvivinXIAPBcl-2表达的影响[J]. 西安交通大学学报(医学版), 2021, 42(4): 633-638.
    [18]

    JORDAN L M, GERMAIN G, JULIEN P, et al. Bcl-2 family of proteins in the control of mitochondrial calcium signalling: an old chap with new roles[J]. Int J Mol Sci, 2021, 22(7): 3730. doi: 10.3390/ijms22073730

    [19] 张彐宁, 高维娟, 周晓红, 等. 沉默Apaf-1基因对氧糖剥夺/复氧复糖PC12细胞线粒体凋亡通路的影响[J]. 中国免疫学杂志, 2021, 37(1): 21-25, 30. doi: 10.3969/j.issn.1000-484X.2021.01.003
    [20] 胡善明, 王亚楠, 许正茂, 等. Bcl-2家族分子在细胞凋亡中的作用研究进展[J]. 动物医学进展, 2021, 42(10): 85-89. doi: 10.3969/j.issn.1007-5038.2021.10.016
    [21]

    BRATTON S B, SALVESEN G S. Regulation of the Apaf-1-caspase-9 apoptosome[J]. J Cell Sci, 2010, 123(19): 3209-3214. doi: 10.1242/jcs.073643

    [22] 王建卫. XIA P、Apaf-1和Caspase-3在膀胱尿路上皮癌中的表达及临床意义[D]. 石家庄: 河北医科大学, 2019: 32-35.
    [23]

    ADRAIN C, CREAGH E M, MARTIN S J. Apoptosis-associated release of Smac/DIABLO from mitochondria requires active caspases and is blocked by Bcl-2[J]. EMBO J, 2001, 20(23): 6627-6636. doi: 10.1093/emboj/20.23.6627

    [24]

    LIN Z J, ZHANG Z Y, SOLBERG M F, et al. Comparative transcriptome analysis of mixed tissues of black porgy (Acanthopagrus schlegelii) with differing growth rates[J]. Aquac Res, 2021, 52(11): 5800-5813. doi: 10.1111/are.15455

    [25] 王裕玉, 徐跑, 张志伟, 等. 不同养殖模式对黑鲷生长、血清生化指标及抗氧化性能的影响[J]. 江苏农业科学, 2020, 48(23): 155-160.
    [26] 李涛, 吕国敏, 黄小林, 等. 温度和盐度骤变对黑鲷仔鱼存活率的影响[J]. 江苏农业科学, 2014, 42(4): 181-182. doi: 10.3969/j.issn.1002-1302.2014.04.069
    [27] 陈得仿, 王腾, 刘永, 等. 大亚湾黑鲷繁殖特征的生物学研究[J]. 南方水产科学, 2019, 15(5): 41-47. doi: 10.12131/20190051
    [28] 陈自强, 张志勇, 祝斐, 等. 急性低温对黑鲷抗氧化酶活性和热休克蛋白含量的影响[J]. 动物学杂志, 2020, 55(6): 784-792.
    [29]

    ZHANG Z Y, ZHANG K, CHEN S Y, et al. A draft genome of the Chinese black porgy, Acanthopagrus schlegelii[J]. GigaScience, 2018, 7(4): 1-7.

    [30] 张先炳, 胡亚萍, 杨威, 等. 水温对淡水温水性鱼类生命活动的影响[J]. 水生态学杂志, 2021, 42(4): 117-122.
    [31] 龙勇, 葛国栋, 李西西, 等. 鱼类低温应激反应的调控机制[J]. 水生生物学报, 2021, 45(6): 1405-1414.
    [32] 陆健, 张佳佳, 周国勤, 等. 急性高温胁迫对大口黑鲈“优鲈3号”肝脏凋亡相关酶活性和基因表达的影响[J]. 淡水渔业, 2021, 51(2): 81-86. doi: 10.3969/j.issn.1000-6907.2021.02.010
    [33] 区又君, 刘奇奇, 温久福, 等. 急性低温胁迫对四指马鲅幼鱼肝脏、肌肉以及鳃组织结构的影响[J]. 生态科学, 2018, 37(5): 53-59.
    [34] 余焱方, 刘鉴毅, 冯广朋, 等. 盐度骤变对金钱鱼幼鱼鳃线粒体丰富细胞形态结构的影响[J]. 南方水产科学, 2021, 17(2): 60-69. doi: 10.12131/20200214
    [35] 丁炜东, 曹丽萍, 曹哲明, 等. 氨氮胁迫对翘嘴鳜幼鱼鳃、消化道酶活力的影响[J]. 南方水产科学, 2020, 16(3): 31-37. doi: 10.12131/20190188
    [36]

    OSTROWSKI A D, WATANABE W O, MONTGOMERY F P, et al. Effects of salinity and temperature on the growth, survival, whole body osmolality, and expression of Na+/K+ ATPase mRNA in red porgy (Pagrus pagrus) larvae[J]. Aquaculture, 2011, 314(1): 193-201.

    [37] 胡玲红, 王映, 王化敏, 等. 不同温度胁迫对青鳉鳃凋亡的影响[J]. 大连海洋大学学报, 2021, 36(6): 929-936.
    [38] 宾石玉, 林勇, 曾兰, 等. 低温胁迫对埃及尼罗罗非鱼肝、脾和鳃细胞形态的影响[J]. 广西师范大学学报(自然科学版), 2015, 33(3): 123-128.
    [39] 张琦, 杨昭杰, 赵汝丽, 等. 多不饱和脂肪酸与深黄被孢霉低温适应性的关系(英文)[J]. 昆明理工大学学报(自然科学版), 2015, 40(1): 67-73.
    [40]

    MOURENTE G, DIAZ-SALVAGO E, BELL J G, et al. Increased activities of hepatic antioxidant defence enzymes in juvenile gilthead sea bream (Sparus aurata L. ) fed dietary oxidised oil: attenuation by dietary vitamin E[J]. Aquaculture, 2002, 214(1/2/3/4): 343-361.

    [41] 油九菊, 李伟业, 殷小龙, 等. 急性低温胁迫对条纹锯鮨血清生化指标的影响[J]. 安徽农业科学, 2019, 47(8): 109-113. doi: 10.3969/j.issn.0517-6611.2019.08.028
    [42] 刘波, 王美垚, 谢骏, 等. 低温应激对吉富罗非鱼血清生化指标及肝脏HSP70基因表达的影响[J]. 生态学报, 2011, 31(17): 4866-4873.
    [43] 郭晓丽, 黄智慧, 马爱军, 等. 热应激对大菱鲆心肌损伤及细胞凋亡的影响[J]. 水产学报, 2022, 46(6): 1074-1084.
    [44] 秦华平, 杨常春, 王强, 等. 深低温对全脑缺血大鼠海马Bax表达的影响及其与细胞凋亡的关系[J]. 中华神经医学杂志, 2017, 16(12): 1286-1289. doi: 10.3760/cma.j.issn.1671-8925.2017.12.019
    [45] 闫利霞, 黄晓, 张鑫, 等. miR-24对过氧化氢诱导的HLE-B3细胞凋亡的影响及其与线粒体Smac/Diablo-XIAP-caspase-9/3凋亡途径的关系[J]. 眼科新进展, 2021, 41(5): 417-421.
  • 期刊类型引用(4)

    1. 王永明,杨木牛,高小平,史晋绒,郭佳萍,谢碧文,李燕平. 2种副沙鳅属鱼类骨骼解剖学比较研究. 四川动物. 2025(01): 57-68 . 百度学术
    2. 庾楚霞,郭华阳,林漪,刘宝锁,刘波,朱腾飞,张建设,张殿昌. 尖翅燕鱼早期色素细胞发育与体色变化. 南方水产科学. 2025(01): 96-104 . 本站查看
    3. 朱金超,边力,陈四清,李凤辉,常青,吴丹,陈政强,徐荣静. 绿鳍马面鲀附肢骨骼的早期发育研究. 海洋科学. 2024(05): 22-32 . 百度学术
    4. 朱金超,边力,李凤辉,吴丹,陈莹,秦搏,杨立国,吴艳庆,英娜,陈四清. 绿鳍马面鲀中轴骨骼早期发育规律. 动物学杂志. 2024(04): 597-606 . 百度学术

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出版历程
  • 收稿日期:  2021-12-15
  • 修回日期:  2022-02-13
  • 录用日期:  2022-02-17
  • 网络出版日期:  2022-03-02
  • 刊出日期:  2022-10-04

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