Preliminary study on species composition of fish eggs of Meiji Reef Lagoon in South China Sea based on DNA barcoding
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摘要: 珊瑚礁是海洋鱼类的重要栖息地,具有产卵、育幼等重要的生态功能。该研究采用线粒体DNA的COI (Cytochrome c oxidase subunit I) 片段作为分子标记,鉴定了南海美济礁潟湖鱼卵,并分析了春、秋季的种类组成和季节变化特征。结果显示,美济礁鱼卵种类为37种,隶属于3目23科31属,其中33种鉴定到种,4种鉴定到属,主要为鲈形目 (种类占比91.89%,数量占比97.31%)。美济礁鱼卵生态类型主要为礁栖类群 (占比72.97%)。春季鱼卵密度为0.95粒·m–3,秋季为0.54粒·m–3。优势度大于0.001的优势鱼卵种类,春季为黑带鳞鳍梅鲷 (Pterocaesio tile)、犬牙锥齿鲷 (Pentapodus caninus)、黑斑绯鲤 (Upeneus tragula) 和青星九棘鲈 (Cephalopholis miniata) 4种;秋季为黄鳍金枪鱼 (Thunnus albacares) 和条纹眶棘鲈 (Scolopsis taenioptera) 2种。美济礁春秋季的鱼卵物种更替率高达94.59%。春、秋两季的平均分类差异指数为53.63、50.77,分类差异变异指数为111.45、31.03。结果表明,美济礁是多种珊瑚礁栖鱼类的产卵场,同时也是多种深海鱼类和大洋性洄游鱼类 (如黄鳍金枪鱼) 的产卵场;鱼卵群落结构具有明显的季节性变化,证明了珊瑚礁鱼类对特定生境的高度利用。Abstract: Coral reefs, which have important ecological functions such as spawning and rearing, are the key habitats of marine fish. In this study, COI (Cytochrome c oxidase subunit I), part of mitochondrial DNA, was used as a marker to identify the fish eggs in Meiji Reef, and the species composition and the characteristics of seasonal variation were analyzed. The study shows that there were 37 species of fish eggs in Meiji Reef, belonging to 3 orders, 23 families and 31 genera. Most species (33 species) were successfully identified to species level while 4 species were just identified to genera level. Fish eggs mainly belonged to Perciformes (91.89% of species, 97.31 % of total number). The main ecological type of fish eggs was reef-dwelling group (72.97%). The density of fish eggs was 0.95 ind.·m–3 in spring and 0.54 ind.·m–3 in autumn. The dominant egg species was defined as having a dominance degree greater than 0.001. The dominant roe species in spring were Pterocaesio tile, Pentapodus caninus, Upeneus tragula and Cephalopholis miniata. And the dominant roe species in autumn are Thunnus albacares and Scolopsis taenioptera. The species replacement rate of fish roe in Meiji Reef between spring and autumn was as high as 94.59%. The indices of average taxonomic distinctness of spring and autumn were 53.63 and 50.77, respectively, and the indices of variation in taxonomic distinctness were 111.45 and 31.03, respectively. The results indicate that Meiji Reef is the spawning ground for a variety of commercial fishes and deep-sea fish and oceanic migratory fish (like T. albacares). The community structure of fish eggs in Meiji reef has obvious seasonal variation, reflecting that coral reef fish has high utilization of specific habitats.
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Keywords:
- Ichthyoplankton /
- DNA barcoding /
- Species diversity /
- Coral reef
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弧菌广泛存在于养殖水体,是海水养殖动物的主要病原菌,弧菌病是目前为止对养殖鱼虾危害最大,造成损失最严重的细菌性疾病之一。弧菌病可以发生在养殖的各个时期,因此防治对虾弧菌病是养殖成败的关键因素。防治细菌性疾病最常用的方法是使用抗菌素,但频繁无节制的使用药物,导致耐药性菌株的产生并且造成环境的污染,因此,抗菌素的有效替代品的研究显得尤为迫切,应用生物及生态法防治疾病日益受到重视。大量的研究表明[1-7],乳酸菌能够调节机体肠道正常菌群,保持微生态平衡,提高食物消化率和生物价,增强机体的免疫功能,提高机体的抗病能力,产生抑菌活性代谢产物,如乳酸菌肽、细菌素、乳酸、过氧化氢、乙酸等,对许多革兰氏阳性菌李斯特氏菌、芽孢菌、梭菌等及革兰氏阴性菌大肠杆菌等有强烈的抑制作用,可抑制肠道内腐败菌的生长繁殖和腐败产物的产生,乳酸菌被作为饲料添加剂而广泛应用于禽畜养殖中,防治腹泻、下痢、肠炎等肠道功能紊乱的许多疾病。乳酸菌益生素作为鱼、虾饲料添加剂也受到广泛的研究,有提高养殖动物的免疫力,抵御病原菌的侵袭,提高养殖成活率的效果。体外拮抗实验是筛选益生菌的重要步骤,本实验通过乳酸菌体外对致病弧菌的拮抗作用研究,旨在筛选乳酸菌有益菌株,为进一步在养殖生产中应用益生素产品防治病害提供理论基础及水产养殖动物的病害防治提供一种生物防治方法。
1. 材料与方法
1.1 试验菌株
测试菌:乳酸杆菌L1是经点接种法初步筛选出的对弧菌有拮抗作用的菌株。
指示菌:溶藻弧菌T1是由本所鱼病室提供的从患病军曹鱼中分离,并经回归感染确认有致病性的菌株。鲨鱼弧菌T2也是从患病军曹鱼中分离。
1.2 培养基
乳酸菌培养基为改良的MRS培养基:蛋白胨10 g,酵母膏5 g,牛肉膏10 g,葡萄糖20 g,无水乙酸钠3 g,柠檬酸三铵2 g,K2HPO4 2 g,MgSO4 · 7H2O 0.2 g,MnSO4 · H2O 0.05 g,水1 000 mL,pH 6.8。
弧菌培养基为2216E培养基。
检测弧菌培养基为TCBS培养基。
1.3 测定方法
抑菌活性检测采用平板打孔抑菌圈测定法。
平板打孔抑菌圈测定法:制作2216E培养基,无菌操作倒平板,每个平板的培养基厚度为6 mm,取指示菌弧菌菌悬液0.1 mL,涂布于2216E培养基表面,选择一定的位置,在无菌条件下,用无菌打孔器打孔,孔径为10 mm,将乳酸杆菌发酵液注入孔内(不能溢出),于30℃培养24 h,检测抑菌圈直径的大小。以相同pH值的HCl水作对照。
2. 结果
2.1 乳酸杆菌及其代谢产物对弧菌的抑制作用
表 1为L1接种MRS培养液,经24 h培养后的发酵液及发酵液经5 000 rpm,15 min离心后取得的上清液,采用平板打孔法测定抑菌圈的大小。
表 1 L1菌发酵液及离心后上清液对指示菌T1、T2的抑菌圈大小Table 1 Size of zone plate inhibitory of fermentation liquid and supernatant liquid of L1 strain to indicator strains T1 and T2(mm) 指示菌
indicator strains发酵液(pH 3.5)
fermentation liquid上清液(pH 3.5)
supernatant liquid对照HCl水组(pH 3.5)
HCl diluted liquidT1 23 20 0 T2 18 16 0 从表 1试验可看出发酵液与上清液对指示菌T1、T2都有抑菌圈,而相同pH值的HCl水却没有,可见发酵液与上清液的抑菌效果并不是pH值低造成的。试验结果表明发酵液比上清液对弧菌的抑菌圈大,说明发酵液的抑菌活性强于上清液,乳酸杆菌及其代谢产物对弧菌有协同抑制作用。发酵液对弧菌T1、T2的抑菌圈大小不同,上清液也是如此,表明L1发酵液的代谢产物对不同种类弧菌的抑菌活性不同。
2.2 不同稀释倍数发酵液及离心后上清液的抑菌活性
L1接种MRS,30℃培养24 h,发酵液用无菌生理盐水释稀1、2、3倍,其稀释液对弧菌的抑菌能力见表 2。其发酵液经5 000 rpm,15 min离心,取得上清液,上清液用无菌生理盐水释稀1、2、3倍,其稀释液对弧菌的抑菌能力见表 3。
表 2 不同稀释倍数L1菌发酵液对指示菌T1、T2的抑菌圈大小Table 2 Size of zone plate inhibitory of diluted fermentation liquid of L1 strain to indictor strains T1 and T2(mm) 指示菌
indicator strains发酵液稀释倍数 times of dilution for fermentation liquid 0 1 2 3 T1 25 23 21.5 13.5 T2 23 21 19 无 表 3 不同稀释倍数L1菌发酵液对指示菌T1、T2的抑菌圈大小Table 3 Size of zone plate inhibitory of diluted supernatant liquid of L1 strain to indictor strains T1 and T2(mm) 指示菌
indicator strains上清液稀释倍数 times of dilution for supernatant liquid 0 1 2 3 T1 18 14.5 无 无 T2 15 无 无 无 从表 2、3可看出发酵液经3倍稀释对弧菌T1仍有抑制作用,上清液经1倍稀释后对弧菌T1的抑菌圈大小与发酵液3倍稀释液抑菌圈的大小相近。
2.3 不同培养时间发酵液的抑菌活性
L1接种MRS培养基,30℃培养,培养18 h、24 h、36 h、48 h、72 h、5 d的发酵液的抑菌圈大小见表 4。
表 4 不同培养时间的L1菌发酵液对指示菌T1、T2的抑菌圈大小Table 4 Size of zone plate inhibitory to indictor strains T1 and T2 of fermentation liquid of L1 strain under different time(mm) 指示菌
indicator strains不同培养时间的发酵液 fermentation liquid of different culture time 18 h 24 h 36 h 48 h 72 h 5 d T1 无 22.5 24 24 25 28 T2 无 20 22 23 24 25 从表 4可看出,在菌生长的对数期18 h时的发酵液对两种指示菌都无抑菌圈,随培养时间的延长,抑菌圈越来越大,生长衰退期(36 h)比稳定期(24 h)的抑菌圈大,5 d的陈培养液的抑菌圈最大。原因可能是随着培养时间的延长,乳酸杆菌的生长及代谢产物抑菌物质的积累提高了其杀菌作用;陈培养物和衰退期的发酵液的抑菌圈大于生长期及稳定期的抑菌圈,可能是一些抗菌活性物质在乳酸菌死亡后释放出来。
2.4 发酵液抑菌活性物质的耐热性试验
将MRS 24 h的发酵液,于60、80℃恒温水浴中保温15 min,及沸水浴中保温5、10、15 min,与原发酵液一起作抑菌活性试验,试验结果见表 5。
表 5 不同温度及时间处理的L菌发酵液对指示菌T1、T2的抑菌圈大小Table 5 Size of zone plate inhibitory to indictor strains T1 and T2 of fermentation liquid of L1 strain treated under different temperature and time(mm) 指示菌
indictor strains60℃ 80℃ 100℃ 未处理组
control group15 min 15 min 5 min 10 min 15 min T1 23 23 23 23 23 23 T2 22 22 22 22 22 22 从表 5的试验结果可见,发酵液经60、80℃恒温水浴处理15 min,及沸水浴中处理5、10、15 min,其抑菌圈大小与未作温度处理的发酵液的抑菌圈大小无差异,可见代谢抑菌物质具有很好的耐热性。对虾饲料制作过程有高温制粒这一步骤,瞬间温度可达100℃,益生菌代谢抑菌物质具有良好的耐热性,可避免对虾饲料制作过程瞬间高温的破坏,而保持其活性。
3. 讨论
体外抑菌试验是筛选益生菌的手段,通过L1菌株体外对弧菌抑制试验,结果表明L1菌株对致病弧菌T1、T2有较强的抑制作用,而且生长速度快,有望成为微生态制剂的候选菌种,但能否成为益生菌,还需做一系列的的工作如进一步确定其对宿主有否致病作用,对被选菌株进行致病性评估;对宿主潜在效果的评价等。
黄沧海等报导乳酸杆菌的代谢产物对不同血清型的大肠杆菌的抑制作用存在一定的差别,本试验的结果也表明,乳酸杆菌L1对不同的弧菌有不同的抑菌活性。水产养殖动物不同的疾病因病原不同,因此,实际在应用益生素制剂时,如果没有了解清楚益生菌的适用对象和范围就可能就会有不同的效果。Gatesoupe(1999)[8]通过每天添加乳杆菌在大菱鲆幼体活体食物的轮虫的培养基中,大大提高了鱼的成活率,当病原性弧菌侵袭幼体时,添加的乳杆菌能够大大降低幼体在9 d前的死亡率。因此认为乳杆菌可以防御病原菌-弧菌入侵大比目鱼的幼体。而Gildberg等(1997)[9-10]用添加了产乳酸细菌的饲料喂养大西洋鳕,将它们与经腹膜内感染了气单胞菌(Aeromonas salmonicida)的鱼苗一起养殖,在以后4周时间内记录鱼的死亡率,结果表明产乳酸细菌作为鱼苗饲料的添加成分可以促进肠微生物的定植,但未出现防止气单胞菌感染的现象,与预想相反,在饲料中添加了产乳酸细菌的鱼苗的死亡率最高。
本试验的结果表明乳酸杆菌与代谢产物有协同抑菌作用。因此在评价乳酸菌的抑菌效果时,以乳酸杆菌与代谢产物的协同抑菌效果作为衡量指标应当是更科学合理。在使用乳酸菌益生素产品时,不应当只是利用其菌体,菌体及其代谢产物能一起使用效果可能会更好。
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图 2 2019年美济礁春、秋季鱼卵种类组成和相对丰度的比较
因C5站点没有获得有效序列,只选取9个站点的物种信息进行分析。以站点 (列) 为样本进行标准化,比较各物种相对丰度差异,以0为基准,4为相对丰度最大值。
Figure 2. Comparison of species composition and relative abundance of fish eggs collected from Meiji Reef between spring and autumn in 2019
Since there was no valid sequence in C5 site, only nine sites were selected for species information analysis. The data of each station (column) was used as one sample for standardization, and the relative abundance of each species was compared, with 0 as a benchmark and 4 as the maximum.
表 1 各站点序列数、鱼卵种数及其占比
Table 1 Number of sequences, kinds of species and proportion in each site
季节
Season采样站点
Sampling station样本
Sample/粒序列
Sequence/条物种数
Number of species百分比
Percentage/%密度
Density/(粒·m–3)春 Spring C1 62 34 4 10.81 0.95 C2 60 13 6 16.22 C3 43 24 8 21.62 C4 18 1 1 2.70 C5 36 0 — — 秋 Autumn Q1 5 1 1 2.70 0.54 Q2 38 21 10 27.03 Q3 12 10 4 10.81 Q4 31 23 8 21.62 Q1 40 22 10 27.03 表 2 2019年美济礁春、秋季鱼卵种类组成
Table 2 Species composition of fish eggs collected from Meiji Reef in spring and autumn, 2019
目
Order科
Family属
Genus种
Species生态
类型
Ecotype春季 Spring 秋季 Autumn 丰度
Abundance/
粒百分比
Percentage/
%优势度
Dominance丰度
Abundance/
粒百分比
Percentage/
%优势度
Dominance鲈形目
Perciformes鹦嘴鱼科
Scaridae绚鹦嘴鱼属
Calotomus凹尾绚鹦嘴鱼
C. spinidensa 1 1.41 0.000 0 0 0.00 0.000 0 银鲈科
Gerridae银鲈属
Gerres奥奈钻嘴鱼
G. oyenaa 0 0.00 0.000 0 1 1.30 0.000 0 半带银鲈
G. subfasciatusa 2 2.82 0.000 1 0 0.00 0.000 0 鮨科
Serranidae九棘鲈属
Cephalopholis青星九棘鲈
C. miniataa 7 9.86 0.001 4 3 3.90 0.000 3 豹纹九棘鲈
C. leopardusa 1 1.41 0.000 0 0 0.00 0.000 0 鲭科
Scombridae鲣属
Katsuwonus鲣
K. pelamisb 0 0.00 0.000 0 3 3.90 0.000 3 金枪鱼属
Thunnus黄鳍金枪鱼
T. albacaresb 0 0.00 0.000 0 21 27.27 0.012 8 鰕虎鱼科
Gobiidae钝鰕虎鱼属
Amblygobius钝鰕虎鱼属未定种1
Amblygobius sp.1a 0 0.00 0.000 0 1 1.30 0.000 0 须鲷科
Mullidae副绯鲤属
Arupeneus条斑副绯鲤
P. barberinusa 0 0.00 0.000 0 1 1.30 0.000 0 多带副绯鲤
P. multifasciatusa 0 0.00 0.000 0 1 1.30 0.000 0 绯鲤属
Upeneus多鳞绯鲤
U. taeniopterusa 3 4.23 0.000 3 0 0.00 0.000 0 黑斑绯鲤
U. tragulaa 9 12.68 0.002 3 4 5.19 0.000 5 笛鲷科
Lutjanidae鳞鳍梅鲷属
Pterocaesio黑带鳞鳍梅鲷
P. tilea 8 11.27 0.001 9 0 0.00 0.000 0 雀鲷科 Pomacentridae 雀鲷属
Pomacentrus孔雀雀鲷
P. pavoa 0 0.00 0.000 0 1 1.30 0.000 0 新雀鲷属
Neopomacentrus黄尾新雀鲷
N. azysrona 0 0.00 0.000 0 4 5.19 0.000 5 豆娘鱼属
Abudefduf梭地豆娘鱼
A. sordidusa 0 0.00 0.000 0 1 1.30 0.000 0 鲯鳅科
Coryphaenidae鲯鳅属
Coryphaena棘鲯鳅
C. equiselisb 0 0.00 0.000 0 2 2.60 0.000 1 大眼鲷科
Priacanthidae大眼鲷属
Priacanthus金目大眼鲷
P. hamrura 0 0.00 0.000 0 1 1.30 0.000 0 金线鱼科
Nemipteridae眶棘鲈属
Scolopsis眶棘鲈属未定种1
Scolopsis sp.1a 1 1.41 0.000 0 0 0.00 0.000 0 眶棘鲈属未定种2
Scolopsis sp.2a 1 1.41 0.000 0 0 0.00 0.000 0 条纹眶棘鲈
S. taeniopteraa 0 0.00 0.000 0 12 15.58 0.004 2 锥齿鲷属
Pentapodus犬牙锥齿鲷
P. caninusa 33 46.48 0.031 5 0 0.00 0.000 0 镰鱼科
Zanclidae镰鱼属
Zanclus镰鱼
Z. cornutusa 2 2.82 0.000 1 0 0.00 0.000 0 天竺鲷科
Apogonidae巨牙天竺鲷属
Cheilodipterus六线巨齿天竺鲷
C. quinquelineatusa 0 0.00 0.000 0 5 6.49 0.000 7 头齿天竺鲷属
Pristicon玫鳍头齿天竺鲷
P. rhodopterusa 0 0.00 0.000 0 1 1.30 0.000 0 叉齿科
Chiasmodontidae蛇牙龙䲢属
Kali诺氏蛇牙龙䲢
K. kerbertic 0 0.00 0.000 0 1 1.30 0.000 0 线棘细齿䲢属
Dysalotus阿氏线棘细齿䲢
D. alcockic 0 0.00 0.000 0 1 1.30 0.000 0 乌鲂科
Bramidae乌鲂属
Brama日本乌鲂
B. japonicab 0 0.00 0.000 0 3 3.90 0.000 3 圆鲳科
Nomeidae方头鲳属
Cubiceps少鳍方头鲳
C. pauciradiatusb 0 0.00 0.000 0 1 1.30 0.000 0 蛇鲭科
Gempylidae蛇鲭属
Gempylus蛇鲭
G. serpensb 0 0.00 0.000 0 2 2.60 0.000 1 隆头鱼科
Labridae钝头鱼属
Cymolutes环状钝头鱼
C. torquatusa 0 0.00 0.000 0 1 1.30 0.000 0 尖唇鱼属
Oxycheilinus西里伯斯尖唇鱼
O. celebicusa 0 0.00 0.000 0 3 3.90 0.000 3 鲹科
Carangidae圆鲹属
Decapterus颌圆鲹
D. macarellusa 0 0.00 0.000 0 1 1.30 0.000 0 白鲳科
Ephippidae燕鱼属
Platax圆翅燕鱼
P. pinnatusa 0 0.00 0.000 0 1 1.30 0.000 0 仙女鱼目
Aulopiformes崖蜥鱼科
Notosudidae弱蜥鱼属
Scopelosaurus弱蜥鱼属未定种1
Scopelosaurus sp.1c 0 0.00 0.000 0 1 1.30 0.000 0 合齿鱼科
Lizardfishes狗母鱼属
Synodus杂斑狗母鱼
S. variegatusa 2 2.82 0.000 1 0 0.00 0.000 0 银汉鱼目
Atheriniformes银汉鱼科
Atherinidae下银汉鱼属
Hypoatherina巴氏下银汉鱼
H. barnesib 1 1.41 0.000 0 0 0.00 0.000 0 注:a. 礁栖鱼类;b. 大洋性中上层鱼类;c. 深海鱼类;本研究中优势度≥0.001为优势鱼卵种类。 Note: a. Reef-dwelling fish; b. Oceanic pelagic fish; c. Deep-sea fish. In this study, Y≥0.001 indicates the dominant spawn species. 表 3 相似生境的鱼卵平均分类差异指数 (Δ+) 及分类差异变异指数 (Λ+)
Table 3 Average taxonomic distinctness (Δ+) and variation in taxonomic distinctness (Λ+) in similar economical systems
调查地
Survey area样本
Sample调查时间
Survey time生境类型
Habitat type纬度
Latitude平均分类差异指数
Δ+分类差异变异指数
Λ+数据来源
Data source美济礁潟湖
Meiji Reef鱼卵 春季 热带珊瑚礁 9°52'N—9°56'N 53.63 111.45 本实验 美济礁潟湖
Meiji Reef鱼卵 秋季 热带珊瑚礁 9°52'N—9°56′N 50.77 31.03 本实验 美济礁潟湖
Meiji Reef成鱼 1998—2018年 热带珊瑚礁 9°52'N—9°57'N 56.10 148.50 张俊等[31] 永暑礁潟湖
Fiery Cross Reef鱼卵 2016年春季 热带珊瑚礁 9°30'N—9°40'N 46.58 73.78 吴娜等[15] -
[1] 卞晓东, 张秀梅, 肖永双, 等. 线粒体DNA序列在沙氏下鱵鱼鱼卵鉴别上的应用[J]. 中国海洋大学学报 (自然科学版), 2007, 37(S1): 111-116. [2] CARVALHO D C, PALHARES R M, DRUMMOND M G, et al. DNA barcoding identification of commercialized seafood in South Brazil: a governmental regulatory forensic program[J]. Food Control, 2015, 50: 784-788. doi: 10.1016/j.foodcont.2014.10.025
[3] CHEN I S, SHAO K T, HSU S L, et al. DNA barcoding of coastal larval fish communities of Dongsha Island, South China Sea revealed by mitochondrial CO I sequences[J]. J Mar Sci Technol, 2013, 21: 252-257.
[4] 焦燕, 陈大刚. 中国海洋鱼类种类多样性的研究[J]. 齐鲁渔业, 1997(2): 18-20. [5] 万瑞景, 张仁斋. 中国近海及其邻近海域鱼卵和仔稚鱼[M]. 上海: 上海科学技术出版社, 2016: 1-4. [6] 邵广昭, 杨瑞森, 陈康青, 等. 台湾海域鱼卵图鉴[M]. 台北: 博煜专业文书处理中心, 2001: 1-79. [7] HEBERT P D N, CYWINSKA A, BALL S L, et al. Biological identifications through DNA barcodes[J]. Proc R Soc B, 2003, 270(1512): 313-321. doi: 10.1098/rspb.2002.2218
[8] 刘守海, 程祥圣, 何彦龙, 等. DNA条形码技术在鱼类浮游生物鉴定中的应用及研究展望[J]. 海洋开发与管理, 2018, 35(7): 56-62. doi: 10.3969/j.issn.1005-9857.2018.07.010 [9] ARDURA A, MOROTE E, KOCHZIUS M, et al. Diversity of planktonic fish larvae along a latitudinal gradient in the Eastern Atlantic Ocean estimated through DNA barcodes[J]. Peer J, 2016, 4: e2438. doi: 10.7717/peerj.2438
[10] 王利华, 罗相忠, 王丹, 等. 基于CO I和Cytb DNA条形码在鲌属鱼类物种鉴定中的应用[J]. 淡水渔业, 2019, 49(4): 22-28. doi: 10.3969/j.issn.1000-6907.2019.04.004 [11] 陈定标. 浙江沿海鱼类DNA条形码及其在鱼卵仔鱼鉴定中的应用[D]. 舟山: 浙江海洋大学, 2017: 45-47. [12] 卞晓东, 张秀梅, 高天翔, 等. 2007年春、夏季黄河口海域鱼卵、仔稚鱼种类组成与数量分布[J]. 中国水产科学, 2010, 17(4): 815-827. [13] 周美玉, 陈骁, 杨圣云. 采用DNA条形码技术对厦门海域鱼卵、仔稚鱼种类的鉴定[J]. 海洋环境科学, 2015, 34(1): 120-125, 135. [14] HOU G, WANG J R, CHEN Z Z, et al. Molecular and morphological identification and seasonal distribution of eggs of four decapterus fish species in the northern South China Sea: a key to conservation of spawning ground[J]. Front Mar Sci, 2020, 7: 970.
[15] 吴娜, 张楠, 曹明, 等. 基于DNA条形码技术的永暑礁潟湖鱼卵鉴定研究[J]. 淡水渔业, 2018, 48(2): 51-57. doi: 10.3969/j.issn.1000-6907.2018.02.008 [16] SUN R X, YANG X, LI Q X, et al. Polycyclic aromatic hydrocarbons in marine organisms from Mischief Reef in the South China Sea: implications for sources and human exposure[J]. Mar Pollut Bull, 2019, 149: 110623.
[17] 陈明强, 陈旭, 李有宁, 等. 美济礁合浦珠母贝吊笼养殖试验[J]. 水产科学, 2018, 37(3): 379-383. [18] 王烁, 肖凤城. 论低潮高地的陆地属性[J]. 边界与海洋研究, 2019, 4(2): 24-33. [19] 李亚军, 王先明, 程贤松, 等. 美济礁近岸海域夏季浮游植物群落结构特征及其与环境因子的关系[J]. 热带作物学报, 2020, 41(3): 615-621. doi: 10.3969/j.issn.1000-2561.2020.03.027 [20] WARD R D, ZEMLAK T S, INNES B H, et al. DNA barcoding Australia's fish species[J]. Philos Trans R Soc B, 2005, 360(1462): 1847-1857. doi: 10.1098/rstb.2005.1716
[21] TAMURA, KOICHIRO P, DANIEL P, et al. MEGA5: molecular evolutionary genetics analysis using maximum likelihood, evolutionary distance, and maximum parsimony methods[J]. Mol Biol Evol, 2011, 28: 2731-2739. doi: 10.1093/molbev/msr121
[22] ROZAS, JULIO F M, ALBERT S D, et al. DnaSP 6: DNA sequence polymorphism analysis of large datasets[J]. Mol Biol Evol, 2017, 34(12): 3299-3302. doi: 10.1093/molbev/msx248
[23] KO H L, WANG Y T, CHIU T S, et al. Evaluating the accuracy of morphological identification of larval fishes by applying DNA Barcoding[J]. PLoS One, 2013, 8(1): e53451. doi: 10.1371/journal.pone.0053451
[24] 陈真然. 西沙、中沙群岛海域的浮性鱼卵和仔稚鱼[J]. 水产科技情报, 1979(4): 11-13. [25] 肖瑜璋, 王蓉, 郑琰晶, 等. 珠江口鱼类浮游生物种类组成与数量分布[J]. 热带海洋学报, 2013, 32(6): 80-87. doi: 10.3969/j.issn.1009-5470.2013.06.012 [26] ALARKE K R, WARWICK R M. A further biodiversity index applicable to species lists: variation in taxonomic distinctness[J]. Mar Ecol Prog Ser, 2001, 216: 265-278. doi: 10.3354/meps216265
[27] MOUILLOT D, LAUNE J, TOMASINI J A, et al. Assessment of coastal lagoon quality with taxonomic diversity indices of fish, zoobenthos and acrophyte communities[J]. Hydrobiologia, 2005, 550(1): 121-130. doi: 10.1007/s10750-005-4368-y
[28] 徐宾铎, 金显仕, 梁振林. 黄海鱼类群落分类学多样性的研究[J]. 中国海洋大学学报(自然科学版), 2005, 35(4): 629-634. [29] 李媛洁, 张俊, 陈作志, 等. 南沙群岛渚碧礁鱼类分类多样性研究[J]. 南方水产科学, 2020, 16(1): 36-41. doi: 10.12131/20190159 [30] 李媛洁, 陈作志, 张俊, 等. 西沙群岛七连屿礁栖鱼类物种和分类多样性[J]. 中国水产科学, 2020, 27(7): 815-823. [31] 张俊. 南海典型珊瑚礁鱼类组成及生物学特征长期演变趋势[D]. 广州: 中国科学院南海海洋研究所, 2020: 1-173. [32] 樊伟, 程炎宏, 沈新强. 全球环境变化与人类活动对渔业资源的影响[J]. 中国水产科学, 2001, 8(4): 91-94. doi: 10.3321/j.issn:1005-8737.2001.04.021 [33] COLLETTE B B, NAUEN C E. An annotated and illustrated catalogue of tunas, mackerels, bonitos, and related species known to date[R]. FAO Fish Synop, 1983, 125(2): 137.
[34] 王修国. 东太平洋大眼金枪鱼、黄鳍金枪鱼生殖特征研究[D]. 上海: 上海海洋大学, 2010: 15-20. [35] 林紫云, 余克服, 施祺, 等. 三沙市美济礁滨珊瑚记录的近百年海面温度变化[J]. 热带地理, 2016, 36(1): 27-33. [36] 张仁斋. 三种金枪鱼类 (鲣、黄鳍金枪鱼、扁舵鲣) 的仔、稚鱼在南海的分布和产卵期[J]. 海洋学报 (中文版), 1983, 5(3): 368-375. [37] ZHANG J, ZHANG K, CEHN Z Z, et al. Hydroacoustic studies on Katsuwonus pelamis and juvenile Thunnus albacares associated with light fish-aggregating devices in the South China Sea[J]. Fish Res, 2021, 233: 205-213.
[38] 李炎璐, 陈超, 于宏, 等. 中国南海黄鳍金枪鱼 (Thunnus albacares) 幼鱼形态特征及其与体重的关系[J]. 渔业科学进展, 2016, 37(1): 8-14. doi: 10.11758/yykxjz.2014121203 [39] 王九江, 刘永, 肖雅元, 等. 大亚湾鱼卵、仔稚鱼种群特征与环境因子的相关关系[J]. 中国水产科学, 2019, 26(1): 14-25. [40] IASARI S, PEARMAN J K, CASAS L, et al. Exploring the larval fish community of the central Red Sea with an integrated morphological and molecular approach[J]. PLoS One, 2017, 12(8): e0182503. doi: 10.1371/journal.pone.0182503
[41] ZHAO M X, YU K F, SHI Q, et al. Coral communities of the remote atoll reefs in the Nansha Islands, southern South China Sea[J]. Environ Monit Assess, 2013, 185(9): 7381-7392. doi: 10.1007/s10661-013-3107-5
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期刊类型引用(1)
1. 王婷,贾磊,谷德贤,马超,于燕光,陈春秀. 早期发育阶段日本蟳表型性状对体质量的影响分析. 天津农业科学. 2024(12): 66-74 . 百度学术
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