渔用氧化剂对水源水和池塘水中磺胺类抗性基因sul1的去除作用

赵晓雨, 苏浩昌, 徐煜, 徐武杰, 胡晓娟, 文国樑, 曹煜成, 余招龙

赵晓雨, 苏浩昌, 徐煜, 徐武杰, 胡晓娟, 文国樑, 曹煜成, 余招龙. 渔用氧化剂对水源水和池塘水中磺胺类抗性基因sul1的去除作用[J]. 南方水产科学, 2021, 17(3): 46-53. DOI: 10.12131/20200231
引用本文: 赵晓雨, 苏浩昌, 徐煜, 徐武杰, 胡晓娟, 文国樑, 曹煜成, 余招龙. 渔用氧化剂对水源水和池塘水中磺胺类抗性基因sul1的去除作用[J]. 南方水产科学, 2021, 17(3): 46-53. DOI: 10.12131/20200231
ZHAO Xiaoyu, SU Haochang, XU Yu, XU Wujie, HU Xiaojuan, WEN Guoliang, CAO Yucheng, YU Zhaolong. Removal of sulphonamide resistance sul1 gene in water source and pond water by fishery oxidants in aquaculture[J]. South China Fisheries Science, 2021, 17(3): 46-53. DOI: 10.12131/20200231
Citation: ZHAO Xiaoyu, SU Haochang, XU Yu, XU Wujie, HU Xiaojuan, WEN Guoliang, CAO Yucheng, YU Zhaolong. Removal of sulphonamide resistance sul1 gene in water source and pond water by fishery oxidants in aquaculture[J]. South China Fisheries Science, 2021, 17(3): 46-53. DOI: 10.12131/20200231

渔用氧化剂对水源水和池塘水中磺胺类抗性基因sul1的去除作用

基金项目: 国家重点研发计划项目 (2019YFD0900402);中国水产科学研究院基本科研业务费专项资金 (2020TD54);财政部和农业农村部国家现代农业产业技术体系资助 (CARS-48);广东省现代农业产业技术体系创新团队建设专项资金 (2019KJ149)
详细信息
    作者简介:

    赵晓雨 (1996—),男,硕士研究生,研究方向为养殖环境安全。E-mail: 13576943750@163.com

    通讯作者:

    曹煜成 (1979—),男,博士,副研究员,从事水产健康养殖和养殖生态环境调控研究。E-mail: cyc_715@163.com

  • 中图分类号: S 949

Removal of sulphonamide resistance sul1 gene in water source and pond water by fishery oxidants in aquaculture

  • 摘要: 为探讨利用渔用氧化剂去除养殖水体环境中的抗生素抗性基因 (Antibiotic resistant genes, ARGs) 并控制其传播的可行性,该研究以磺胺类抗性基因sul1作为目标抗性基因,选用次氯酸钠 (NaClO)、二溴海因 (C5H6Br2N2O2) 和高锰酸钾 (KMnO4) 3种养殖中常用的渔用氧化剂,运用实时荧光定量PCR技术,分析目标渔用氧化剂对水源水和池塘水体中ARGs的去除效果。结果显示,测试的水源水和池塘水体中的sul1浓度均处于较高水平,分别达到了105和106 拷贝·mL−1,而且微生物的细胞内sul1是其主要存在形式;其次,NaClO对各实验组中的sul1均呈现较强的去除效果,C5H6Br2N2O2仅对水源水中细胞内和细胞外的sul1具有较强的去除作用,KMnO4仅对不同水体中的细胞外sul1具有较强的去除作用。结果表明,3种目标渔用氧化剂中,NaClO对水源水和池塘水体中ARGs的去除效果最好,科学应用NaClO有利于去除水产养殖水环境中的ARGs,进而防控其在养殖过程中的传播。
    Abstract: To explore the feasibility of using fishery oxidants to eliminate antibiotic resistant genes (ARGs) in aquaculture water and to control their spread, we studied the effects on ARG removal of three commonly used fishery oxidants (Sodium hypochlorite, dibromohydantoin and potassium permanganate) in water source and pond water by real-time fluorescent quantitative PCR. Results show that the concentration of sul1 gene was high in the water source and pond water (105 and 106 copies·mL−1, respectively), and the intracellular sul1 gene was the predominant form. Additionally, sodium hypochlorite had a strong effect on sul1 gene removal among all the experimental groups, and dibromohydantoin only showed a strong removal effect on sul1 gene in the water source. Potassium permanganate only showed a strong effect on the removal of extracellular sul1 gene in both water source and pond water. The results indicate that sodium hypochlorite has the best effect on ARG removal in both water source and pond water for these three common used fishery oxidants. Scientific application of sodium hypochlorite is beneficial to ARG removal and prevention in aquaticulture water.
  • 杂交是指遗传组成不同的个体或群体间的交配,包括种内杂交和种间杂交[1-2]。杂交是鱼类育种中的常用方法之一,旨在获得成活率高、生长率快、抗病性强等优良养殖性状[3-5]。回交属于杂交方式的一种,通过轮回亲本的轮回效应,使得某些性状在杂交后代中得以加强,如生长快[6]、耐粗饲[7]、起捕率[8]等特性。而体型特征在鱼类回交中也被广泛关注,如闫学春等[9]利用传统测量方法表明回交鲫{[鲤 (Cyprinus carpio haematopterus)♀×鲫 (Carassius auratus gibelio)♂]×鲫♂}的体型特征偏向于鲫,而回交鲤[(鲤♀×鲫♂) ×鲤♂]更偏向于鲤;[白鲫 (Carassius cuvieri)♀×红鲫 (C. auratus red var.)♂]杂交F1♀与白鲫♂的回交子代具有与白鲫相似的较小头部和较高背的体型[10]。体斑特征在杂交子一代中也有所研究,如红妃七彩神仙鱼 (Symphysodon aequifasciatus Ruby red)♀与万宝路 七彩神仙鱼(S. aequifasciatus Marlboro)♂杂交F1表现出了亲本所没有的黑纱体斑和不明显的黑色纵条纹体斑[11];在石斑鱼中,如斜带石斑鱼 (Epinephelus coioides)♀×鞍带石斑鱼 (E. lanceolatus)♂杂交子代青龙斑的斜带体斑清晰连贯,棕点石斑鱼 (E. fuscoguttatus)♀×鞍带石斑鱼♂杂交子代虎龙斑出现了不同于亲本的大型环状体斑[12]

    鳜 (Siniperca chuatsi) 和斑鳜 (S. scherzeri) 是我国鳜鱼养殖的主要种类,鳜生长速度快,但易发生病害;斑鳜肉质鲜美、病害少,但生长速度慢[13-14]。目前,已采用杂交方式获得了新品种“秋浦杂交斑鳜” (斑鳜♀×鳜♂) 和“长珠杂交鳜” (鳜♀×斑鳜♂)[15-16]。鉴于杂交在鳜育种中取得了较明显的进展,在杂交鳜 (斑鳜♀×鳜♂) 基础上,继续开展了斑鳜 (♀)×杂交鳜 (♂) 回交试验。前期研究结果表明,该回交子代早期 (45日龄) 形态上偏向斑鳜,生长、日均摄食量和饵料系数偏杂交鳜[17]

    体型和体斑是鳜鱼杂交育种的重要性状[18]。杂交鳜生长性能明显优于斑鳜,但体型、体斑均介于斑鳜与鳜之间[19]。鱼类可量性状和框架分析能精确反映鱼体体型差异[20],主成分分析和判别分析是体型差异分析的主要方法[21-22]。本文利用多重比较和杂种指数比较了回交子代与亲本子代的体型特征,利用主成分分析和判别分析对回交子代与亲本子代进行主要形态学区分,并对回交子代体斑进行了初步统计分析,旨在为鳜鱼杂交育种与杂交后代鉴定提供基础资料。

    实验材料为鳜鱼回交子代、斑鳜和杂交鳜,均取自安徽省池州市秋浦特种水产开发有限公司。“秋浦杂交斑鳜” (以下简称“杂交鳜”) 是由斑鳜♀×鳜♂杂交而得,回交子代由斑鳜♀×杂交鳜♂回交而得。3个群体均为同年8月龄鱼,平均体质量分别为回交子代166.75 g、斑鳜121.90 g、杂交鳜426.89 g,样本数量分别为回交子代92尾、斑鳜33尾、杂交鳜37尾。

    可数性状有背鳍条、胸鳍条、腹鳍条、臀鳍条。

    可量性状[23]有头部隆角 (头后背前与鱼体长轴间夹角)、全长、体长、体高、体宽、头长、头高、吻长、眼径、尾柄长、尾柄高。使用游标卡尺测量,精确度为0.01 mm。

    框架结构性状[24]包括A (1-2)、B (1-11)、C (2-3)、D (2-10)、E (2-11)、F (3-4)、G (3-9)、H (3-10)、I (3-11)、J (4-5)、K (4-8)、L (4-9)、M (4-10)、N (5-6)、O (5-7)、P (5-8)、Q (5-9)、R (6-7)、S (6-8)、T (7-8)、U (8-9)、V (9-10)、W (10-11,图1)。使用游标卡尺测量,精确度为0.01 mm。

    图  1  鳜鱼框架结构性状示意图
    1. 吻前端;2. 隅骨后端;3. 腹鳍起点;4. 臀鳍起点;5. 臀鳍末端;6. 尾鳍腹部起点;7. 尾鳍背部起点;8. 背鳍末端;9. 背鳍棘末端;10. 背鳍起点;11. 后背部末端
    Figure  1.  Diagram of frame structure of mandarin fish
    1. Anterior extremity of snout; 2. Posterior part of angulare; 3. Start of ventral fin; 4. Start of anal fin; 5. End of anal fin; 6. Abdomen start of caudal fin; 7. Back start of caudal fin; 8. End of dorsal fin; 9. End of spinous dorsal; 10. Start of dorsal fin; 11. End of back

    体斑观察为观察回交子代背部鞍状斑和体侧斑纹形状,统计不同体斑组合。

    除头部隆角外,将可量性状转化为比例性状 (体高/体长、头高/头长、吻长/头长、眼径/头长、体宽/体长、头长/体长、尾柄长/体长、尾柄高/体高),框架结构性状除以体长进行校正[25]。使用IBM SPSS Satastics 24.0软件进行数据处理分析。

    利用多重比较分析后得到的差异性状,按照如下公式计算杂种指数,再计算所有性状的平均杂种指数HI (Hybrid index)[26]

    HI=100×(HiMi1)/(Mi2Mi1)

    式中Hi为杂交种平均值;Mi1为母本平均值;Mi2为父本平均值,45<HI<55属中间性状,HI<45为偏母本性状,HI>55为偏父本性状,HI>100或HI<0为超亲偏离性状。

    通过建立相关系数矩阵,获得主成分的特征值和贡献率,根据因子得分,绘制主成分散点图;通过筛选出的形态性状,拟合出3个群体的典型判别函数和分类判别函数[27]

    对3个群体的4项可数性状、9项常规可量比例性状和23项框架比例性状进行单因素方差分析,得到群体间的差异结果。结果显示:1) 可数性状。回交子代鳍条数目与斑鳜、杂交鳜间无显著差异 (表1)。2) 常规可量性状。除眼径/头长外,回交子代与斑鳜、杂交鳜的其他常规可量比例性状都有显著性差异 (表2)。其中回交子代与亲本子代群体间在头部隆角、吻长/头长、尾柄高/体高上都存在显著性差异 (P<0.05);回交子代在头高/头长上与斑鳜间差异明显 (P<0.05),与杂交鳜间无显著差异 (P>0.05);回交子代在体高/体长、尾柄长/体长、体宽/体长与杂交鳜间差异显著 (P<0.05),与斑鳜间无显著差异 (P>0.05)。3) 框架比例性状中,回交子代和斑鳜、杂交鳜间均有明显差异的参数有C/体长、J/体长、V/体长 (P<0.05);回交子代的G/体长、H/体长、I/体长、K/体长、L/体长、M/体长、Q/体长与杂交鳜间差异明显 (P<0.05),与斑鳜间无显著差异 (P>0.05);回交子代的B/体长与斑鳜间有显著差异 (P<0.05),与杂交鳜间无明显差异 (P>0.05,表2)。

    表  1  鳜回交子代与其亲本子代可数性状比较
    Table  1.  Comparison of countable traits between backcross progenies and their parents
    性状
    Trait
    回交子代
    Backcross
    斑鳜
    S. scherzeri
    杂交鳜
    Hybrid
    背鳍 Dorsal fin XI-XIII,13~15 XI-XII,12~14 X-XII,13~15
    胸鳍 Pectoral fin 1,12~15 1,12~15 1,12~15
    腹鳍 Ventral fin I,5 I,5 I,5
    臀鳍 Anal fin III,9~11 III,9~10 III,9~11
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    表  2  鳜回交子代与其亲本子代可量性状差异分析
    Table  2.  Different analysis of quantitative traits between backcross progenies and their parents
    性状
    Trait
    回交子代
    Backcross
    斑鳜
    S. scherzeri
    杂交鳜
    Hybrid
    头部隆角 AH 27.90±2.250b 25.36±1.140c 29.37±1.100a
    吻长/头长 LS/LH 0.288±0.037a 0.348±0.037b 0.237±0.029c
    头长/体长 LH/LB 0.354±0.022ab 0.350±0.015b 0.364±0.021bc
    头高/头长 HH/LH 0.653±0.057a 0.557±0.020b 0.665±0.108a
    体高/体长 HB/LB 0.298±0.026b 0.283±0.013b 0.326±0.021a
    体宽/体长 HB/LB 0.148±0.014a 0.152±0.014a 0.140±0.017b
    尾柄长/体长 LCP/LB 0.149±0.020a 0.160±0.009a 0.136±0.022b
    尾柄高/体高 HCP/HB 0.347±0.036a 0.372±0.027b 0.346±0.034b
    B (1-11)/体长 B/LB 0.276±0.010a 0.252±0.023b 0.269±0.010a
    C (2-3)/体长 C/LB 0.211±0.014a 0.157±0.014b 0.168±0.013b
    D (2-10)/体长 D/LB 0.307±0.013ab 0.286±0.024b 0.320±0.027a
    E (2-11)/体长 E/LB 0.222±0.008ab 0.213±0.020b 0.238±0.020a
    G (3-9)/体长 G/LB 0.403±0.019b 0.397±0.029b 0.441±0.024a
    H (3-10)/体长 H/LB 0.280±0.014b 0.270±0.025b 0.311±0.032a
    I (3-11)/体长 I/LB 0.269±0.014b 0.264±0.017b 0.291±0.024a
    J (4-5)/体长 J/LB 0.171±0.006a 0.154±0.020b 0.152±0.008b
    K (4-8)/体长 K/LB 0.252±0.011b 0.247±0.018b 0.275±0.011a
    L (4-9)/体长 L/LB 0.268±0.015b 0.259±0.019b 0.301±0.024a
    M (4-10)/体长 M/LB 0.404±0.022b 0.424±0.029b 0.464±0.025a
    Q (5-9)/体长 Q/LB 0.234±0.013b 0.238±0.014b 0.260±0.011a
    V (9-10)/体长 V/LB 0.375±0.021a 0.337±0.033b 0.345±0.014b
    注:同行数据不同上标字母表示差异显著 (P<0.05) Note: Different superscript letters indicate significant difference (P<0.05).
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    8项常规可量比例性状中,头部隆角值、体高/体长、头高/头长、头长/体长4项的HI<45,为偏母性状;体宽/体长、尾柄长/体长2项的HI>55,为偏父性状;吻长/头长1项45<HI<55,为中间性状;尾柄高/体高1项的HI>100,为超亲偏离性状。13项框架比例性状中,有H/体长、I/体长、K/体长、L/体长、M/体长、Q/体长6项的HI<55,为偏母性状;G/体长、B/体长2项HI>55,为偏父性状;C/体长、J/体长、V/体长3项45<HI<55,为中间性状;D/体长、E/体长2项的HI>100,为超亲偏离性状。综合杂种指数平均值为38.73。

    将多重比较所得数据进行Pearson相关性分析,最终获得12个参数进行主成分分析和判别函数分析,分别为头部隆角 (X1)、体高/体长 (X2)、头高/头长 (X3)、吻长/头长 (X4) 体宽/体长 (X5)、头长/体长 (X6)、尾柄长/体长 (X7)、尾柄高/体高 (X8)、B/体长 (X9)C/体长 (X10)、J/体长 (X11)、V/体长 (X12)。主成分分析结果显示,前4项主成分的特征值大于1.0,累计贡献率达75.216% (表3)。

    表  3  主成分总方差变异率分析
    Table  3.  Analysis of variation rate of total variance of principal components
    成分
    Component
    初始特征值 Initial eigenvalue提取载荷平方和 Extraction load sum of squares
    总计
    Total
    方差百分比
    Variance percentage/%
    累积
    Cumulation/%
    总计
    Total
    方差百分比
    Variance percentage/%
    累积
    Cumulation/%
    1 3.654 30.452 30.452 3.654 30.452 30.452
    2 2.431 20.258 50.710 2.431 20.258 50.710
    3 1.734 14.450 65.160 1.734 14.450 65.160
    4 1.207 10.057 75.216 1.207 10.057 75.216
    5 0.753 6.278 81.494
    6 0.657 5.479 86.973
    7 0.499 4.161 91.133
    8 0.426 3.551 94.684
    9 0.261 2.174 96.858
    10 0.180 1.504 98.362
    11 0.137 1.141 99.503
    12 0.060 0.497 100.000
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    第一主成分主要解释头部隆角、体高/体长、头高/头长、尾柄高/体高、C/体长、V/体长6个性状的贡献率,主要反映头部隆角及高度、体背高低、尾柄高度等造成的形态差异;第二主成分主要解释吻长/头长、J/体长2个性状的贡献率,主要反映吻部长短和臀鳍起末间距造成的形态差异;第三主成分、第四主成分主要解释头长/体长、B/体长2个性状的贡献率,主要反映头部大小和吻部至头后背部间距造成的形态差异。

    根据前3个主成分绘制出3个群体的三维空间分布图 (图2),可以将3个群体进行有效区分。

    图  2  3个群体在前3个主成分上的三维空间分布图
    Figure  2.  Three-dimensional spatial distribution of three groups on first three principal components

    通过逐步判别分析,筛选出具有极显著差异的8个生物学性状:头部隆角 (X1)、体高/体长 (X2)、头高/头长 (X3)、吻长/头长 (X4)、体宽/体长 (X5)、B/体长 (X9)、C/体长 (X10)、J/体长 (X11)。进而拟合出两个典型判别函数:

    F1=0.151X1+0.216X2+0.355X3−0.323X4−0.330X5−0.377X9+0.751X10+0.391X11

    F2=−0.399X1−0.533X2−0.241X3+0.732X4+0.441X5−0.525X9+0.166X10+0.364X11

    两个判别函数的贡献率分别为55.3%和44.7%,将3个群体的8个性状带入典型判别函数中,绘制出二维平面上的分布图 (图3)。

    图  3  依据判别函数所得3个群体二维空间分布图
    Figure  3.  Two-dimensional spatial distribution of three groups based on discriminant function

    同时,依据极显著差异的8个生物学性状,拟合出3个群体的分类判别函数:

    回交群体:Y1=8.135X1+265.921X2+95.556X3+24.429X4+330.025X5+1 332.942X9+918.925X10+940.928X11

    斑鳜群体:Y2=7.366X1+178.379X2+61.131X3+106.673X4+506.013X5+1 443.162X9+620.952X10+769.083X11

    杂交鳜群体:Y3=8.792X1+335.719X2+94.744X3−35.487X4+269.032X5+1 615.562X9+694.262X10+654.415X11

    用上述公式对现有群体的测量性状变量进行回代分析,比较计算出以上函数值及判别准确率,判别准确率平均为99.4%。

    回交子代躯干有4类体斑:背部鞍状斑、体侧空心斑、地图斑、点状斑。回交子代全部个体都具有点状斑和地图斑,部分个体具有背部鞍状斑和体侧空心斑。与回交亲本斑鳜相比,总样本中,有41尾出现背部鞍状斑,但空心斑分布有差异,其中有空心斑个体30尾 (图4-a)、无空心斑个体11尾 (图4-b);其余51尾不具明显背部鞍状斑,其中有空心斑个体37尾 (图4-c)、无空心斑个体14尾 (图4-d)。

    图  4  回交子代体斑分类
    箭头指为:a. 背部鞍状斑,b. 点状斑,c. 空心斑,d. 地图斑
    Figure  4.  Body spots classification of backcross progenies
    Arrows are: a. Back saddle spots; b. Punctate spots; c. Hollow spots; d. Map spot

    传统的形态学分析结合框架结构能更有效的反映形态差异,可为种质鉴定、物种分类及遗传变异提供大量的性状数据[28-29]。本研究中21项可量性状比值显著性差异分析结果显示,回交子代与斑鳜存在显著性差异的有8项 (P<0.05),与杂交鳜存在显著性差异的有13项 (P<0.05)。杂种指数可以对后代性状变异与亲本性状进行评价[30],回交子代偏母性状有10项,偏父性状为4项,中间性状有4项,超亲偏离性状为3项,平均杂种指数为38.73,综合表现为偏斑鳜。结合多重比较分析和杂种指数分析结果,表明回交子代在可量形态性状上偏斑鳜。

    在一代杂交中,斑鳜 (♀)×鳜 (♂) 杂交子代与母本的显著性差异可量性状比值多于父本,聚类分析中杂交子代与父本鳜聚为一支[19];反交子代 (鳜♀×斑鳜♂) 可量性状比值的杂种指数显示出反交子代偏向母本鳜的趋势[18],正、反杂交子一代的体型特征均偏向鳜。本研究中,正杂交子代与斑鳜回交,回交子代体型特征偏斑鳜。这可能是由于斑鳜既作为轮回亲本,又作为杂交母本的缘故,回交子代中除了斑鳜遗传物质组成比例增加、产生轮回效应外,一定程度上也受母系效应影响[31-33]。轮回亲本效应可使得回交子代偏轮回亲本,如[团头鲂 (Megalobrama amblycephala)♀×翘嘴红鲌 (Culter alburnus)♂]♀×翘嘴红鲌♂回交子代的体高/体长值 (体型) 偏向于轮回亲本翘嘴红鲌[6],回交鲤和回交鲫的轮回亲本分别为鲫和鲤,两者在体型、体色、口须有无、口径大小等偏轮回亲本[9]。鳜鱼育种中,若要实现后代性状更接近于轮回亲本,可考虑进行二次回交。

    本研究中对回交子代和亲本子代的12个参数进行主成分分析,发现头部隆角、体高/体长、头高/头长、尾柄高/体高、C/体长、V/体长6个性状对3个群体体型差异的贡献较大,前3个主成分的总方差积累贡献率达65.16%,能够明显区分3个群体。逐步判别分析筛选出的8个性状:头部隆角、体高/体长、头高/头长、吻长/头长、体宽/体长、B/体长、C/体长、J/体长,判别准确率为99.4%,说明头部隆角、体高/体长、头高/头长、C/体长是3个群体形态差异的关键性状。由此可见,回交子代与亲本子代可以通过头部隆角、体高/体长、头高/头长、C/体长等关键性状进行数值鉴定。

    前人研究发现斑鳜体侧有明显、排列较规则的点状斑块和空心状斑块,背部有4块鞍状斑[19];杂交鳜头部至眼后无斜带,背鳍下方有黑色纵带,但不明显,体侧有空心斑,但不规则,介于鳜和斑鳜之间[18]。本研究中回交子代群体中有45.5%的个体表现出与斑鳜类似的背部鞍状斑,同时具有体侧空心斑、地图斑、点状斑3种斑纹,根据不同斑纹类型组合,回交子代体斑可分为4类:有背部鞍状斑有空心斑、有背部鞍状斑无空心斑、无背部鞍状斑有空心斑、无背部鞍状斑无空心斑。杂交鳜中来源于父本鳜的体斑特征呈弱化趋势,体现在头部至眼后的斜带消失,背鳍下方黑色纵带变淡,同时,来源于斑鳜的体斑特征呈增强趋势,体现在体侧出现了母本斑鳜的空心斑和点状斑,但无背部鞍状斑,杂交鳜的体斑特征介于双亲之间[34];回交子代中,躯干纵带完全消失,空心斑和点状斑继续保留,且出现背部鞍状斑,即体斑也表现有明显的轮回亲本效应。本研究中有1/3的回交子代同时出现背部鞍状斑和空心斑,与轮回亲本斑鳜更为相似。就体斑回交效应而言,可继续选择具有背部鞍状斑和规则空心斑的子代进行自交或与斑鳜再次回交,以期培育出特定体斑的新品系。

    综上所述,回交子代体型特征偏向轮回亲本斑鳜,利用形态多元分析方法对回交子代和亲本子代进行形态鉴定,回交后代部分个体体斑与斑鳜相似,出现背部鞍状斑和规则空心斑,以上结果可为今后鳜鱼杂交育种和子代种质鉴定提供依据和参考。

  • 图  1   消毒前后水源水中i-sul1 (a) 和e-sul1 (b) 浓度的变化

    同一图中标有不同字母代表有显著差异 (P<0.05);图2同此

    Figure  1.   Change in concentrations of i-sul1 (a) and e-sul1 (b) in water source before and after disinfection

    Different letters in the same figure indicate significant difference (P<0.05). The same case in Figure 2.

    图  2   消毒前后池塘水中i-sul1 (a) 和e-sul1 (b) 浓度的变化

    Figure  2.   Change in concentrations of i-sul1 (a) and e-sul1 (b) in pond water before and after disinfection

    图  3   消毒过程中活性氯质量浓度 (a) 及其所达到的浓时积 (b) 的变化

    Figure  3.   Change in concentration of FAC (a) and reached CT value (b) during disinfection

    图  4   消毒过程中高锰酸钾质量浓度 (a) 及其所达到的浓时积 (b) 的变化

    Figure  4.   Change in concentration of KMnO4 (a) and reached CT value (b) during disinfection

    表  1   水源水和池塘水中氨氮、亚硝酸盐氮和总有机碳质量浓度

    Table  1   Concentrations of NH4 +-N, NO2 -N and TOC in water source and pond water mg·L−1

    项目
    Item
    水源水
    Water source
    池塘水
    Pond water
    氨氮 NH4 +-N 0.127 1.120
    亚硝酸盐氮 NO2 -N 0.013 0.845
    总有机碳 TOC 8.9 10.9
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    表  2   qPCR所需引物

    Table  2   Primers used for quantitative PCR

    基因
    Gene
    引物对
    Primer pair
    序列 (5'—3')
    Sequence
    退火温度
    Annealing temperature/℃
    片段大小
    Amplicon size/bp
    参考文献
    Reference
    sul1FWCGCACCGGAAACATCGCTGCAC62163[23]
    RVTGAAGTTCCGCCGCAAGGCTCG
    注:FW. 上游引物;RV. 下游引物 Note: FW. Forward primer; RV. Reverse primer
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出版历程
  • 收稿日期:  2020-11-04
  • 修回日期:  2021-03-07
  • 录用日期:  2021-03-14
  • 网络出版日期:  2021-03-24
  • 刊出日期:  2021-06-04

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