Change and correlation analysis of pigment contents and color value during growth of Chlorella vulgaris
-
摘要:
该文基于CIE-L*a*b*颜色分析系统，采用全自动分光测色仪对热带普通小球藻 (Chlorella vulgaris) 生长过程中的颜色值变化进行监测，同时测定其细胞密度及色素的质量浓度变化并进行相关分析。结果显示，热带普通小球藻生长过程中细胞密度分为接种期、快速生长期、稳定期和衰亡期4个阶段，绿色素和黄色素质量浓度和颜色参数值黄度值(b*)、色差值(△E)和饱和度(C)均呈增加趋势，而颜色参数值明度值(L*)、红度值(a*)、相角(H°)呈降低趋势；颜色参数值与细胞密度、色素质量浓度具有较强的相关性，线性回归模型拟合度较高，在快速生长期尤为显著，其中b*和△E可作为较佳的指示指标。通过量化热带普通小球藻生长过程中的颜色参数变化，建立非接触性数量及质量动态变化预测模型，可快速准确预测，为提高养殖过程中精细操作及效率提供理论基础。
Abstract:Automatic color spectrometer was used based on CIE-L*a*b* color system to monitor the color value change in the growth process of Chlorella vulgaris. The cell density and pigment contents, as well as their correlational relationship were analyzed. The results show that C. vulgaris growth was divided into four phases (seeding, rapidly growing, stable and declining). The general trends of green and yellow pigments were increasing, as well as yellow value (b*), color difference (ΔE) and chroma (C), but those of lightness value (L*), red value (a*) and hue angle (H°) were decreasing. Strong correlation had been observed between color values and cell density, pigment content. The linear regression models had a high fit degree especially in rapid growing phase. The b* and ΔE values could be used as good indicators. The establishment of non-contact quantity and quality dynamic prediction model can make the prediction quick and accurate, and provide a theoretical basis for improving the precision operation and efficiency in the process of aquaculture.
-
Keywords:
- Chlorella vulgaris /
- Growth process /
- Color parameters /
- Cell density /
- Pigment content /
- Correlation analysis
-
藻毒素主要由海洋藻类产生，包括多种具有生物活性的化合物。这些化合物经食物链传递至贝类，并进一步威胁人类健康。根据化学结构，藻毒素分为以下类型：氮杂螺环酸毒素类 (Azaspiracids, AZAs)、环亚胺类 (Cyclic imines, CIs)、软骨藻酸类 (Domoic acids, DAs)、大田软海绵酸类 (Okadaic acid, OA)、裸甲藻毒素 (Brevetoxins, BTXs)、蛤毒素 (Pectenotoxins, PTXs)、石房蛤毒素 (Saxitoxins, STXs) 和虾夷扇贝毒素类 (Yessotoxins, YTXs)[1]。其中，除软骨藻酸类和石房蛤毒素外，其余6类均为脂溶性藻毒素。脂溶性藻毒素分布广泛，约占已发现藻毒素的90%，而脂溶特性使其更易在脂肪组织内富集，给人类健康带来更多潜在危害，因此脂溶性藻毒素引起了越来越多的关注。
我国是世界上最重要的贝类增养殖国家，由于贝类增养殖海域与有毒有害赤潮高发区存在高度重叠[2]，有毒赤潮频发给我国贝类带来藻毒素沾染风险。由脂溶性藻毒素引起的贝类中毒事件在我国时有发生[3]。例如，2011年宁波和宁德两地发生的因食用污染贝类导致的群体中毒事件，涉及200多人，社会和经济效益损失巨大。因此，分析贝类体内藻毒素污染情况，评估其安全性，可有效预测贝类食用风险，防范藻毒素带来的危害效应。
北部湾是我国重要的牡蛎产区和最大的近江牡蛎 (Crassostrea rivularis) 养殖基地。“中国大蚝之乡”——广西钦州市年产近江牡蛎近60万吨，产值20多亿元，畅销广东、上海、湖南等地。近江牡蛎的安全对消费者健康和广西经济发展有重要意义。以往调查发现该区域贝类存在脂溶性藻毒素污染，并且环亚胺毒素 (GYM) 的含量高于我国其他海域[4]。因此，本文采集不同季节养殖近江牡蛎，应用高效液相色谱-质谱联用 (High-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry, HPLC-MS/MS) 技术[5]，分析脂溶性藻毒素沾染情况并进行安全评价，为区域海产品质量评价与食用安全控制提供理论依据。
1. 材料与方法
1.1 试验试剂
所用溶剂均为色谱纯。脂溶性藻毒素标准OA、YTX、Dinophysistoxin (DTX) 1、homo-YTX、AZA1、AZA2、AZA3、spirolide (SPX) 1、GYM和PTX2，均购自加拿大国家研究院海洋生物科学研究所。
1.2 试验设备
超高效液相色谱仪 (Thermo Fisher UltiMate 3000, USA)，三重四极杆线性离子阱质谱仪(AB Sciex, Qtrap®-4500, USA)，C18反相色谱柱 (Waters, X-bridge C18, 3.5 μm, 3 mm×150 mm, USA)，组织匀浆机 (IKA, T10BS25, GER)、固相萃取仪 (奥特赛恩斯仪器有限公司，ASE-12)、Strata™-X 聚合物固相萃取 (Solid phase extraction, SPE) 柱 (60 mg/3 cc, Phenomenex, USA)、针式滤膜 (0.22 µm, ANPEL, SCAA-104)。
1.3 样品采集
近江牡蛎样品于2017年4月 (春季)、7月 (夏季)、10月 (秋季) 和2018年1月 (冬季)采集自广西北部湾养殖场 (108.97°E，21.55°N)。选取养殖场四周及中心区域5根养殖柱，取身长11~13 cm，体质量150~250 g的2龄贝个体 (上市规格)，每柱取3只。现场以海水冲洗牡蛎外壳附着物，将样品放入冰盒运回实验室−20 ℃保存。
1.4 样品处理与毒素提取
贝类样品前处理参考陈建华[6]和Liu等[7]的方法。具体操作为：样品解冻后分离贝肉匀浆。称取1 g匀浆组织，加入3 mL甲醇混匀，经2 000 g离心5 min取上清。重复上述操作，将3次上清液合并定容至10 mL备用。
利用SPE固相萃取小柱对上述甲醇粗提液进行净化。先后加入3 mL甲醇和3 mL去离子水交替活化SPE柱3次。然后取4 mL甲醇粗提液加入10 mL去离子水混匀，上SPE柱进行毒素吸附，用3 mL 20%的甲醇清洗柱子以除去杂质。最后取1 mL含0.3%氨水的甲醇溶液将毒素洗脱收集。洗脱液过滤后进行HPLC-MS/MS分析。
另取甲醇粗提液4 mL，加入2 mL NaOH (2.5) 溶液，混匀后75 ℃水浴40 min，冷却至室温后加入2 mL HCl (2.5 mol·L−1) 中和。水解后样品经净化、过滤进行HPLC-MS/MS分析。
1.5 毒素分析
多种脂溶性藻毒素同步分析方法参照Liu等[7]，根据质谱检测结果进行定性。
1.6 安全风险评价
将藻毒素标准配置成混合标准溶液，通过外标法得到毒素浓度与质谱信号响应值之间的关系，计算阳性样品藻毒素含量。
采用风险熵值法 (Risk quotient, RQ)[8]和点评估法[9]进行安全风险评估。因环亚胺类GYM和SPX1安全阈值未设定，且没有明确证据表明该类毒素对人具有口服毒性[10-11]。因此，安全风险评价不包括这两种毒素。
风险熵值法：
$${\small{\rm{RQ}}} = \frac{{\small{\text{总毒素含量}}\;({\text{μ}}{\rm{ g}}\cdot{\rm{k}}{{\rm{g}}^{ - 1}})}}{{\small{\text{标准含量}}\;({\text{μ}}{\rm{ g}}\cdot{\rm{k}}{{\rm{g}}^{ - 1}})}}$$ (1) 计算样品RQ值，若RQ<1，说明食用该样品不存在藻毒素中毒风险；若RQ≥1，说明存在风险，食用后可能引发安全问题。
点评估法：
$$ \begin{array}{c} {\small{\text{毒素摄入量}}}\;\left( {\small{\rm{Daily}}\;{\rm{toxin}}\;{\rm{intake}},\; {\rm{DTI}}} \right) =\\ \dfrac{{\small{\text{毒素含量}}\;({\small{\text{μ}}}{\small{\rm{ g}}}\cdot{\small{\rm{k}}}{\small{{\rm{g}}}^{ - 1}}) \times {\small{\text{食用量}}}\;\left( {\small{{\rm{g}}}\cdot{{\small{\rm{d}}}^{ - 1}}} \right)}}{{\small{\text{体质量}}\;({\small{\rm{kg}}}) \times \small{1\;000}}} \end{array}$$ (2) 将每人每天单位体质量毒素摄入量DTI与急性毒性参考剂量 (Acute reference doses, ARfD)比较，计算暴露风险指数 (Expose risk index, ERI)：
${\rm{ERI}} = \displaystyle \sum \nolimits \left({{\rm{DTI}}/{\rm{ARFD}}} \right)$ ，若0≥ERI < 0.1, 表明食用非常安全；若0.1≥ERI<1, 表明存在安全隐患；若ERI≥1，表明食用风险超过限度，需要启动风险管理程序。2. 结果与分析
2.1 近江牡蛎中脂溶性藻毒素污染状况分析
从20世纪90年代起，我国已有贝类沾染脂溶性藻毒素的报道。随着LC-MS/MS技术的应用和普及，我国贝类样品中脂溶性藻毒素的检出率逐渐增加，且不断发现新的种类[12-13]。研究表明，脂溶性藻毒素在我国分布广泛，从渤海到南海各海域均有检出；渤海和南海贝类藻毒素超标率普遍高于黄海和东海，达70%以上[14-15]。
对春、夏、秋、冬四季牡蛎样品进行脂溶性藻毒素分析，结果见表1。OA、DTX1、YTX、AZA1和AZA3等毒素成分均未检出，说明样品未沾染这些类型的毒素或者其含量低于检测限。而homo-YTX、AZA2、SPX1、GYM和PTX2均有检出，且呈一定的季节差异。图1为典型阳性样品毒素质谱图。
表 1 近江牡蛎样品体内脂溶性藻毒素组成与质量分数Table 1 Composition and contents of lipophilic phycotoxins in C. rivularis collected from Beihai of Guangxiμg·kg−1 采样时间
Sampling time毒素种类 Toxin profile 大田软海绵酸
OA鳍藻毒素
DTX1虾夷扇贝毒素
YTX虾夷扇贝毒素
homo-YTX氮杂螺环酸毒素
AZA12017.04 ND ND ND 1.40±0.31 ND 2017.07 ND ND ND 0.41±0.25 ND 2017.10 ND ND ND 1.17±0.17 ND 2018.01 ND ND ND 0.54±0.12 ND 采样时间
Sampling time毒素种类 Toxin profile 氮杂螺环酸毒素
AZA2氮杂螺环酸毒素
AZA3螺环内脂毒素
SPX1环亚胺毒素
GYM蛤毒素
PTX22017.04 0.09±0.02 ND 0.52±0.18 6.36±1.55 ND 2017.07 ND ND 0.54±0.19 7.22±1.84 0.06±0.03 2017.10 0.12±0.12 ND 0.60±0.18 10.13±3.25 0.03±0.03 2018.01 ND ND 0.26±0.02 13.15±2.54 0.43±0.04 注：ND. 未检出 Note: ND. Undetected ![]()
图 2 不同季节近江牡蛎的食用安全风险a. 风险熵值法；b. 点评估法Fig. 2 Seasonal variation of C. rivularis safetya. Risk quotients; b. Point estimation2.1.1 环亚胺类毒素
我国GYM和SPXs首次在广东附近海域的长牡蛎 (C. gigas) 中检出，南海污染程度高于北方[16-18]。本次调查中，牡蛎样品沾染的脂溶性藻毒素以环亚胺类为主，GYM含量最高 (表1)，且呈现秋冬高、春夏低的特点。冬季牡蛎样品中GYM质量分数达 (13.15±2.54) μg·kg−1，是春季样品的2倍[(6.36±1.55) μg·kg−1]。与GYM季节分布特征不同，SPX1质量分数在冬季样品中最低[(0.26±0.02) μg·kg−1]，秋季最高 [(0.60±0.18) μg·kg−1]。这些毒素含量变化很可能与相关产毒藻种的季节性变动有关。以往研究表明，GYM在我国南海贝类中具有较高的检出率和含量[19]，与本次调查结果一致。
2.1.2 聚醚类毒素
OA和DTXs是一类聚醚或大环内酯化合物，由鳍藻属 (Dinophysis sp.) 和原甲藻属 (Prorocentrum sp.) 的藻类产生，是导致腹泻的脂溶性毒素类型[20]，具有分布范围广、发病率高等特点。PTXs是鳍藻属产生的是一类大环聚醚化合物，其中以PTX2在海洋环境中最为常见。研究表明，OA、DTX1和PTX2一般共存于海水、浮游植物和贝类样品[19, 21-22]。
贝类体内部分OA和DTX1与游离脂肪酸结合，以酯化形式存在。这部分结合态毒素无法直接检测，一定程度上低估了藻毒素的含量。碱水解使结合态毒素酯键断裂，释放出游离态[23]。本研究中，水解前后均未检测到OA和DTX1，说明该区域牡蛎受此类毒素污染较小。这一结果可能与牡蛎不易累积这些毒素有关[24]。而PTX2在夏、秋、冬三季均有检出，且冬季样品中质量分数最高[(0.43±0.04) μg·kg−1] (表1)，可能是由于PTX2比OA和DTX1更易保留在牡蛎组织中。
AZAs属于聚醚类毒素，其结构中具有独特的螺旋环、环胺或其他氮杂基团[25]，由环胺藻Azadinium和Amphidoma两个属产生。本研究分析了样品中AZA1、AZA2、AZA3 3种同系物，结果只检测到少量的AZA2，AZA1和AZA3均未检测到。AZA2出现在春、秋两季，质量分数分别为 (0.09±0.02) μg·kg−1和 (0.12±0.02) μg·kg−1 (表1)。Az. poporum被认为是中国沿海AZAs的首要贡献者[26-27]，而AZA2是Az. poporum中AZAs最主要的形式。因此，AZA2可能是我国近海海域存在的AZAs的主要形式。
YTXs是含有2个磺酰基的多环聚醚类化合物，其衍生物多达90多种，主要来源于网状原角藻 (Protoceratium reticulatum)、多边舌甲藻 (Lingulodinium polyedrum) 和具刺膝沟藻 (Gonyaulax spinifera)，最早在虾夷扇贝中发现[28-29]。2008年，国内首次报道YTXs主要存在于黄渤海区域(特别是北部海区)的贝类样品中，组成基本以YTX为主；而在南海贝类中检出率较低，且主要为衍生物homo-YTX[4,30-31]。本次调查中homo-YTX质量分数为0.41~1.40 μg·kg−1，春、秋季明显高于冬、夏季 (表1)。该结果应该与北部湾海域普遍存在以产homo-YTX为主的有毒藻种有关[14]。
2.2 广西北部湾海域近江牡蛎食用安全性分析
2.2.1 风险熵值法
YTXs、AZAs和PTXs等3类毒素毒性效应各不相同，分别计算RQ值。总毒性根据毒性等效因子 (Toxicity equivalency factors, TEF) (表2) 计算，限量标准参照欧洲食品安全局 (European Food Safety Authority, EFSA) 的规定 (表3)。3类毒素的RQ值均小于1，采样区牡蛎不存在食用安全风险 (图2-a)。
表 2 毒性等效因子换算表 (EFSA 2009)[32]Table 2 Toxicity equivalent factors (TEFs) recommended by EFSA 2009毒素种类
Toxin profile毒性等效因子
TEF大田软海绵酸 OA 1 鳍藻毒素 DTX-1 1 蛤毒素 PTX-2 1 氮杂螺环酸毒素 AZA-1 1 氮杂螺环酸毒素 AZA-2 1.8 氮杂螺环酸毒素 AZA-3 1.4 虾夷扇贝毒素 YTX 1 虾夷扇贝毒素 Homo-YTX 1 表 3 脂溶性贝类毒素限定标准[32]Table 3 Limitations for lipophilic phycotoxins in shellfishμg eq·kg−1 毒素种类
Toxin profile限定标准
Limit急性毒性参考剂量
ARfD大田软海绵酸及类似物
OA and analogues45 0.3 氮杂螺环酸毒素 AZA 30 0.2 蛤毒素 PTX 120 0.8 虾夷扇贝毒素 YTX 1 000 25 石房蛤毒素 STX 800 0.5 2.2.2 点评估法
根据公式2及不同毒素ARfD值 (表3) 计算ERI，设定食用量400 g，成人体质量60 kg[32]，结果见图2-b。此次调查中，所有受检样品ERI均小于0.1，说明食用该区域近江牡蛎非常安全。
3. 结论
本文通过HPLC-MS/MS方法，分析不同季节近江牡蛎样品的脂溶性藻毒素，并采用风险熵值法和点评估法进行安全风险评价。结果显示，此次调查牡蛎样品中检测到homo-YTX、AZA2、SPX1、GYM和PTX2 5种脂溶性藻毒素成分，但含量远低于相关限量标准，安全风险评价表明不存在食用安全风险。然而，考虑我国沿海贝类脂溶性藻毒素的沾染情况，应该在更广空间范围内进行持续监测，以保障贝类养殖的持续发展和消费者健康。
致谢：中国科学院海洋研究所有害藻华与海洋生态安全课题组于仁成研究员对本研究的支持与帮助，谨此致谢！
-
![]()
图 1 热带普通小球藻生长过程中细胞数变化及阶段划分
不同小写字母表示差异显著 (P<0.05)；后图同此
Figure 1. Change of cell density and growth phase division of C. vulgaris in process of growth
Different lowercase letters indicate significant difference (P<0.05). The same case in the following figures.
![]()
图 2 热带普通小球藻生长过程中明度值 (A)、红度值 (B) 和黄度值 (C) 的变化
Figure 2. Change of lightness value (A), red value (B) and yellow value (C) of C. vulgaris in process of growth
![]()
图 3 热带普通小球藻生长过程中相角 (A)、色差值 (B) 和饱和度 (C) 的变化
Figure 3. Change of hue angle (A), color difference (B) and chroma (C) of C. vulgaris in process of growth
![]()
图 4 热带普通小球藻生长过程中叶绿素a (A)、叶绿素b (B) 和总叶绿素 (C) 质量浓度的变化
Figure 4. Change of Chl-a (A), Chl-b (B) and chlorophyll (C) mass concentrations of C. vulgaris in process of growth
![]()
图 5 热带普通小球藻生长过程中类胡萝卜素质量浓度的变化
Figure 5. Change of carotenoid mass concentration of C. vulgaris in process of growth
![]()
图 6 热带普通小球藻生长过程中类叶比值的变化
Figure 6. Change of ratio of carotenoid and chlorophyll of C. vulgaris in process of growth
表 1 热带普通小球藻生长过程中颜色参数与细胞密度、色素参数质量浓度的简单相关分析
Table 1 Simple correlation analysis among color parameters and cell density, pigment contents of C. vulgaris in process of growth
参数
Parameter细胞密度
Cell density叶绿素a
Chl-a叶绿素b
Chl-b总叶绿素
Chlorophyll类胡萝卜素
Carotemoid catabolite类叶比值
Ratio of carotenoid and
chlorophyll明度值L* Lightness value −0.734* −0.912** −0.919** −0.918** −0.981** −0.913** 红度值a* Red value −0.918** −0.940** −0.957** −0.949** −0.939** −0.948** 黄度值b* Yellow value 0.857** 0.943** 0.954** 0.950** 0.970** 0.948** 色差值△E Color difference 0.845** 0.941** 0.952** 0.948** 0.974** 0.946** 相角H° Hue angle −0.766** −0.689* −0.703* −0.696* −0.639* −0.774** 饱和度C Chroma 0.859** 0.943** 0.955** 0.950** 0.970** 0.948** 注：*. 在0.05水平 (双侧) 上显著相关；**. 在0.01水平 (双侧) 上显著相关 Note: *. Significant correlation (Bilateral) at 0.05 level; **. Very significant difference (Bilateral) at 0.01 level. 
下载: 导出CSV
表 2 热带普通小球藻生长过程中细胞密度、色素参数质量浓度与颜色参数的回归分析
Table 2 Analysis of regression among cell density, pigment contents and color parameters of C. vulgaris in process of growth
参数
Parameter回归方程
Regression equation调整R2
Adjusted R2F P 细胞密度 Cell density y细胞密度=−282.126 3+2.170 2xL−198.395 5xa−26.132 0xb+2.023 4x△E 0.971 6 43.093 2 0.000 2 叶绿素a Chl-a y叶绿素a=11.568 4−0.113 5xL−0.263 4 xa+0.0940 1xb−0.159 5x△E 0.914 0 13.693 9 0.003 6 叶绿素b Chl-b y叶绿素b=5.740 5−0.056 4xL−0.174 5xa−0.004 4xb−0.040 8x△E 0.953 1 25.768 9 0.000 6 总叶绿素 Chlorophyll y总叶绿素=17.297 0−0.169 7xL−0.437 4xa+0.089 7xb−0.200 3x△E 0.929 9 16.990 1 0.002 0 类胡萝卜素 Carotemoid catabolite y类胡萝卜素=9.873 3−0.096 7xL−0.183 9xa+0.019 94xb−0.069 78x△E 0.973 1 45.680 3 0.000 1 总色素 Plamochromic pigment y总色素=27.170 4−0.266 4xL−0.621 4xa+0.109 7xb−0.270 1x△E 0.945 0 25.760 0 0.000 6
下载: 导出CSV
-
[1] 鲍亦璐. 微藻培养过程的营养优化与控制研究[D]. 广州: 华南理工大学, 2012: 1-2. [2] MOUHIM R F, CORNET J F, FONTANE T, et al. Production, isolation and preliminary characterization of the exopolysaccharide of the cyanobacterium Spirulina platensis[J]. Biotechnol Lett, 1993, 15(6): 567-572. doi: 10.1007/BF00138541
[3] OTERO A, DIGNA G, MORALES E D, et al. Manipulation of the biochemical composition of the eicosapentaenoic acid-rich microalga Isochrysis galbana in semicontinuous cultures[J]. Biotechnol Appl Bioc, 2010, 26(3): 171-177.
[4] PULZ O, GROSS W. Valuable products from biotechnology of microalgae[J]. Appl Microbiol Biot, 2004, 65(6): 635-648. doi: 10.1007/s00253-004-1647-x
[5] JIANG L, LUO S, FAN X, et al. Biomass and lipid production of marine microalgae using municipal wastewater and high concentration of CO2[J]. Appl Energ, 2011, 88(10): 3336-3341. doi: 10.1016/j.apenergy.2011.03.043
[6] TAKAGI M, KARSENO Y T. Effect of salt concentration on intracellular accumulation of lipids and triacylglyceride in marine microalgae Dunaliella cells[J]. J Biosci Bioeng, 2006, 101(3): 223-226. doi: 10.1263/jbb.101.223
[7] 潘冰峰, 李祖义. 利用海洋微藻生产富含DHA的单细胞油脂[J]. 生物工程进展, 2000(6): 43-45. doi: 10.3969/j.issn.1671-8135.2000.06.010 [8] 丁丽欢, 王珺, 严虹羽, 等. 热带普通小球藻培养模式的筛选及其培养基的优化[J]. 微生物学通报, 2018, 45(5): 981-989. [9] SAFI C, ZEBIB B, MERAH O, et al. Morphology, composition, production, processing and applications of Chlorella vulgaris: a review[J]. Renew Sust Energ Rev, 2014, 35: 265-278. doi: 10.1016/j.rser.2014.04.007
[10] 常杰. 小球藻在动物营养中的应用研究进展[J]. 饲料研究, 2016(2): 7-10. [11] 过伟民, 魏春阳, 张艳玲, 等. 烤烟表面颜色的量化及其与胡萝卜素类物质的关系[J]. 烟草科技, 2012(1): 62-68. doi: 10.3969/j.issn.1002-0861.2012.01.013 [12] 丁根胜, 张庆明, 巴金莎, 等. 烟叶颜色色度学指标与烤烟品质的关系分析[J]. 中国烟草科学, 2011, 32(4): 14-18. doi: 10.3969/j.issn.1007-5119.2011.04.004 [13] 谢鹏飞, 邓小华, 周清明, 等. 密集烘烤过程中烟叶颜色、形态和水分变化及相互关系[J]. 作物研究, 2012, 26(5): 486-490. doi: 10.3969/j.issn.1001-5280.2012.05.19 [14] 曹云涛, 孔维宝, 葸玉琴, 等. 不同营养方式对普通小球藻生长特性和细胞组成的影响[J]. 食品与发酵工业, 2011, 37(10): 45-51. [15] 葸玉琴, 崇梅, 朱巧巧, 等. 不同氮源对混养小球藻生长和部分生化组成的影响[J]. 西北师范大学学报(自然科学版), 2015, 51(1): 82-86. [16] 李小嫄, 王洪伟, 童华荣. 食品感官评价技术在茶叶品质评价中的应用研究进展[J]. 食品安全质量检测学报, 2015, 6(5): 1542-1547. [17] 孟凡娟, 许向阳, 李景富. 番茄果实色素含量和表面颜色相关性研究[J]. 东北农业大学学报, 2006(4): 459-462. doi: 10.3969/j.issn.1005-9369.2006.04.007 [18] TIMOTHY J, GRAEME E, HOBSON A. General method for the instrumental assessment of the color tomato fruit during ripening[J]. J Sci Food Agric, 1984, 35(12): 1277-1281. doi: 10.1002/jsfa.2740351202
[19] 蔡鸿昌, 崔海信, 宋卫堂, 等. 黄瓜初花期叶片光合色素含量与颜色特征的初步研究[J]. 农业工程学报, 2006(9): 34-38. doi: 10.3321/j.issn:1002-6819.2006.09.007 [20] 于国锋, 冯媛, 郑宏伟, 等. CIE-L*a*b*颜色模型在烟草中的应用研究进展[J]. 河南农业科学, 2019, 48(2): 1-7. [21] TAIZ L, ZEIGER E, MOLLER I, et al. Plant physiology and development[M]. 6th ed. Massachusetts: Sinauer Associates Inc, 2016: 10-12.
[22] 田喜, 何绍兰, 吕强, 等. 高光谱图像信息的柑橘叶片光合色素含量分析技术研究[J]. 光谱学与光谱分析, 2014, 34(9): 2506-2512. doi: 10.3964/j.issn.1000-0593(2014)09-2506-07 -
期刊类型引用(3)
1. 陈妹，黄海燕，任晓虎，陈效，刘云岗，刘建军. 石房蛤毒素暴露对F1代小鼠肝损伤及脂质代谢的影响. 伤害医学(电子版). 2024(04): 31-38 . 
百度学术
2. 江姗姗，张晨晓. 广西北部湾沿海市售贝类脂溶性毒素污染分析及食用风险评价. 南方水产科学. 2023(04): 158-167 . 本站查看
3. 付满，蔡秋杏，黄海，石宇，张晨晓，王允茹，董庆亮，韦燕丽. 北部湾常见牡蛎中磷脂提取及其抗氧化性研究. 中国食品添加剂. 2022(08): 58-63 . 百度学术
其他类型引用(4)
计量
- 文章访问数: 1166
- HTML全文浏览量: 504
- PDF下载量: 62
- 被引次数: 7
粤公网安备 44010502001741号
