Study on transdermal penetration effects of Acorus tatarinowii essential oil and water soluble azone to fish anesthetics
-
摘要:
文章研究了石菖蒲 (Acorus tatarinowii) 挥发油和水溶性氮酮2种常见透皮促进剂 (PE) 的4种不同质量分数 (1%、4%、7%、10%和1%、3%、5%、10%) 对中国花鲈 (Lateolabrax maculatus) 幼鱼药浴吸收MS-222和丁香酚的促透效果。结果显示：1) 2种PE可显著减少入麻和复苏时间，并降低丁香酚或MS-222的使用剂量以达到相似的麻醉效果；2) 2种PE的促透效果随质量分数增加先增强后减弱；3) 石菖蒲挥发油与水溶性氮酮对丁香酚或MS-222的最佳促透质量分数分别为7%和3%。分析鳃组织抗氧化指标发现：1) 丁香酚和MS-222浸泡对中国花鲈鳃组织造成一定程度的氧化应激，表现为鳃组织中过氧化物酶 (POD)、超氧化物歧化酶 (SOD)、过氧化氢酶 (CAT) 活性和谷胱甘肽 (GSH)、丙二醛（MDA） 浓度显著 (P<0.05) 升高；2) 协同使用PE，可减少麻醉剂用量，进而降低鳃组织氧化应激，表现为麻醉协同组鳃中SOD、CAT活性和MDA、GSH浓度显著 (P<0.05) 低于麻醉对照组。
Abstract:This study compared the penetration effects of two common penetration enhancers (PE) (Acorus tatarinowii essential oil and water soluble azone) with different mass fractions (1%, 4%, 7%, 10% and 1%, 3%, 5%, 10%) on the juvenile Lateolabrax maculatus absorbing eugenol and MS-222. The results show that: 1) PEs could reduce the time of anaesthesia and recovery significantly, and reduce the dosage of anesthetics to achieve similar anesthetic effects. 2) With increasing mass fraction of PE, the penetration effect first enhanced and then weakened. 3) The optimal mass fraction of penetration of A. tatarinowii essential oil and water soluble azone on eugenol or MS-222 were 7% and 3%, respectively. According to the antioxidant index of the gill tissue, we found that: 1) After soaking the fish in the anesthetics, the activities of peroxidase (POD), superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT) and the concentrations of malonaldehyde (MDA), glutathione (GSH) increased in the gill tissue of L. maculatus (P<0.05). 2) The activities of SOD, CAT and the concentrations of MDA and GSH in the gill tissue of the PE anesthesia group were significantly lower than those of the control group (P<0.05).
-
四指马鲅 (Eleutheronema tetradactylum) 俗称马友、午鱼等，隶属于鲻形目、马鲅亚目、马鲅科、四指马鲅属，主要分布在印度洋至西太平洋，尤其在波斯湾至巴布亚新几内亚、澳大利亚北部和东亚 (中国、日本和越南等) 沿海分布密集[1]。四指马鲅肉质鲜美，营养价值高，已成为海水鱼类养殖的新品种。区又君等[2]开展四指马鲅规模化人工繁殖技术研究取得成功，并在广东、广西、海南、福建、浙江等沿海地区推广养殖，推动了马鲅科鱼类的养殖生产。
鳃是鱼类重要的呼吸器官，与外界水体环境直接接触，能最先感知水体溶氧的变化[3]。同时还是渗透压、离子调节及氨氮排泄器官，其功能主要与鳃小片上的线粒体丰富细胞有关。研究表明，广盐性鱼类的线粒体丰富细胞适应低渗和高渗环境时分别表现出淡水型线粒体丰富细胞和海水型线粒体丰富细胞[4-8]。鳃的基本结构和功能研究主要集中在波纹唇鱼 (Cheilinus undulatus)[9]、大黄鱼 (Pseudosciaena crocea)[10]、黄颡鱼 (Pelteobagrus fulvidraco)[11]、怒江裂腹鱼 (Schizothorax nukiangensis)[12]、梭鱼 (Liza haematocheila)[13]、斑马鱼 (Danio rerio)[14]等。有关鱼类鳃组织发育分化也有较多报道，区又君等[15]在卵形鲳鲹 (Trachinotus ovatus) 鳃的分化发育研究中，将其分为原基期、鳃丝分化和发育期以及鳃器官生长发育完善期共3个时期，并发现鳃的分化和发育与鱼的生长、形态发育、呼吸、运动、代谢以及身体各部位功能的完善等相一致；刘阳等[16]在花鲈 (Lateolabrax maculatus) 鳃的组织学研究中，将鳃的发育分为鳃原基出现、鳃丝分化、鳃小片分化和鳃器官完善4个时期，并发现鳃发育与其呼吸和渗透调节功能成正相关。目前有关四指马鲅鳃的基本组织结构、鳃早期发育和分期及鳃小片上线粒体丰富细胞的类型研究资料较少。通过观察线粒体丰富细胞的类型结构，以便更好地分析其对水体盐度的适应性变化，对阐明鱼类渗透压调节以及其适盐范围的研究有重要意义。本研究采用组织切片和透射电镜技术，对人工培育四指马鲅鳃的基本结构、鳃的发育和分期以及线粒体丰富细胞类型进行了系统研究，以期更好地了解四指马鲅鳃组织基本结构以及鳃早期发育分期特征与呼吸和渗透调节功能的关系，为养殖技术的改进及养殖水体的选择和调控提供理论参考。
1. 材料与方法
1.1 实验材料
实验鱼采自中国水产科学研究院南海水产研究所珠海试验基地。实验期间参照区又君等[2]的培育方法进行鱼苗培育。仔鱼孵化后第1天开始计算日龄，1—35日龄，每天取样1次，每次10尾，其中1—20日龄样本取全鱼，20日龄之后的样本取头部组织置于4%多聚甲醛溶液中固定备用；另采10月龄的四指马鲅，共10尾，取左侧第二对鳃弓鳃小块，将鳃组织剪成小块分别置于4%多聚甲醛溶液和电镜固定液 (Servicebio G1102) 中固定备用。
1.2 实验方法
1.2.1 鳃组织切片的制作
将固定好的样品进行流水冲洗12 h，经50%~100%梯度乙醇脱水 (50%乙醇2 h、70%乙醇4 h、80%乙醇2 h、85%乙醇2 h、95%乙醇45 min×2、100%乙醇45 min×2)，二甲苯透明 (1/2无水乙醇+1/2二甲苯混合液1 h、二甲苯15 min×2)，浸蜡 (石蜡2 h×2)，石蜡包埋，切片 (切片厚度为5 μm)，采用苏木精-伊红 (HE) 进行染色，中性树脂封片，并在ZEISS Axio Scope. A1型光学显微镜下观察并拍照分析。
1.2.2 透射电镜样品制备
将固定好的样品用0.1 mol·L−1磷酸缓冲液 (pH 7.4) 漂洗3次 (每次15 min)。依次放入 (50%→70%→80%→90%→95%→100%→100%) 乙醇→100%丙酮→100%丙酮进行脱水，每次15 min。渗透[V (丙酮)∶V (812包埋剂)=1∶1，2~4 h渗透过夜]，包埋 (纯812包埋剂5~8 h)，37 ℃烤箱过夜。超薄切片机切片后用铀铅双染色 (2%醋酸铀饱和乙醇溶液，枸橼酸铅，各染色15 min)，切片室温干燥过夜最后用透射电子显微镜 (HITACHI HT7700)下观察，采集图像分析。
2. 结果
2.1 四指马鲅鳃基本结构观察
2.1.1 鳃的组织结构
四指马鲅全长 (27.84±0.06) cm，体质量 (198.48±0.18) g，全鳃4对，鳃弓表面粗糙，鳃弓的外缘着生鳃片，鳃耙位于鳃弓的内缘，呈列齿状排列，鳃耙的数量13~15个 (图1-a)，鳃丝整体呈梳状排列在鳃弓上 (图1-b)，末端为膨大的盲囊，有血管分布，由鳃丝软骨支持 (图1-c)。鳃小片相互平行且与鳃丝纵轴垂直，基部与鳃丝相连 (图1-d)。每侧鳃丝具鳃小片110~120片，平均长度为 (58.83±7.53) μm。鳃小片相互平行，鳃小片上可见扁平上皮细胞、柱细胞、血细胞、线粒体丰富细胞和黏液细胞 (图1-e)。
![]()
图 1 四指马鲅鳃的显微结构a. 鳃的解剖结构；b. 鳃的横切面；c. 鳃丝顶端；d. 鳃丝和鳃小片整体；e. 鳃小片放大；Gr. 鳃弓；Gb. 鳃耙；SF. 鳃小片；BF. 鳃丝；B. 血管；C. 软骨细胞；MC. 线粒体丰富细胞；PVC. 扁平上皮细胞；BC. 血细胞；SC. 柱细胞；CC. 黏液细胞Figure 1. Microstructure of gill tissue in E. tetradactyluma. Anatomical structure of gill; b. Cross section of gill; c. Top part of gill filament; d. Filament and secondary filament; e. Enlarge of secondary filament; Gr. Gill arch; Gb. Gill raker; SF. Secondary filament; BF. Filament; B. Blood vessel; C. Arch cell; MC. Mitochondria-rich cell; PVC. Pavement cell; BC. Blood cell; SC. Pillar cell; CC. Mucous cell2.1.2 鳃小片的超微结构
四指马鲅鳃小片主要由扁平上皮细胞、柱细胞、血细胞、线粒体丰富细胞、黏液细胞以及未分化细胞组成。
扁平上皮细胞呈长棒状，内有内质网、线粒体和高尔基体等细胞器，主要分布在鳃小片外侧，每片鳃小片上有扁平上皮细胞15~20个。鳃小片中有大量微血管网分布，内部由血细胞组成 (图2-a)。鳃小片上扁平细胞和微血管内皮中间形成基膜，微血管内皮延伸至柱细胞，在柱细胞和基膜之间有较多的胶原纤维束。柱细胞主要分布于鳃小片中部，数量较少，每片鳃小片上有柱细胞10~15个，细胞呈圆柱形 [(3.05±0.59) μm]，细胞核较大[(2.05±0.62) μm]，细胞质电子密度大 (图2-b)。在鳃小片基部可见到线粒体丰富细胞、黏液细胞以及未分化细胞 (图2-c)。根据线粒体的特征和细胞器的密度，将线粒体丰富细胞分为两类，分别是McI型 (图2-d) 和McII型 (图2-e)。McI型主要排列在鳃小片基部与鳃丝相连处。胞体和核均比较大 [ 胞体 (8.26±1.97) μm，细胞核 (4.36±0.82) μm]，细胞核位于基部，呈圆形或卵圆形，细胞器致密，内含大量的线粒体、内质网和囊泡。细胞内的线粒体表现出多种形状特征，包括椭圆形、长条形以及弯曲的条形等，长椭圆形是其主要类型 (图2-d)。McII型主要排列在鳃小片上，胞体呈长椭圆形 [ 长径 (11.04±0.53) μm，短径 (3.96±0.28) μm]，细胞核位于中部 [ 长径 (3.26±0.84) μm，短径 (1.27±0.33) μm]，胞内细胞器稀少。线粒体主要呈圆形，微管系统不发达。黏液细胞主要分布在鳃小片的基部，和线粒体丰富细胞对生存在，细胞呈圆形 [(3.88±0.60) μm]，胞内充满黏液泡，细胞器较少，只有少量内质网和线粒体，并被黏液泡挤到细胞基部。在鳃小片的基部可见少量未分化细胞 [(3.53±0.41) μm]，是上皮细胞、线粒体丰富细胞等其他功能细胞的母体，细胞核较大 [(2.70±0.20) μm]，呈圆形。
![]()
图 2 四指马鲅鳃小片内部超微结构观察a. 鳃小片顶部结构；b. 柱细胞和窦状隙；c. 鳃小片底部结构；d. I型线粒体丰富细胞 (←. 微管)；e. II型线粒体丰富细胞；PVC. 扁平上皮细胞；GS. 微血管；BC. 血细胞；SC. 柱细胞；BM. 基膜；CF. 胶原纤维束；McI. I型线粒体丰富细胞；McII. II型线粒体丰富细胞；CC. 黏液细胞；NDC. 未分化细胞；M. 线粒体；N. 细胞核；V. 囊泡；箭头. 微管Figure 2. Ultrastructure of gill filaments in E. tetradactyluma. Top part of lamellae; b. Pillar cell and sinusoid; c. Base of lamellae; d. Mitochondria-rich cell I (Arrow-Tubular); e. Mitochondria-rich cell II; PVC. Pavement cell; GS. Blood capillary; BC. Blood cell; SC. Pillar cell; BM. Basement membrane; CF. Collagenous fiber bundle; McI. Mitochondria-rich cell I; McII. Mitochondria-rich cell II; CC. Mucous cell; NDC. Non-differentiated cell; M. Mitochondrion; N. Nucleus; V. Vacuoles; arrow. Tubular2.2 四指马鲅鳃结构发育的组织学观察
2.2.1 鳃原基发生
1日龄仔鱼出现口咽腔原基，其鳃原基呈半椭圆形排列 (图3-a)。3日龄仔鱼出现原始鳃弓，其上皮细胞形成鳃丝原基，开始出现血管系统，血管中有血细胞 (图3-b)。
![]()
图 3 四指马鲅鳃组织的早期发育a. 1日龄仔鱼；b. 3日龄仔鱼；c. 5日龄仔鱼；d. 5日龄仔鱼 (c放大)；e. 7日龄仔鱼；f. 9日龄仔鱼；g. 16日龄仔鱼；h. 17日龄仔鱼；i. 18日龄；j. 22日龄；k. 22日龄 (j的部分放大)；l. 30日龄；m. 35日龄；B. 脑；OE. 食道；O. 口咽腔；GP. 鳃原基； BF. 鳃丝；BC. 血细胞；PVC. 扁平细胞；GA. 鳃弓；GAC. 鳃弓软骨；SF. 鳃小片；MC. 线粒体丰富细胞；SC. 柱细胞；CC. 黏液细胞；BFC. 鳃丝软骨Figure 3. Early development of gill tissue in E. tetradactyluma. 1 DAH; b. 3 DAH; c. 5 DAH; d. 5 DAH (Enlargement of c); e. 7 DAH; f. 9 DAH; g. 16 DAH; h. 17 DAH; i. 18 DAH; j. 22 DAH; k. 22 DAH (Enlargement of the box in j); l. 30 DAH; m. 35 DAH; B. Brain; OE. Esophagus; O. Oropharynx; GP. Gill primordium; BF. Filament; BC. Blood cell; PVC. Pavement cell; GA. Gill arches; GAC. Gill arch cartilage; SF. Secondary filament; MC. Mitochondria-rich cell; SC. Pillar cell; CC. Mucous cell; BFC. Filament cartilage2.2.2 鳃结构分化、发育
5日龄仔鱼出现鳃弓软骨，并出现鳃小片结构，鳃丝短，鳃丝上有1~2片鳃小片，其基部有线粒体丰富细胞，细胞核着色较深，胞质染色较浅，细胞呈不规则形。柱细胞出现在鳃小片上，细胞质为淡红色，胞核着色较深。扁平上皮细胞分布在鳃小片边缘 (图3-c、图3-d)。7日龄鳃弓软骨呈横向生长，鳃小片数量增多并逐渐变长。在鳃丝基部可观察到与线粒体丰富细胞相邻的黏液细胞，细胞呈长椭圆形，细胞核呈长棒状 (图3-e)。9日龄鳃丝两边的鳃小片数量增多，长度增加 (表1)。黏液细胞内可观察到较多的黏液颗粒，细胞核被挤到细胞基部 (图3-f)。16日龄鳃弓软骨明显，骨质致密。鳃丝软骨进一步发育，每根鳃丝上有5~10片鳃小片，鳃小片长度为 (13.04±3.06) μm (图3-g)。17日龄鳃丝呈梳状排列，末端膨大。鳃小片排列紧密，鳃丝软骨明显致密，基本结构逐渐完整 (图3-h)。
表 1 四指马鲅鳃发育时鱼体全长、鳃小片数量和鳃小片长度变化Table 1. Total length, number and length change of secondary gill lamella during gill development of E. tetradactylum日龄
Days after hatching/d鱼体全长
Total length/mm鳃小片数量
Number of secondary gill lamella/片鳃小片长度
Length of secondary gill lamella/μm1 4.20±0.21 − − 3 4.33±0.03 − − 5 4.54±0.02 1~2 11.99±1.49 7 5.38±0.11 1~4 12.81±1.46 9 6.41±0.06 3~7 13.02±3.29 16 10.15±0.03 5~10 13.04±3.06 17 12.09±0.03 5~12 13.06±3.08 18 13.18±0.02 7~14 15.02±1.84 22 17.23±0.13 16~20 18.16±2.03 30 26.65±0.06 22~26 21.27±1.52 35 28.61±0.07 24~28 28.71±3.24 2.2.3 鳃结构完善
18日龄鳃丝软骨发育完全，形态完整，鳃结构已经基本形成 (图3-i)。22日龄鳃进一步发育完善，鳃丝上鳃小片数量增多，每根鳃丝上有16~20片鳃小片，扁平上皮细胞和血细胞呈规则相间紧密排列在鳃小片上。在鳃小片的基部可见形态规则的线粒体丰富细胞和黏液细胞 (图3-j、图3-k)。30—35日龄鳃小片平行紧密排列，鳃结构和成鱼的基本相同 (图3-l、图3-m)。
3. 讨论
3.1 四指马鲅鳃结构与功能的适应性
四指马鲅鳃的显微结构与大部分硬骨鱼类基本相似，主要由鳃弓、鳃耙、鳃丝和鳃小片组成[17-20]。李霞[21]研究发现鳃丝两侧靠近边缘处各有1条血管，并在鳃小片内分支形成毛细血管网。鳃小片上水血屏障的双层结构在很大程度上参与了水与血之间的交流，与鳃血管中的血红蛋白释放出氧并带走二氧化碳功能联系密切[22-24]。扁平上皮细胞紧密连接，分布在鳃小片外围，起到保护鳃丝不受外界伤害的作用[25-26]。四指马鲅鳃小片上微血管内皮和扁平上皮中间存在基膜，猜测基膜参与形成鳃小片上水血屏障的双层结构。四指马鲅鳃小片上柱细胞与基膜之间存在较多胶原纤维束，使鳃小片具有一定的收缩性，这与纳氏鲟 (Acipenser naccarii) 相同[27]。柱细胞主要维持鳃小片的形状，起一定支撑作用。鳃组织上黏液细胞数量较少，成熟的黏液细胞可以分泌黏液形成一个保护膜，起到保护鳃组织的作用。
3.2 鳃小片线粒体丰富细胞的分类及其生理功能
硬骨鱼类鳃小片线粒体丰富细胞 (泌氯细胞) 具有调节渗透压、进行离子分泌和吸收的功能[28]。根据线粒体丰富细胞在鳃丝上的位置分布、结构的区别以及适应淡海水时的变化，可以把线粒体丰富细胞分为2种不同类型：α型和β型[11, 29]。α型线粒体丰富细胞与本研究中四指马鲅Ⅰ型线粒体丰富细胞形态结构特点相一致，主要分布在鳃丝和鳃小片基部。β型线粒体丰富细胞与本研究中四指马鲅鲅Ⅱ型线粒体丰富细胞形态相对应，主要存在于鳃小片上。区又君等[30]研究遮目鱼 (Chanos chanos) 幼鱼鳃发现，在不同盐度条件下，遮目鱼幼鱼线粒体丰富细胞表现出2种不同的类型。四指马鲅兼备Ⅰ型和Ⅱ型线粒体丰富细胞，表明其对水体盐度的变化在生理结构上有较强的适应能力。
3.3 四指马鲅鳃发育分期及其功能完善
四指马鲅仔稚鱼鳃发育从组织学方面可以分为3个阶段：第1阶段 (0—3日龄)为鳃原基的出现期。鳃原基初步形成，但没有进行分化。此阶段仔鱼运动能力较弱，主要漂流在水层中。仔鱼主要靠皮肤、鳍和卵黄囊丰富的微血管吸收水中的溶氧进行呼吸[15]。未出现线粒体丰富细胞，仔鱼主要通过卵黄囊、皮肤、肾以及肠道等器官进行渗透调节来维持体内外渗透压的平衡[16]。第2阶段 (4—17日龄)为鳃结构的发育、分化期。此期鳃耙、鳃弓、鳃丝、鳃小片逐渐开始形成，鳃具备了基本的结构和形态特点。在第5日龄时鳃小片基部出现线粒体丰富细胞，与短盖巨脂鲤 (Piaractus brachypomum)[31]和条石鲷 (Oplegnathus fasciatus)[32]类似，与花鲈[16]比相对较早。仔鱼开始摄食，从内源性营养过渡到外源性营养。鳃丝上出现血管网，鳃开始行使呼吸功能，但主要还是以皮肤呼吸为主[33]。鳃开始进行渗透压调节，但功能尚未完善。第3阶段 (18—35日龄)为鳃结构的发育完善期。鳃的整体结构进一步发育和完善，此后，鳃组织的发育主要体现在数量形状的变化。此阶段，四指马鲅能进行完善的渗透调节功能，很好地维持体内外渗透压的平衡。鳃内血管系统发育完善，鳃的呼吸能力增强，成为四指马鲅的主要呼吸器官[34]。线粒体丰富细胞随鳃小片数量增加不断增多，其鳃的呼吸和渗透调节能力也逐渐增强，鳃小片及线粒体丰富细胞多少是决定鳃行使渗透和呼吸力强弱的决定性因素。不同鱼类鳃发育时期有所差异，可能与生活环境、生长繁殖季节以及种属差异有一定联系。
-
![]()
图 1 中国花鲈达到镇静、麻醉和完全复苏的时间 (n=10)
a. 丁香酚 (E) +石菖蒲挥发油 (S)；b. MS-222 (M) +石菖蒲挥发油 (S)；c. 丁香酚 (E) +水溶性氮酮 (D)；d. MS-222 (M) +水溶性氮酮 (D)；组间字母不同者差异显著 (P<0.05)
Figure 1. Time to achieve sedation, anesthesia and complete resuscitation of L. maculatus (n=10)
a. Eugenol (E) + A. tatarinowii essential oil (S); b. MS-222 (M) + A. tatarinowii essential oil (S); c. Eugenol (E) + water soluble azone (D); d. MS-222 (M) + water soluble azone (D); values with different letters were significantly different (P<0.05).
![]()
图 2 中国花鲈达到镇静、麻醉和完全复苏的时间 (n=10)
E. 丁香酚；S. 石菖蒲挥发油；D. 水溶性氮酮；M. MS-222；组间字母不同者差异显著 (P<0.05)；N. 未观察到
Figure 2. Time to achieve sedation, anesthesia and complete resuscitation of L. maculatus (n=10)
E. Eugenol; S. A. tatarinowii essential oil; D. Water soluble azone; M. MS-222; values with different letters were significantly different (P<0.05); N. Not observed
![]()
图 3 鳃组织抗氧化指标 (n=5)
a. 过氧化物酶；b. 超氧化物歧化酶；c. 过氧化氢酶；d. 丙二醛；e. 谷胱甘肽；AC. 对照组；EC. 10 mg·L−1丁香酚；ES. 8 mg·L−1丁香酚+7%石菖蒲挥发油；ED. 8 mg·L−1丁香酚+3%水溶性氮酮；MC. 50 mg·L−1 MS-222；MS. 40 mg·L−1 MS-222+7%石菖蒲挥发油；MD. 40 mg·L−1 MS-222+3%水溶性氮酮；组间大写或小写字母不同者差异显著 (P <0.05)
Figure 3. Antioxidant indices of gill tissue (n=5)
a. POD; b. SOD; c. CAT; d. MDA; e. GSH; AC. Control group; EC. 10 mg·L−1 eugenol; ES. 8 mg·L−1 eugenol + 7% A. tatarinowii essential oil; ED. 8 mg·L−1 eugenol + 3% water soluble azone; MC. 50 mg·L−1 MS-222; MS. 40 mg·L−1 MS-222 + 7% A. tatarinowii essential oil; MD. 40 mg·L−1 MS-222 + 3% water soluble azone; values with different uppercase or lowercase letters were significantly different.
-
[1] RUAN S F, WANG Z X, XIANG S J, et al. Mechanisms of white mustard seed (Sinapis alba L.) volatile oils as transdermal penetration enhancers[J]. Fitoterapia, 2019, 138: 104195. doi: 10.1016/j.fitote.2019.104195
[2] PRAUSNITZ M R, LANGER R. Transdermal drug delivery[J]. Nature Biotechnol, 2008, 26(11): 1261-1268. doi: 10.1038/nbt.1504
[3] 杨晓春, 张强, 吴镭. 目前我国透皮给药系统研究的基本思路[J]. 中国新药杂志, 2001, 10(5): 321-324. doi: 10.3321/j.issn:1003-3734.2001.05.001 [4] 何治芬, 汤湛, 尹丽娜, 等. 氧化苦参碱凝胶体外经皮渗透及大鼠药动学研究[J]. 中国现代应用药学, 2015, 32(11): 1336-1342. [5] 李希, 易晓霞, 黄嫣, 等. 天麻素经鼻给药制剂的吸收促进剂筛选[J]. 中国实验方剂学杂志, 2013, 19(24): 25-28. [6] 刘开永, 汪开毓. 促渗剂——氮酮在水产中应用的可行性探讨[J]. 河北渔业, 2007(5): 1-4. doi: 10.3969/j.issn.1004-6755.2007.05.001 [7] 陈锡强, 韩利文, 刘可春, 等. 水溶性氮酮对斑马鱼胚胎药物渗透及致畸性作用的影响[J]. 实验动物与比较医学, 2011, 31(2): 108-110. doi: 10.3969/j.issn.1674-5817.2011.02.008 [8] FENG X L, YU Y, QIN D P, et al. Acorus linnaeus: a review of traditional uses, phytochemistry and neuropharmacology[J]. RSC Adv, 2015, 5(7): 5173-5182. doi: 10.1039/C4RA12049C
[9] LU Y, XUE Y, CHEN S, et al. Antioxidant lignans and neolignans from Acorus tatarinowii[J]. Sci Rep, 2016, 6: 22909. doi: 10.1038/srep22909
[10] ZHANG F H, WANG Z M, LIU Y T, et al. Bioactivities of serotonin transporter mediate antidepressant effects of Acorus tatarinowii Schott[J]. J Ethnopharmacol, 2019, 241: 111967. doi: 10.1016/j.jep.2019.111967
[11] 白一岑, 李艳杰, 马云淑. 石菖蒲等3种挥发油对雪上一枝蒿甲素经皮渗透的影响[J]. 中国中药杂志, 2008, 33(5): 513. doi: 10.3321/j.issn:1001-5302.2008.05.006 [12] 李朝, 柯常亮, 古小莉, 等. 麻醉剂丁香酚对鳗弧菌抑菌效果初步研究[J]. 南方水产科学, 2019, 15(2): 60-65. [13] 王文豪, 董宏标, 孙永旭, 等. MS-222和丁香酚在大口黑鲈幼鱼模拟运输中的麻醉效果[J]. 南方水产科学, 2018, 14(6): 54-60. [14] WANG W, DONG H, SUN Y, et al. The efficacy of eugenol and tricaine methanesulphonate as anaesthetics for juvenile Chinese sea bass (Lateolabrax maculatus) during simulated transport[J]. J Appl Ichthyol, 2019, 35(2): 551-557. doi: 10.1111/jai.13844
[15] SOLTANIAN S, HOSEINIFAR S H, GHOLAMHOSSEINI A. Modulation of rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) cutaneous mucosal immune responses following anesthesia: a comparative study on different anesthetic agents[J]. Fish Shellfish Immunol, 2018, 80: 319-324. doi: 10.1016/j.fsi.2018.06.032
[16] National Toxicology Program. NTP toxicology and carcinogenesis studies of methyleugenol (CAS NO. 93-15-2) in F344/N rats and B6C3F1 mice (gavage studies)[J]. Natl Toxicol Program Tech Rep Ser, 2000, 491: 1-412.
[17] 刘双凤, 蔡勋. 鱼用麻醉剂的研究进展[J]. 黑龙江水产, 2008(6): 40-43. [18] 张丽, 汪之和. MS-222对大黄鱼成鱼麻醉效果的研究[J]. 科技与产业, 2010(18): 38-40. [19] PAWAR H B, SANAYE S V, SREEPADA R A, et al. Comparative efficacy of four anaesthetic agents in the yellow seahorse, Hippocampus kuda (Bleeker, 1852)[J]. Aquaculture, 2011, 311(1/2/3/4): 155-161.
[20] COOKE S J, SUSKI C D, OSTRAND K G, et al. Behavioral and physiological assessment of low concentrations of clove oil anaesthetic for handling and transporting largemouth bass (Micropterus salmoides)[J]. Aquaculture, 2004, 239(1/2/3/4): 509-529.
[21] 孙宇航, 王绿洲, 李锋刚. 丁香酚在罗非鱼体内的药物代谢动力学研究[J]. 水产科技情报, 2018, 45(4): 218-222. [22] HUNN J B, ALLEN J L. Movement of drugs across the gills of fishes[J]. Annual Rev Pharmacol, 1974, 14(1): 47-54. doi: 10.1146/annurev.pa.14.040174.000403
[23] 王建新, 郭力. 如意巴布剂中透皮促进剂的筛选研究[J]. 中国中药杂志, 1998, 23(2): 90-91. doi: 10.3321/j.issn:1001-5302.1998.02.012 [24] 李扬, 王阳, 刘科攀. 中药挥发油作为透皮吸收促进剂的研究进展[J]. 药物评价研究, 2011, 34(6): 474-477. [25] EVANS D H, PIERMARINI P M, CHOE K P. The multifunctional fish gill: dominant site of gas exchange, osmoregulation, acid-base regulation, and excretion of nitrogenous waste[J]. Physiol Rev, 2005, 85(1): 97-177.
[26] JIAO W, HAN Q, XU Y, et al. Impaired immune function and structural integrity in the gills of common carp (Cyprinus carpio L.) caused by chlorpyrifos exposure: through oxidative stress and apoptosis[J]. Fish Shellfish Immunol, 2019, 86: 239-245. doi: 10.1016/j.fsi.2018.08.060
[27] de DOMENICO E, MAUCERI A, GIORDANO D, et al. Biological responses of juvenile European sea bass (Dicentrarchus labrax) exposed to contaminated sediments[J]. Ecotoxicol Environ Saf, 2013, 97: 114-123. doi: 10.1016/j.ecoenv.2013.07.015
[28] CAPPELLO T, BRANDÃO F, GUILHERME S, et al. Insights into the mechanisms underlying mercury-induced oxidative stress in gills of wild fish (Liza aurata) combining 1H NMR metabolomics and conventional biochemical assays[J]. Sci Total Environ, 2016, 548: 13-24.
[29] KOHEN R, NYSKA A. Invited review: oxidation of biological systems: oxidative stress phenomena, antioxidants, redox reactions, and methods for their quantification[J]. Toxicol Pathol, 2002, 30(6): 620-650. doi: 10.1080/01926230290166724
[30] 段亚飞, 董宏标, 王芸, 等. 干露胁迫对日本囊对虾抗氧化酶活性的影响[J]. 南方水产科学, 2015, 11(4): 102-108. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2015.04.015 [31] XU Y, LIANG Y, YANG M. Effects of composite LED light on root growth and antioxidant capacity of Cunninghamia lanceolata tissue culture seedlings[J]. Sci Rep, 2019, 9(1): 9766. doi: 10.1038/s41598-019-46139-2
[32] SHIAU S Y, GABAUDAN J, LIN Y H. Dietary nucleotide supplementation enhances immune responses and survival to Streptococcus iniae in hybrid tilapia fed diet containing low fish meal[J]. Aquacult Rep, 2015, 2: 77-81.
[33] 王海锋, 成永旭, 李京昊, 等. 干露和再入水对克氏原螯虾抗氧化应激能力的影响[J]. 南方水产科学, 2019, 15(5): 69-76. doi: 10.12131/20190059 [34] MA J, ZHU J, WANG W, et al. Biochemical and molecular impacts of glyphosate-based herbicide on the gills of common carp[J]. Environl Poll, 2019, 252: 1288-1300. doi: 10.1016/j.envpol.2019.06.040
[35] 姜会民. 氯化汞对鲤幼鱼鳃组织抗氧化系统和组织损伤研究[J]. 生态毒理学报, 2014, 9(5): 998-1003. [36] MING J, YE J, ZHANG Y, et al. Dietary optimal reduced glutathione improves innate immunity, oxidative stress resistance and detoxification function of grass carp (Ctenopharyngodon idella) against microcystin-LR[J]. Aquaculture, 2019, 498: 594-605. doi: 10.1016/j.aquaculture.2018.09.014
[37] 区又君, 陈世喜, 王鹏飞, 等. 低氧环境下卵形鲳鲹的氧化应激响应与生理代谢相关指标的研究[J]. 南方水产科学, 2017, 13(3): 120-124. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2017.03.016 [38] MIRGHAED A T, FAYAZ S, HOSEINI S M. Effects of dietary 1,8-cineole supplementation on serum stress and antioxidant markers of common carp (Cyprinus carpio) acutely exposed to ambient ammonia[J]. Aquaculture, 2019, 509: 8-15. doi: 10.1016/j.aquaculture.2019.04.071
[39] 朱筛成, 龙晓文, 向朝林, 等. 复合蛋白源替代鱼粉对中华绒螯蟹幼蟹生长性能, 生理代谢和生化组成的影响[J]. 南方水产科学, 2019, 15(2): 83-92. doi: 10.12131/20180168
下载:
计量
- 文章访问数: 2862
- HTML全文浏览量: 1381
- PDF下载量: 49
粤公网安备 44010502001741号
