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绿鳍马面鲀外部形态特征与染色体核型分析
李凤辉, 刘琨, 王鹏飞, 边力, 陈四清, 常青, 葛建龙, 周丽青
2019, 15(3): 104-112. doi: 10.12131/20180118
该研究以黄海水域捕捞的131尾绿鳍马面鲀 (Thamnaconus septentrionalis) 为样本,在活鲜状态下,观察其外部形态特征并绘图;统计各鳍条数量,对可量比性状进行回归分析;采用热滴片法,制备染色体标本。结果发现:1) 鱼体头部和背部在活体状态下呈深青灰色,腹部呈浅青绿色,趋于白色。死亡后,体色加深,转为墨绿色,鳍条保持蓝绿色为其外部形态的明显特征。2) 体长为体高的1.5~3.3倍;体长为头长的3.1~4.9倍;头长为吻长的1.1~1.6倍。3) 全长 (Tl)/体长 (Sl)相关性显著 (R2=0.96),雌雄无显著差异;尾柄长/尾柄高、体长/尾柄长、头长/眼径、头长/眼间距相关性不显著,雌雄差异大。4) 鳍式为背鳍Ⅱ,36~39;臀鳍34~37;胸鳍14~15;尾鳍1+10+1;腹鳍退化为一个腹鳍棘。5) 鳞片绒状鳞,由基板和骨质凸起组成;具有体侧线和框下线。6) 绿鳍马面鲀二倍体染色体数目为2n=40,染色体核型为2n=40t,臂数NF=40,均为端着丝粒染色体,且无异型染色体。
关键词: 绿鳍马面鲀, 外部形态特征, 染色体核型
急性和慢性低氧胁迫对卵形鲳鲹鳃器官的影响
陈世喜, 王鹏飞, 区又君, 李加儿, 温久福, 王雯, 谢木娇
2017, 13(1): 124-130. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2017.01.016
文章研究了窒息点以上的低氧胁迫对卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)鱼体鳃器官的影响,在常温条件下对(32.84±3.99)g的卵形鲳鲹进行了急性(0 h、3 h、6 h、12 h、24 h)和慢性(14 d)的低氧胁迫实验,采用常规石蜡切片和H-E染色以及电子显微技术,观察低氧胁迫对卵形鲳鲹鳃器官的影响。结果显示,卵形鲳鲹在急性低氧胁迫下鳃小片上皮肿胀和抬升;慢性低氧胁迫下随着时间延长,鳃小片上皮细胞与鳃小片分离,鳃呼吸表面积增加。结果表明低氧胁迫对卵形鲳鲹鳃器官具有较大影响,而且慢性胁迫的影响大于急性胁迫。
关键词: 卵形鲳鲹, , 低氧胁迫, 组织学
低氧环境下卵形鲳鲹的氧化应激响应与生理代谢相关指标的研究
区又君, 陈世喜, 王鹏飞, 李加儿, 温久福, 王雯, 谢木娇
2017, 13(3): 120-124. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2017.03.016
文章测定了急性和慢性低氧胁迫后卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)的氧化应激和生理代谢相关指标。结果显示, 在(23±0.7)℃下, 体质量(31.59±3.01)g的鱼在急性低氧胁迫条件下的个体成活率为100%, 在慢性低氧胁迫条件下的成活率则不断下降, 第11天时降为实验初始时的50%。急性低氧胁迫过程中随低氧胁迫时间延长鳃过氧化氢酶(CAT)活性下降, 第3小时最低, 随后升高, 第24小时显著高于其他各组(P < 0.05)还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性随低氧持续先上升后恢复至正常水平, 慢性低氧胁迫下鳃CAT活性与对照组相比显著降低(P < 0.05)。MDA、GSH含量和SOD活性则均显著升高(P < 0.05)。肝糖原(LG)在急性低氧胁迫过程中随低氧呈先下降后恢复的趋势, 第12小时降至最低, 第24小时恢复至对照组水平, 慢性胁迫后LG下降。乳酸脱氢酶(LDH)水平在急性低氧胁迫过程中随低氧先升后降, 第3小时达最大值, 第24小时下降为对照组水平, 慢低氧胁迫后LDH水平显著高于对照组(P<0.05)。
关键词: 卵形鲳鲹, 低氧胁迫, 能量代谢, 氧化应激
斑节对虾CDC42基因的克隆及其在不同胁迫条件下的表达分析
李丽丽, 赵超, 范嗣刚, 王鹏飞, 闫路路, 邱丽华
2018, 14(4): 37-45. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2018.04.005
细胞分裂周期蛋白42 (CDC42)是一类广泛表达的小三磷酸鸟苷 (GTP)酶,是Ras家族内Rho亚家族的成员之一,具有GTP酶活性。CDC42在细胞吞噬和炎症发生等先天免疫中发挥着不可替代的功能。该研究通过RACE技术克隆得到了斑节对虾(Penaeus monodon)细胞分裂周期蛋白42 (PmCDC42)基因cDNA全长。生物信息学分析结果表明PmCDC42全长2 233 bp,包括59 bp的5' 非编码区 (UTR)、1 598 bp的3'UTR和576 bp的开放阅读框 (ORF),编码191个氨基酸。通过实时定量PCR技术,研究了PmCDC42在斑节对虾各组织的表达模式,并研究了其在不同pH、盐度、重金属镉(Cd)和哈维弧菌 (Vibrio harveyi)胁迫下的表达情况。结果显示,PmCDC42基因在各组织中均有表达,在血淋巴中的表达量最高。在pH和Cd胁迫下PmCDC42表达量显著升高;在高盐胁迫下PmCDC42表达量上调,低盐胁迫下PmCDC42表达量变化不显著;在哈维弧菌的刺激下PmCDC42上调表达极显著。这表明PmCDC42在斑节对虾先天免疫中起重要作用。
关键词: 斑节对虾, 细胞分裂周期蛋白42, pH, 盐度, , 哈维弧菌
华贵栉孔扇贝MSTN基因启动子的功能分析
范嗣刚, 赵超, 王鹏飞, 闫路路, 邱丽华
2019, 15(1): 63-68. doi: 10.12131/20180182
为了解肌肉生长抑制素myostatin (MSTN)在华贵栉孔扇贝(Chalmys nobilis)闭壳肌肌肉生长和发育过程中所起的负调控作用,对华贵栉孔扇贝的MSTN启动子序列进行了生物信息学分析。结果显示,MSTN启动子序列长1 358 bp,有4个转录起始位点。核心启动子区为–100~–51 bp。有1个TATA-box (–92~–86 bp)和2个E-box等顺式作用元件;潜在的转录因子结合位点有MEF2、MEF3、FoxO、MTBF和MyoD等;启动子区域无CpG岛。成功构建了6个MSTN启动子不同长度片段的荧光素酶表达载体,瞬时转染到293T细胞并进行双荧光素酶报告基因活性检测,表明6个启动子片段均有转录活性,PGL-534的活性最高,其次为PGL-274、PGL-22和PGL-102,最低的为PGL-995。–216~–364区域可能存在负调控基因表达的转录因子结合位点,–364~–825区域可能存在正调控基因表达的转录因子结合位点。
关键词: 华贵栉孔扇贝, MSTN, 启动子, 瞬时转染, 功能分析
花鲈irak4基因cDNA的克隆与表达分析
李富祥, 王鹏飞, 闫路路, 邱丽华
2018, 14(5): 70-79. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2018.05.009
Toll样受体家族信号通路参与了机体特异性免疫和先天性免疫过程,白介素1受体相关激酶4 (IRAK4)是Toll样受体家族信号通路中的重要成员之一。该研究克隆了花鲈(Lateolabrax maculatus) lmirak4序列,并分析了其序列特征、表达模式及亚细胞定位。Lmirak4基因cDNA开放阅读框(ORF)全长942 bp,编码313个氨基酸,含有1个N端死亡结构域和1个中央蛋白激酶结构域。推导的Lmirak4氨基酸序列与其他鱼类Irak4氨基酸序列具有高度一致性。组织分布结果显示,lmirak4在各组织中表达具有差异性,在头肾中表达量最高。感染无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)与哈维弧菌(Vibrio harveyi)后,花鲈头肾、肝脏和脾脏中lmirak4 mRNA的表达水平显著增加。亚细胞定位显示,外源性Lmirak4主要分布于HEK-293T细胞质中,在花鲈头肾原代培养细胞中成功表达但无明显分布差异。
关键词: 花鲈, irak4, 无乳链球菌, 哈维弧菌, 细胞转染
斑节对虾TRIAP1基因的克隆、表达分析以及调控其表达的miRNAs的筛选
刘恩瑞, 赵超, 王鹏飞, 范嗣刚, 闫路路, 邱丽华
2019, 15(4): 88-98. doi: 10.12131/20180285
凋亡抑制因子1 (tumor protein p53 regulated inhibitor of apoptosis 1, TRIAP1)可以通过抑制细胞凋亡参与生物体内应激反应。为探究TRIAP1基因及调控其表达的miRNAs在斑节对虾 (Penaeus monodon) 应对哈氏弧菌(Vibrio harveyi)刺激时的表达调控情况,该研究通过RACE技术获得了斑节对虾TRIAP1基因(PmTRIAP1)cDNA全长序列,并利用实时荧光定量PCR (qRT-PCR)技术,对PmTRIAP1在斑节对虾不同组织中的表达分布模式,以及哈氏弧菌刺激下PmTRIAP1与相关miRNAs的表达关联情况进行了探究。结果显示,PmTRIAP1 cDNA全长2 522 bp,包括11 bp的5'非编码区(UTR)、2 289 bp的3'UTR和222 bp的开放阅读框(ORF),共编码73个氨基酸。PmTRIAP1基因在各组织中均有表达,其中在血细胞中表达量最高;哈氏弧菌刺激下,PmTRIAP1表达量显著降低,而Pm-miR-145-3p和Pm-miR-454-3p表达量显著升高,表明PmTRIAP1和Pm-miR-145-3p、Pm-miR-454-3p的表达量呈负相关关系;双荧光素酶报告实验结果显示,Pm-miR-145-3p和Pm-miR-454-3p可通过结合PmTRIAP1 3'UTR降低荧光素酶活性,表明Pm-miR-145-3p和Pm-miR-454-3p均可靶向调控PmTRIAP1的表达。
关键词: 斑节对虾, TRIAP1, Pm-miR-145-3p, Pm-miR-454-3p, 哈氏弧菌