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合浦珠母贝胸腺素β4 (thymosin beta4)插核损伤和发育时期的表达研究
何文耀, 范嗣刚, 刘宝锁, 张博, 周童, 苏家齐, 邓正华, 喻达辉
2018, 14(2): 66-74. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2018.02.009
胸腺素β4 (thymosin β4)具有抗菌、抑制炎症和促进伤口愈合等作用。该研究克隆了合浦珠母贝(Pinctada fucata)胸腺素β4 (Pfthymosin β4)的基因序列。该基因长261 bp,其中开放阅读框(open reading frame, ORF) 126 bp,编码42个氨基酸。生物信息学分析发现,胸腺素β4的蛋白理论分子量为4.78 ku;具有典型的“THY”特征模体和胸腺素β家族的特征序列;氨基酸序列保守性很高,与其他物种相似性达90%以上。荧光定量PCR结果表明,Pfthymosin β4在各组织中均有表达,其中在血细胞中表达量最高,其次是足与鳃。插核手术后取血细胞和伤口组织,Pfthymosin β4在血细胞和伤口组织的表达量显著升高,第6小时达到最高,推测表达量升高的原因是Pfthymosin β4促进血细胞向伤口处移动来参与合浦珠母贝伤口的前期修复。在各个发育时期中Pfthymosin β4均有表达,在变态期的表达量突然升高,推测其可能参与了合浦珠母贝的变态附着过程。
关键词: 合浦珠母贝, 胸腺素β4, 表达分析, 伤口愈合, 发育时期
合浦珠母贝章鱼胺受体(OAR)基因的克隆与表达分析
王德清, 李海梅, 黄桂菊, 张博, 范嗣刚, 刘宝锁, 苏家齐, 喻达辉
2017, 13(1): 58-65. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2017.01.008
章鱼胺受体(octopamine receptor,OAR)广泛存在于无脊椎动物中,具有调节神经肌源性节奏收缩、调节cAMP水平、参与磷酸化途径等多种重要功能,但其在贝类中的研究却很少。该研究克隆了合浦珠母贝(Pinctada fucata)OAR基因(pfOAR)的cDNA全长序列,比较分析了氨基酸序列的同源性,并采用荧光定量PCR技术检测了该基因在不同组织和幼体不同发育阶段的表达差异以及贝壳损伤后该基因在外套膜中表达水平的变化。结果显示:pfOAR的cDNA全长1 890 bp,开放阅读框1 659 bp,编码552个氨基酸,有7个跨膜结构域,具有G蛋白偶联受体的共性。pfOAR在6个被检测的组织中均有表达,且在外套膜中的表达水平显著高于其他组织;幼体发育过程中pfOAR表达水平逐渐升高,变态期的表达水平显著高于其他时期;人为损伤贝壳36 h后,pfOAR的表达水平显著升高。这些结果表明pfOAR在合浦珠母贝中可能具有多样化的功能,参与了贝壳的形成和修复,为进一步开展pfOAR的功能研究奠定了重要基础。
关键词: 合浦珠母贝, 章鱼胺受体, 生物矿化, 变态发育, 缺刻实验
插核手术损伤对合浦珠母贝抗氧化免疫水平的影响
张博, 孟子豪, 刘宝锁, 李海梅, 苏家齐, 黄桂菊, 吴开畅, 喻达辉
2017, 13(5): 72-77. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2017.05.010
分析了插核手术(未插入珠核及小片)之后合浦珠母贝(Pinctada fucata)闭壳肌、鳃以及外套膜中超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性、总抗氧化能力(TAC)以及丙二醛(MDA)含量的变化, 以探明合浦珠母贝抗氧化免疫系统对插核手术胁迫的响应特点。结果表明, 各组织SOD、CAT活性和TAC基本上均呈现出下降-升高-再下降的波动变化。即大部分在第3小时达到最低水平而于第12小时达到或恢复到最高水平; 相比之下, MDA含量整体上呈不断增高的趋势。相关性分析表明, MDA含量与TAC和CAT活性存在极显著的负相关性(P < 0.01);组织差异对SOD、CAT活性和TAC影响显著(P < 0.05), 不同取样时间对SOD、CAT活性、TAC和MDA含量影响显著(P < 0.05)。研究结果显示插核手术损伤会造成合浦珠母贝抗氧化和免疫水平的波动, 此过程中组织的氧化损伤程度与其抗氧化状态密切相关。
关键词: 合浦珠母贝, 插核手术损伤, 抗氧化水平, 免疫
合浦珠母贝matrilin-1基因的克隆和表达分析
王珍珍, 黄桂菊, 范嗣刚, 刘宝锁, 张博, 苏家齐, 喻达辉
2017, 13(1): 76-84. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2017.01.010
以合浦珠母贝(Pinctada fucata)转录组中的matrilin-1基因片段为基础,开展了matrilin-1的cDNA全长(Pfmatrilin-1)克隆和定量表达分析。Pfmatrilin-1基因cDNA全长2 036 bp,开放阅读框(open reading frame,ORF)1 194 bp,编码397个氨基酸,包括1个信号肽序列和2个血管性血友病因子A(von Willebrand factor A,VWA)样结构域。系统进化分析显示无脊椎动物的matrilins与脊椎动物的matrilins进化关系较远。荧光定量PCR表达分析结果显示,Pfmatrilin-1 mRNA在合浦珠母贝各个组织中均有表达,其中在血液中表达量最高(P < 0.05);Pfmatrilin-1从担轮幼虫期至变态期均有表达,眼点期表达量最高(P < 0.05),而贝类幼虫发育到眼点期就会开始附着,眼点期幼虫原壳生长停滞,次生壳形成,因此推测其可能与次生壳的形成有关。这些结果表明Pfmatrilin-1在合浦珠母贝生物矿化中发挥重要作用。
关键词: 合浦珠母贝, Pfmatrilin-1, 表达谱, 基因克隆
广东汕头南澳和福建东山浮筏的蜈蚣藻属调查
冯彬, 李婷, 张博, 朱长波, 苏家齐, 陈素文, 杨贤庆
doi: 10.12131/20190050
为促进蜈蚣藻属 (Grateloupia)藻类的开发利用,为其食用和加工提供参考,该研究于2018年1—4月间每月1次对广东汕头南澳和福建东山浮筏上的蜈蚣藻属种类组成、生物量、生长环境及不同种类不同生长时期的口感进行了调查。结果显示,调查点的水温和水流速度分别为19~23 ℃ 和 0.039~0.985 m·s−1,福建东山的流速较汕头南澳的大。采用培养观察形态变化、藻体切片以及rbcL序列分析相结合的方法判断这两处浮筏上的蜈蚣藻属为披针形蜈蚣藻 (G. lanceolata)、带形蜈蚣藻 (G. turuturu)、台湾蜈蚣藻 (G. taiwanensis)、肉质蜈蚣藻 (G. carnosa)、舌状蜈蚣藻 (G. livida)、海门蜈蚣藻 (G. haimensis)、长枝蜈蚣藻 (G. prolongata)和稀疏蜈蚣藻 (G. sparsa)。披针形蜈蚣藻和带形蜈蚣藻为优势种,两者最高生物量分别达到901.26 g·m−1和352.9 g·m−1。水流速度较大地方生长的披针形蜈蚣藻体较长(可达142 cm)。长枝蜈蚣藻和带形蜈蚣藻口感最差;披针形蜈蚣藻、舌状蜈蚣藻的口感最好,这2种仅在4月份质地变硬时口感略差。披针形蜈蚣藻生物量多、藻体大且食用口感好,是值得加工为海洋蔬菜的优良种类。
关键词: 蜈蚣藻属, 种类组成, 生物量, 口感, 浮筏