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合浦珠母贝主要形态性状与体质量的灰色关联分析
谭才钢, 刘宝锁, 张东玲, 牛志凯, 张博, 陈明强, 范嗣刚, 姜松, 黄桂菊, 李有宁, 陈素文, 喻达辉
2015, 11(2): 35-40. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2015.02.005
文章采用灰色关联分析方法对合浦珠母贝(Pinctada fucata)12个家系的壳长、壳高、壳宽和绞合线长4个形态性状与体质量的关联度进行了分析和评价。结果显示,12个家系的平均体质量、壳长、壳高、壳宽和绞合线长分别为35.96 g、57.36 mm、59.24 mm、23.55 mm和56.93 mm。各个性状的变异系数较大(8.30%~21.30%),其中壳高和壳宽的变异系数相对较小,而体质量的变异系数相对较大。体质量与各形态性状灰色关联系数之和以壳高为最大(8.950 8),且家系间较均一,壳长为最小(8.189 8),但家系间变化幅度较大。体质量与4个形态性状的关联度大小趋势为壳高(0.745 9)绞合线长(0.714 8)壳宽(0.705 9)壳长(0.682 5)。根据上述结果,可将壳高作为间接选育合浦珠母贝体质量性状的重要评价指标,以提高体质量的选育效率。
关键词: 合浦珠母贝, 形态性状, 灰色关联, 选择育种
合浦珠母贝3个地理群体杂交后代生长性状和闭壳肌拉力的比较分析
牛志凯, 刘宝锁, 张东玲, 谭才钢, 张博, 陈明强1, 范嗣刚, 姜松, 黄桂菊, 李有宁, 喻达辉
2015, 11(1): 26-32. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2015.01.004
利用采自海南三亚(SY)、广东深圳(SZ)和越南(YN)的3个合浦珠母贝(Pinctada fucata)地理群体,按照完全双列杂交构建了9个选育群体。在养殖到20月龄时,从每个群体中随机挑选100个贝,测量4个形态性状(壳长、壳高、壳宽和绞合线长)、4个质量性状(体质量、壳质量、软体部质量和闭壳肌质量)和闭壳肌拉力。相关性分析显示,各性状与闭壳肌拉力均为正相关,与闭壳肌拉力相关系数最大的是壳质量(0.601),体质量(0.564)次之,壳宽(0.320)最小。综合比较形态性状,较优群体是YNSY、SYSZ和YNSZ;综合比较质量性状,较优群体是YNSY、SYSZ和YNSZ;综合比较闭壳肌拉力,较优的群体是YNSY、YNSZ和SZYN;综合筛选出生长性状和闭壳肌拉力都较优的YNSY和YNSZ群体可作为进一步的选育材料。
关键词: 合浦珠母贝, 杂交, 生长性状, 闭壳肌拉力
凡纳滨对虾不同世代生长性状的变异
童馨, 龚世圆, 喻达辉, 杜博, 黄桂菊, 李莉好, 郭奕惠, 李色东
2007, 3(6): 30-33.
对从美国进口选育的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)海南群体(进口亲虾繁育的第1世代,G1)、山东和饶平群体(G2)、湛江2和湛江3群体(G3)、湛江1和上海群体(G4)共7个养殖群体4个世代1150个个体的生长性状体长和体重进行了分析。7个群体的平均体长(范围)分别为14.76(13.25~15.99)、8.46(6.28~10.48)、9.24(4.28~10.70)、7.75(5.13~9.36)、11.38(8.13~14.12)、5.25(3.47~6.83)和7.14(4.14~9.00),变异系数分别为0.04、0.08、0.08、0.09、0.12、0.14、0.14,平均体重(范围)分别为33.41(24.33~39.74)、5.19(1.80~9.68)、6.95(3.18~11.34)、4.62(1.52~9.87)、15.03(6.00~26.96)、1.47(0.48~3.42)、3.29(0.49~6.20),变异系数分别为0.10、0.23、0.21、0.27、0.32、0.39、0.36。体长和体重的变异系数随着繁育世代的增加而增加,其中体重的变异系数每繁殖1代增加10%,其第1代的变异系数与美国选育的亲本群体相同。体长、体重相关与回归分析表明,体长与体重相关极显著(P0.01),体长和体重的回归方程为W=0.01L2.93。表明随着繁育世代的增加,生长性状逐代分化。
关键词: 凡纳滨对虾, 生长性状, 变异系数, 养殖群体
吉富罗非鱼不同选育群体的遗传多样性
李莉好, 喻达辉, 黄桂菊, 杜博, 符云, 童馨, 郭奕惠, 叶卫
2007, 3(5): 40-48.
用微卫星和扩增片段长度多态(amplified fragment length polymorphism,AFLP)分子标记对海南、广州和青岛吉富品系尼罗罗非鱼的遗传多样性和遗传分化进行了研究。9对微卫星引物和4对AFLP引物的分析结果一致。微卫星分析表明,青岛吉富鱼的平均等位基因数(4.8)、平均观测杂合度(0.528)、平均多态信息含量(0.605)最高,海南吉富鱼的平均等位基因数(4.4)、平均观测杂合度(0.479)、平均多态信息含量(0.549)最低。AFLP分析显示,青岛吉富鱼的多态位点比例(48.4%)和基因多样性(0.245)最高,海南吉富鱼的多态位点比例(36.3%)和基因多样性(0.147)最低。这些表明,青岛吉富鱼的遗传多样性最高,海南吉富鱼最低。遗传分化分析表明,两两群体间遗传分化显著(微卫星:FST为0.07~0.11,P0.01;AFLP:FST 为0.24~0.29,P0.01)。AMOVA分析显示,大部分遗传变异(微卫星的分析结果为91.26%;AFLP的为67.6%)来源于群体内个体间,表明吉富鱼选育品系尚具有进一步选育的潜力。
关键词: 吉富罗非鱼, 遗传多样性, 遗传分化, 微卫星DNA, 扩增片段长度多态(AFLP)
添加光合细菌对糙海参幼苗培育阶段的影响研究
姜松, 王军红, 范嗣刚, 温为庚, 黄桂菊, 刘宝锁, 张博, 喻达辉
2014, 10(6): 78-82. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2014.06.011
以受精后24 h孵化出的糙海参(Holothuria scabra)耳状幼体为研究对象,探讨养殖水体不同量光合细菌对糙海参苗期生长、成活、消化道消化酶活性和养殖水体水质变化的影响。试验设4个处理,光合细菌(浓度为11011cfu mL-1)添加量分别是0 mL(组1,对照组)、50 mL(组2)、100 mL(组3)和150 mL(组4),每个处理设3个重复,每个重复放养4104尾幼体于室内水泥池(5 m3 m1.5 m)中,试验周期为41 d。结果表明,试验组的糙海参出苗体质量和成活率均显著高于对照组(P0.05),而组3和组4的体质量和成活率又明显优于组2(P0.05),组3和组4之间的差异不显著(P>0.05)。添加光合细菌还能不同程度地影响糙海参苗体消化道的蛋白酶、淀粉酶和纤维素酶活性,试验组3种酶的活性均显著高于对照组(P0.05),而组3和组4的蛋白酶活性和纤维素酶活性显著高于组2(P0.05),淀粉酶活性在3个试验组之间无显著差异(P>0.05)。在试验第10天后,各试验组氨氮(NH3-N)和亚硝酸盐含量显著低于对照组(P0.05),在试验第20天后,各试验组化学需氧量(COD)的值显著低于对照组(P0.05),而总磷(TP)的差异不大(P>0.05)。表明光合细菌可以促进糙海参幼体的生长,提高消化酶活性和成活率,并改良育苗水体水质。
关键词: 糙海参, 光合细菌, 体质重, 成活率, 消化酶活性, 水质
合浦珠母贝3个家系的AFLP标记分离与遗传多样性研究
王小玉, 喻达辉, 黄桂菊, 郭奕惠, 杜博, 龚世园, 王爱民
2007, 3(5): 54-60.
对AFLP标记在合浦珠母贝(Pinctada fucata)印度家系(印度贝♀印度贝♂,PII)、杂交家系(三亚贝♀印度贝♂,PSI)和三亚家系(三亚贝♀三亚贝♂,PSS)的遗传分离及3个家系的遗传多样性进行了分析。3对引物共产生57个位点,分离位点比例为57.4%~87.7%,符合孟德尔规律的分离位点为70.0%~71.0%;1:1分离位点占总分离位点的24.0%~45.2%,其中杂交家系的比例最高。3个家系的多态位点比例为93.0%~100.0%,总基因多样性为0.460。家系内的基因多样性为PII 0.434,PSI 0.331,PSS 0.366,平均为0.3770.030。家系间的遗传分化显著(GST=0.180)。遗传距离分析表明,PSI与PSS之间的遗传距离最大(0.157),PII与PSS之间的遗传距离最小(0.121)。UPGMA系统树表明,PII和PSS的亲缘关系较近,而PSI与这2个家系较远。上述结果表明,第一代家系的遗传多样性仍很高,但家系之间的遗传分化较大。该研究结果对育种过程中遗传资源管理具有一定指导作用。
关键词: 合浦珠母贝家系, AFLP分子标记, 基因多样性, 遗传分化
合浦珠母贝全同胞家系贝壳珍珠质颜色分析
吴曼, 刘宝锁, 黄桂菊, 陈明强,  郭奕惠, 陈素文, 喻达辉
2014, 10(6): 44-50. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2014.06.006
合浦珠母贝(Pinctada fucata)小片贝的珍珠质颜色直接影响育珠贝所产珍珠的颜色。每个合浦珠母贝的珍珠质颜色都有自己的颜色特征值,即三刺激值和颜色参数。试验选择16个合浦珠母贝全同胞家系,用CSE成像分析色度系统测量并比较各家系左壳内侧外缘珍珠质颜色参数Lab和三刺激值,以筛选适合做插核小片贝的家系。珍珠质的颜色参数明度(L)为98.586~105.234,其中F16家系的明度最大,F3家系的明度最小;a(红绿色品)为-0.967~-6.577,b(黄蓝色品)为5.915~11.237,F14家系色品最偏向于绿色(-a),F16家系色品最偏向于黄色(b)。F3和F14家系贝壳外缘珍珠质的色差(Eab)最大(7.885),肉眼能明显觉察。16个家系的合浦珠母贝都属于白色系列,其中离白光中心最近(a2+b2最小)且个体颜色集中的F1家系最适合用作小片贝来选育培养。
关键词: 合浦珠母贝, 珍珠, 小片贝, 珍珠质颜色
合浦珠母贝骨形态发生蛋白10(BMP10)基因的克隆与表达分析
周代志, 黄桂菊, 刘宝锁, 张博, 姜松, 邓正华, 喻达辉
2016, 12(6): 83-90. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2016.06.011
骨形态发生蛋白(bone morphogenetic proteins, BMPs)具有成骨活性, 在胚胎发育、组织发生、生殖调控等方面也有重要作用, 但在贝类中研究还很少。研究克隆了合浦珠母贝(Pinctada fucata)BMP10基因, 命名为PfBMP10。该基因cDNA长1 752 bp, 包含开放阅读框(ORF)1 344 bp, 编码447个氨基酸。编码蛋白包含一个N端信号肽、一个前结构域和成熟蛋白区。成熟区包含转化生长因子(transforming growth factor beta, TGF-)结构域, 其中含7个半胱氨酸残基。不同发育时期表达分析显示PfBMP10高表达于担轮期和变态期, 提示其可能参与幼体担轮期、变态期的发育调控。组织表达分析显示其在鳃和外套膜高表达, 贝壳缺刻实验显示缺刻处理24 h后其在鳃和外套膜中的表达量均显著上升, 表明PfBMP10可能与贝壳形成相关。研究结果可为BMP家族基因功能及贝壳形成机理研究提供参考。
关键词: 合浦珠母贝, 骨形态发生蛋白10, 贝壳形成, 缺刻实验
企鹅珍珠贝GLUT1 基因全长cDNA 克隆及其对葡萄糖的表达响应
邱萤, 黄桂菊, 刘宝锁, 范嗣刚, 李有宁, 陈明强, 喻达辉
2016, 12(5): 81-89. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2016.05.010
葡萄糖转运蛋白(GLUTs)是能量代谢的关键因子,为了探索GLUT1(glucose transporter type1)在企鹅珍珠贝(Pteria penguin)中的功能,开展了企鹅珍珠贝GLUT1基因的克隆与功能研究。利用RACE技术克隆出企鹅珍珠贝GLUT1基因,并命名为PpGLUT1。该基因cDNA全长为2 068 bp,编码522 个氨基酸,有2个跨膜螺旋区,N端和C端都在胞质侧,分子量为57.226 4 kD,理论等电点为5.17。不同组织荧光定量结果表明,在肠和外套膜中表达量最高,闭壳肌中的表达量显著低于其他组织。0.5 gmL- 1的高质量浓度葡萄糖注射实验表明,在注射后30 min内,肠PpGLUT1表达量升高,在30 min之后表达量逐渐降低,注射后第2小时表达量最低。不同浓度葡萄糖注射实验表明,当葡萄糖质量浓度为0.1~0.4 gmL-1时,PpGLUT1表达量逐渐上升;质量浓度为0.4 gmL-1 时,PpGLUT1表达量最高;大于0.4 gmL-1之后,表达量逐渐降低。上述结果表明,企鹅珍珠贝PpGLUT1主要在肠和外套膜表达, 并对葡萄糖注射有表达响应,可能在上述组织的葡萄糖转运过程中发挥作用。
关键词: 企鹅珍珠贝, GLUT1, 基因克隆, 葡萄糖
育珠对合浦珠母贝N19和Prismalin-14基因表达水平的影响
龙敏明, 黄桂菊, 邹记兴, 郭奕惠, 范嗣刚, 刘宝锁, 喻达辉
2013, 9(5): 58-63. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2013.05.010
为探讨育珠对壳基质蛋白基因表达的影响,开展了合浦珠母贝(Pinctada fucata)N19和Prismalin-14基因在育珠贝和非育珠贝中的荧光定量表达研究。结果显示,N19和Prismalin-14在育珠贝与非育珠贝的闭壳肌、肝胰脏、性腺、肠、鳃等组织中均无表达,在外套膜均有表达;N19在珍珠囊表达,而Prismalin-14则不表达。N19与Prismalin-14在育珠贝外套膜的表达量均大于非育珠贝,表明育珠可能对某些壳基质蛋白的表达具有一定的促进作用。其中Prismalin-14在育珠贝外套膜的表达量最高(P0.01),是非育珠贝外套膜Prismalin-14的1.23倍,是育珠贝外套膜N19的25.04倍,是非育珠贝外套膜N19的41.04倍,推测珍珠贝在生长过程中,对Prismalin-14的需求量可能比N19大。N19在育珠贝珍珠囊中表达量最高(P0.01),是育珠贝N19外套膜的11.58倍,是非育珠贝外套膜的18.97倍,推测在珍珠形成的过程中,对N19的需求量可能比贝壳自身生长对N19的需求量大。
关键词: 壳基质蛋白, 实时荧光定量PCR, 组织表达, 育珠
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