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RNA干扰对大鲵蛙病毒主要功能基因表达及其增殖的影响
牟维豪, 周燕, 耿毅, 汪开毓, 余泽辉, 李亚军, 黄小丽, 欧阳萍, 陈德芳
2017, 13(4): 80-86. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2017.04.010
采用qPCR与病毒滴度测定观察RNA干扰(RNA interference,RNAi)对大鲵蛙病毒(Chinese giant salamander ranavirus,CGSRV)主要衣壳蛋白(major capsid protein, MCP)、甲基转移酶(methyltransferases, MTases)、DNA多聚酶(DNA polymerase)基因表达与病毒增殖的影响。结果表明,小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)能推迟鲤鱼上皮瘤细胞(epithelioma papillosum cyprini,EPC)出现病变,且病变程度也较对照组轻。在各功能基因表达量上,NC-FAM对照组与阴性对照组差异不显著(P>0.05);而干扰组的干扰率极显著高于阴性对照组,其中siR-DP-1组siRNA对MCP基因的干扰率为79%,极显著高于其余组(P<0.01);siR-MT-1、siR-MT-2组siRNA对MTases基因的干扰率为77%,极显著高于其余组(P<0.01);siR-DP-1组siRNA对DNA polymerase基因的干扰率为79%,极显著高于其余组(P<0.01)。干扰实验组病毒滴度与NC-FAM对照组和阴性对照组相比也有不同程度的降低。阴性对照组lgTCID50为8.362,NC-FAM对照组lgTCID50为7.848,siR-MCP、siR-MT、siR-DP实验组最低lgTCID50分别为5.764、5.317、5.362。证实RNAi能够抑制CGSRV主要功能基因的表达并影响病毒的复制。
关键词: 大鲵蛙病毒, RNA干扰, 基因表达, 病毒滴度
拟态弧菌感染黄颡鱼的动态病理损伤及病原分布研究
陈成, 耿毅, 汪开毓, 余泽辉, 陈德芳, 欧阳萍, 黄小丽, 李亚军, 唐俊辉
2017, 13(1): 10-18. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2017.01.002
以1.0×106 CFU · mL-1拟态弧菌(Vibrio mimicus)浸浴感染黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco), 于第0、第4、第8、第16、第24、第36、第48、第60、第72小时剖杀取样,研究病理损伤及病原菌的体内动态分布。结果显示,皮肤肌肉、鳃、肠道出现病变最早,其中皮肤肌肉损伤最严重。第16小时表皮变性、坏死,鳃上皮肿胀,肠绒毛水肿;第24~第48小时表皮坏死、脱落,真皮严重出血,肌纤维变性、坏死,鳃出血,上皮局部坏死,肠上皮变性与灶性坏死;第48~第72小时皮肤肌肉坏死更严重,形成溃疡灶,鳃灶性坏死。肾、肝、脾与心36 h后相继出现不同程度的淤血、出血,变性和灶性坏死。qPCR检测发现,第4小时即在鳃、肠、皮肤肌肉检出病菌,细菌含量分别为1.3×102CFU · mg-1、2.6×102CFU · mg-1、4.7×102CFU · mg-1;鳃与皮肤肌肉中菌量随时间延长而增加,第72小时皮肤肌肉中菌量达到4.5×107CFU · mg-1;第24小时后相继在肾、肝、脾、心检出病菌,菌量介于1.9×10~4.7×102CFU · mg-1之间。结果表明皮肤、鳃和肠道是病菌的入侵位点,并在体内多组织、器官分布。
关键词: 黄颡鱼, 拟态弧菌, 病理损伤, 病原分布
大亚湾黑鲷繁殖特征的生物学研究
陈得仿, 王腾, 刘永, 肖雅元, 王九江, 李纯厚
2019, 15(5): 41-47. doi: 10.12131/20190051
为开展大亚湾黑鲷(Acanthopagrus schlegeli)的增殖和保护,于2018年1月、3月、4月和8—12月共采集了721尾黑鲷样本,研究了大亚湾黑鲷繁殖生物学的周年变化特征。结果表明,1)繁殖期的雌性全长为175~487 mm,均值为 (297.92±56.61) mm,体质量为90.96~1 907.12 g,均值为 (511.36±307.53) g,雄性全长为110~440 mm,均值为 (237.61±61.05) mm,体质量为21.92~1 370.00 g,均值为 (277.76±210.33) g,雌性个体全长显著大于雄性个体全长(P<0.001);2)性腺成熟系数和性腺发育表明大亚湾黑鲷繁殖期为11月至翌年3月;3)具有雌雄同体个体存在,表明该物种会发生性逆转,且表现为雄性个体先成熟再向雌性转变;4) 50%性成熟雌性全长达到248.52 mm,雄性为148.03 mm;5)卵径频率分布表明黑鲷为分批产卵型鱼类,绝对繁殖力为84 100~2 655 168粒,均值为 (728 732±499 547) 粒;全长相对繁殖力为380.54~8 271.55粒·mm−1,均值为 (2 731.44±1 630.93) 粒·mm−1,体质量相对繁殖力为277.58~3 592.83粒·g−1,均值为 (1 443.87±766.82) 粒·g−1,绝对繁殖力与全长、体质量及性腺质量均呈显著线性相关。
关键词: 黑鲷, 性逆转, 性腺成熟系数, 分批产卵, 繁殖力