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合浦珠母贝matrilin-1基因的克隆和表达分析
王珍珍, 黄桂菊, 范嗣刚, 刘宝锁, 张博, 苏家齐, 喻达辉
2017, 13(1): 76-84. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2017.01.010
以合浦珠母贝(Pinctada fucata)转录组中的matrilin-1基因片段为基础,开展了matrilin-1的cDNA全长(Pfmatrilin-1)克隆和定量表达分析。Pfmatrilin-1基因cDNA全长2 036 bp,开放阅读框(open reading frame,ORF)1 194 bp,编码397个氨基酸,包括1个信号肽序列和2个血管性血友病因子A(von Willebrand factor A,VWA)样结构域。系统进化分析显示无脊椎动物的matrilins与脊椎动物的matrilins进化关系较远。荧光定量PCR表达分析结果显示,Pfmatrilin-1 mRNA在合浦珠母贝各个组织中均有表达,其中在血液中表达量最高(P < 0.05);Pfmatrilin-1从担轮幼虫期至变态期均有表达,眼点期表达量最高(P < 0.05),而贝类幼虫发育到眼点期就会开始附着,眼点期幼虫原壳生长停滞,次生壳形成,因此推测其可能与次生壳的形成有关。这些结果表明Pfmatrilin-1在合浦珠母贝生物矿化中发挥重要作用。
关键词: 合浦珠母贝, Pfmatrilin-1, 表达谱, 基因克隆