留言板

尊敬的读者、作者、审稿人, 关于本刊的投稿、审稿、编辑和出版的任何问题, 您可以本页添加留言。我们将尽快给您答复。谢谢您的支持!

姓名
邮箱
手机号码
标题
留言内容
验证码
合浦珠母贝胸腺素β4 (thymosin beta4)插核损伤和发育时期的表达研究
何文耀, 范嗣刚, 刘宝锁, 张博, 周童, 苏家齐, 邓正华, 喻达辉
2018, 14(2): 66-74. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2018.02.009
胸腺素β4 (thymosin β4)具有抗菌、抑制炎症和促进伤口愈合等作用。该研究克隆了合浦珠母贝(Pinctada fucata)胸腺素β4 (Pfthymosin β4)的基因序列。该基因长261 bp,其中开放阅读框(open reading frame, ORF) 126 bp,编码42个氨基酸。生物信息学分析发现,胸腺素β4的蛋白理论分子量为4.78 ku;具有典型的“THY”特征模体和胸腺素β家族的特征序列;氨基酸序列保守性很高,与其他物种相似性达90%以上。荧光定量PCR结果表明,Pfthymosin β4在各组织中均有表达,其中在血细胞中表达量最高,其次是足与鳃。插核手术后取血细胞和伤口组织,Pfthymosin β4在血细胞和伤口组织的表达量显著升高,第6小时达到最高,推测表达量升高的原因是Pfthymosin β4促进血细胞向伤口处移动来参与合浦珠母贝伤口的前期修复。在各个发育时期中Pfthymosin β4均有表达,在变态期的表达量突然升高,推测其可能参与了合浦珠母贝的变态附着过程。
关键词: 合浦珠母贝, 胸腺素β4, 表达分析, 伤口愈合, 发育时期
合浦珠母贝章鱼胺受体(OAR)基因的克隆与表达分析
王德清, 李海梅, 黄桂菊, 张博, 范嗣刚, 刘宝锁, 苏家齐, 喻达辉
2017, 13(1): 58-65. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2017.01.008
章鱼胺受体(octopamine receptor,OAR)广泛存在于无脊椎动物中,具有调节神经肌源性节奏收缩、调节cAMP水平、参与磷酸化途径等多种重要功能,但其在贝类中的研究却很少。该研究克隆了合浦珠母贝(Pinctada fucata)OAR基因(pfOAR)的cDNA全长序列,比较分析了氨基酸序列的同源性,并采用荧光定量PCR技术检测了该基因在不同组织和幼体不同发育阶段的表达差异以及贝壳损伤后该基因在外套膜中表达水平的变化。结果显示:pfOAR的cDNA全长1 890 bp,开放阅读框1 659 bp,编码552个氨基酸,有7个跨膜结构域,具有G蛋白偶联受体的共性。pfOAR在6个被检测的组织中均有表达,且在外套膜中的表达水平显著高于其他组织;幼体发育过程中pfOAR表达水平逐渐升高,变态期的表达水平显著高于其他时期;人为损伤贝壳36 h后,pfOAR的表达水平显著升高。这些结果表明pfOAR在合浦珠母贝中可能具有多样化的功能,参与了贝壳的形成和修复,为进一步开展pfOAR的功能研究奠定了重要基础。
关键词: 合浦珠母贝, 章鱼胺受体, 生物矿化, 变态发育, 缺刻实验
卵形鲳鲹AQP1a分子特征及其对急性盐度胁迫的表达响应
赵超平, 郭华阳, 张健, 朱克诚, 郭梁, 张楠, 刘宝锁, 杨静文, 张殿昌
2018, 14(4): 56-65. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2018.04.007
水通道蛋白(aquaporin,AQPs)是由内在膜蛋白组成的超家族,介导水分子的跨膜运输,对渗透压调节具有重要作用。为研究AQP1a在急性盐度胁迫下对卵形鲳鲹 (Trachinotus ovatus)的渗透压调节作用,该研究获得AQP1a基因。基因全长1 078 bp,开放阅读框786 bp,编码261个氨基酸,具有MIP家族特有序列(HINPAVTLG)和2个天冬酰胺−脯氨酸−丙氨酸蛋白基序。qRT-PCR结果显示,AQP1a在11个被测组织中均有表达,在性腺中的表达量最高,其次是鳃和肠,在肌肉中表达量最低。在急性盐度胁迫下,当转入淡水时,AQP1a在鳃的表达量在第4小时显著上升,而在肾和肠中没有显著变化;当转入盐度10和20海水时,鳃中AQP1a的表达量在第2和第4小时显著升高,然后下降趋于稳定;转入盐度10海水时,肠中AQP1a的表达量均上升,肾中AQP1a的表达量呈先上升后下降趋势;转入盐度20海水时,肠中AQP1a的表达量仅在第4、第8和第48小时显著上升,肾中AQP1a的表达量在第12小时达到最大;转入盐度40海水中,鳃中AQP1a的表达量明显下降,相反,在肾和肠中AQP1a的表达量均明显上调。这些结果反映了AQP1a在不同组织中的功能特异性,证实了AQP1a在卵形鲳鲹盐度适应中起重要作用。
关键词: 卵形鲳鲹, 水通道蛋白, 渗透压调节, 急性盐度胁迫
插核手术损伤对合浦珠母贝抗氧化免疫水平的影响
张博, 孟子豪, 刘宝锁, 李海梅, 苏家齐, 黄桂菊, 吴开畅, 喻达辉
2017, 13(5): 72-77. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2017.05.010
分析了插核手术(未插入珠核及小片)之后合浦珠母贝(Pinctada fucata)闭壳肌、鳃以及外套膜中超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性、总抗氧化能力(TAC)以及丙二醛(MDA)含量的变化, 以探明合浦珠母贝抗氧化免疫系统对插核手术胁迫的响应特点。结果表明, 各组织SOD、CAT活性和TAC基本上均呈现出下降-升高-再下降的波动变化。即大部分在第3小时达到最低水平而于第12小时达到或恢复到最高水平; 相比之下, MDA含量整体上呈不断增高的趋势。相关性分析表明, MDA含量与TAC和CAT活性存在极显著的负相关性(P < 0.01);组织差异对SOD、CAT活性和TAC影响显著(P < 0.05), 不同取样时间对SOD、CAT活性、TAC和MDA含量影响显著(P < 0.05)。研究结果显示插核手术损伤会造成合浦珠母贝抗氧化和免疫水平的波动, 此过程中组织的氧化损伤程度与其抗氧化状态密切相关。
关键词: 合浦珠母贝, 插核手术损伤, 抗氧化水平, 免疫
DNA条形码在篮子鱼科鱼类种类鉴定和系统进化分析中的应用
闫亚利, 张楠, 郭华阳, 郭梁, 朱克诚, 刘宝锁, 张殿昌
2019, 15(1): 100-105. doi: 10.12131/20180083
为建立篮子鱼科鱼类物种快速鉴定方法,该研究扩增获得了篮子鱼科10种鱼类的46条线粒体COⅠ基因序列,结合从BOLD和GenBank上筛选出的12种27条篮子鱼科COⅠ基因序列,分析篮子鱼科鱼类的COⅠ基因片段序列特征、种间和种内遗传距离及分子系统进化关系。结果表明,19种73条篮子鱼科COⅠ基因序列的平均碱基组成为T:28.9%、C:28.7%、A:24.6%、G:17.8%。G+C的含量(46.5%)低于A+T的含量(53.5%),碱基组成表现出明显的偏倚性;篮子鱼科鱼类的种间平均遗传距离为0.098,是种内平均遗传距离(0.002)的49倍;基于19种篮子鱼科鱼类的COⅠ序列的系统进化分析结果显示,19种篮子鱼中仅单斑篮子鱼(Siganus unimaculatus)和狐篮子鱼(S. vulpinus)聚类在一起,形成1个分支,剩余17种(89.5%)篮子鱼相同种内个体各自聚为一支,形成17个独立的分支。结果表明基于COⅠ基因的DNA条形码技术可应用于篮子鱼科物种鉴定。
关键词: 篮子鱼科, COⅠ基因, DNA条形码
合浦珠母贝BMP7b基因的克隆与表达分析
范嗣刚, 周代志, 刘宝锁, 邓正华, 郭奕惠, 喻达辉
2018, 14(1): 121-126. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2018.01.016
为了解骨形态发生蛋白(BMP)在贝类生物矿化方面的作用,该研究发现并克隆了合浦珠母贝(Pinctada fucata) BMP7的同源基因BMP7b,并对其进行了组织表达分析。结果显示,该基因cDNA长2 464 bp,其中ORF长1 194 bp,编码397个氨基酸。BMP7b蛋白无跨膜结构,含有1个信号肽(1~26 aa),1个TGF-β前肽结构域(25~240 aa)和1个TGF-β结构域(299~396 aa)。BMP7b在各组织和各胚胎发育时期中均有表达,在鳃和外套膜的表达量高,在肠和肝胰腺的表达量低;在担轮幼虫期的表达量远远高于其他时期。贝壳缺刻实验显示24 h后,BMP7b表达量显著上升。以上结果表明BMP7b可能在合浦珠母贝贝壳形成和修护过程中起重要作用。
关键词: 合浦珠母贝, BMP7b, 时空表达模式, 贝壳形成与修复
类胡萝卜素对合浦珠母贝热休克蛋白基因HSP22表达的影响
周童, 刘宝锁, 张博, 孟子豪, 何文耀, 喻达辉
2018, 14(5): 60-69. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2018.05.008
该研究获得了合浦珠母贝(Pinctada fucata)热休克蛋白22 (heat shock protein 22,PfHSP22)基因cDNA序列,全长2 187 bp,其中开放阅读框699 bp,预测编码232个氨基酸。结构预测显示PfHSP22具有小热休克蛋白家族典型结构域“α-晶体结构域”(ACD)。氨基酸序列比对结果显示,PfHSP22与缢蛏(Sinonovacula constricta)的HSP22相似性最高(54%)。进化分析显示,PfHSP22与软体动物的亲缘关系较近。实时荧光定量PCR结果分析表明,常温条件下,PfHSP22在类胡萝卜素含量高的橘色组和含量低的白色组的各组织中均有表达,足中表达量最高,且橘色组均显著高于白色组(P<0.05),表明类胡萝卜素含量高低可能影响PfHSP22的基础表达量。高温胁迫时,橘色组和白色组各组织的PfHSP22表达量在前3 h基本呈现下降趋势,之后呈现出或升高或下降的复杂变化;其中橘色组一些组织的PfHSP22表达量显著升高时间晚于白色组,这可能是由类胡萝卜素含量差异引起。
关键词: 合浦珠母贝, HSP22, 类胡萝卜素, 表达分析, 小热休克蛋白
发酵豆粕替代鱼粉对卵形鲳鲹生长和血清生化的影响
李秀玲, 刘宝锁, 张楠, 郭梁, 江世贵, 张殿昌
2019, 15(4): 68-75. doi: 10.12131/20190041
为探讨发酵豆粕替代鱼粉对卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)生长和血清生化的影响,该研究以鱼粉(fish meal,FM)为基础蛋白源配制了5组饲料[分别添加0% (FM)、25% (FSM25)、50% (FSM50)、75% (FSM75)和100% (FSM100)的发酵豆粕 (fermented soybean meal,FSM)替代鱼粉]。为消除限制性氨基酸的影响,分别添加0%、0.10%、0.22%、0.35%和0.45%的赖氨酸及0%、0.14%、0.27%、0.41%和0.54%的蛋氨酸。结果显示,FSM25和FSM50组的增重率、特定生长率、肥满度和采食量与FM组无显著差异(P>0.05),FSM100组饲料系数显著高于FM组(P< 0.05)。发酵豆粕各组的肌肉水分、灰分、粗蛋白和粗脂肪含量与FM组相比无显著差异(P>0.05)。FSM75和FSM100组血清中的谷草转氨酶(AST)活性和总蛋白(TP)含量分别显著高于和低于FM组(P<0.05),FSM100组谷丙转氨酶(ALT)和超氧化物歧化酶(SOD)活性显著高于FM组(P<0.05)。FSM75和FSM100组肝脏IGF-1和GH基因表达量显著低于FM组(P<0.05)。综上,在添加限制性氨基酸条件下,发酵豆粕替代鱼粉不超过50%不会对卵形鲳鲹产生不利影响,根据回归曲线得出最佳替代水平为17.5%。
关键词: 卵形鲳鲹, 发酵豆粕, 生长性能, 血清生化, 生长相关基因