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2014年  10卷  第5期

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研究论文
养殖杂交鳢迟缓爱德华氏菌的分离鉴定
陈言峰, 周爱国, 陈冠锋, 陈建酬, 张继平, 张辉华
2014, 10(5): 1-7. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2014.05.001
摘要:
从患病杂交鳢[斑鳢(Channa maculata)♀乌鳢(C.argus) ♂]体内分离到2株致病菌(ZS201364-1和ZS201364-2),通过对其生化特性与16SrRNA基因序列进行分析,确定为迟缓爱德华菌(Edwardsiellatarda)。该致病菌兼性厌氧,为革兰氏阴性短杆菌,能运动,能发酵葡萄糖、麦芽糖。吲哚试验和MR试验均为阳性。2株致病菌对杂交鳢的半致死剂量(LD50)分别为7.1105cfug-1和5.6105cfug-1。ZS201364-1最适生长温度为25~35℃、pH为7~8、氧化纳(NaCl)质量分数为1%,对头孢噻肟、环丙沙星、诺氟沙星等抗生素高度敏感。
嗜水气单胞菌与温和气单胞菌的LAMP检测方法的建立
李嘉彬, 马艳平, 柯浩, 郝乐, 刘振兴, 马江耀, 梁志凌, 李玉谷
2014, 10(5): 8-16. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2014.05.002
摘要:
利用环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)分别建立嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,AH)与温和气单胞菌(A.sobria,AS)的快速检测方法。针对嗜水气单胞菌pilin基因、温和气单胞菌zipA基因设计特异性LAMP引物。在恒温条件下利用实时浊度仪对2组引物进行特异性和灵敏度试验,并以琼脂糖凝胶电泳和核酸染料颜色变化对扩增结果进行判定。结果显示,LAMP实时浊度法能够特异地检测嗜水气单胞菌和温和气单胞菌,最低检出限分别为46 fgmL-1和320 fgmL-1,是普通PCR方法的104倍和102倍;并能应用于已知临床样品检测。该研究建立的嗜水气单胞菌与温和气单胞菌LAMP快速检测方法具有高效、特异、灵敏的特点。
罗非鱼无乳链球菌LrrG-Sip融合基因原核表达载体的构建及表达
曾祖聪, 曹建萌, 卢迈新, 可小丽, 刘志刚, 高风英, 朱华平
2014, 10(5): 17-23. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2014.05.003
摘要:
LrrG和表面免疫原性蛋白(Sip)是无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)的2种表面蛋白,具有良好的免疫原性。为获得罗非鱼无乳链球菌表面蛋白LrrG和Sip蛋白的融合蛋白,该试验采用基因拼接技术中的双酶切法分2步逐个将Sip和LrrG基因插入pColdⅡ载体中,构建原核表达载体pCold Ⅱ-LrrG-Sip。将成功构建的融合基因原核表达载体转化感受态细胞BL21(DE3),进行诱导表达条件的优化。结果显示,15 ℃、IPTG 0.5 mmolL-1、诱导9 h,目的蛋白呈可溶状态的表达量最高。Western Blot检测结果显示LrrG-Sip融合蛋白大小与预测一致(162 kDa),说明成功构建了融合基因,为罗非鱼源无乳链球菌亚单位疫苗的研制奠定了基础。
温度对红鳍东方鲀早期生长和性别分化的影响
刘永新, 周勤, 张红涛, 姜长波, 张福崇
2014, 10(5): 24-29. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2014.05.004
摘要:
研究了全同胞家系的红鳍东方鲀(Takifugu rubripes)早期幼苗在4个不同温度(15 ℃、17 ℃、19 ℃和正常养殖温度21~25 ℃)条件下,水温对其生长性状和雌雄性别组合的影响。结果表明,培育温度越低,鱼苗生长速度越慢。对照组(正常养殖温度21~25 ℃)的幼苗生长最快,其次依次为19 ℃、17 ℃和15 ℃。30~90日龄,不同温度处理组绝对增长率和生长指标具有相似变化趋势。70日龄前,正常养殖温度组的绝对增长率和生长指标最高;80~90日龄,19 ℃组最高。统计180日龄各温度组雄性和雌性个体比例,利用组织学切片法辨别雄雌。15 ℃组雄性和雌性比例为86.67%和13.33%,17 ℃组为70.00%和30.00%,19 ℃组为56.67%和43.33%,正常养殖温度组为53.33%和46.67%。低温能够有效提高红鳍东方鲀家系雄性个体比例,15 ℃组为最佳诱导温度处理组。
不同营养盐水平对芋根江蓠的生长及生化组分的影响
黄中坚, 钟志海, 宋志民, 刘涛, 陈伟洲, 唐贤明
2014, 10(5): 30-38. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2014.05.005
摘要:
为探讨适宜大型海藻芋根江蓠(Gracilaria blodgettii)栽培的生态条件,分别测定了在不同总无机氮浓度(48 molL-1、96 molL-1、144 molL-1、192 molL-1、240 molL-1、288 molL-1和336 molL-1)和不同氮磷比(N/P)(1/1、5/1、10/1、50/1和100/1)的培养条件下,芋根江蓠藻体的相对生长速率(RGR)和生化组分的变化。结果表明,最适总无机氮浓度为192 molL-1,最适N/P为10/1。芋根江蓠适宜在氨氮(NH4+-N)比例较高的海水中生长,3种无机氮最适合质量比值是m[硝氮(NO3--N)]:m(NH4+-N)∶m[亚硝氮(NO2--N)]=1:10:5和m(NO3--N):m(NH4+-N):m(NO2--N)=5:10:1。在最适宜的营养盐因子环境条件下,芋根江蓠在生化组分(光合色素及可溶性蛋白)和抗氧化能力等方面都表现较好;而在海水总无机氮浓度过低、N/P过高以及NH4+-N在总无机氮中所占比例较低等条件下,都不利于藻体正常生长,会导致藻体营养不良、生长缓慢。
养殖密度对温室湿地循环水系统中鲫生长、生理及免疫指标的影响
吴宗凡, 时旭, 程果锋, 王小冬, 刘兴国, 顾兆俊
2014, 10(5): 39-44. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2014.05.006
摘要:
研究了基于两级人工湿地的温室循环水系统中,养殖密度对鲫(Carassius cuvieri)生长、脏器系数、血清生理免疫指标及对嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)抵抗力的影响。试验设2 kgm-3、4 kgm-3、8 kgm-3和16 kgm-3 共4种密度组,每组2个平行,养殖68 d。结果显示:1)各养殖密度下鲫生长及脏器系数不存在显著差异;2)与2 kgm-3组鲫相比,16 kgm-3组鲫血清丙二醛(MDA)质量摩尔浓度,溶菌酶(LSZ)、酸性磷酸酶(ACP)和碱性磷酸酶(AKP)活性显著降低,超氧化物歧化酶(SOD)活性和总蛋白质量浓度虽有不同程度升高,但差异不显著;3)高密度组鲫对嗜水气单胞菌的抵抗力较低密度组弱。以上结果表明,如果以生长为考量指标,温室湿地循环水系统中鲫养殖密度可达16 kgm-3,但如此高的密度会对鲫免疫力造成负面影响。
卵形鲳鲹尾部骨骼胚后发育研究
郑攀龙, 马振华, 郭华阳, 李有宁, 张殿昌, 江世贵
2014, 10(5): 45-50. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2014.05.007
摘要:
文章采用阿利新蓝-茜素红双染色法对孵化后第1~第18天卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)仔稚鱼尾骨骨骼发育进行了系统研究。研究表明,孵化后第18天卵形鲳鲹尾部骨骼分化为尾下骨(Hy)、尾上骨(Ep)、尾下骨旁骨(Phy)及尾神经骨(Urn)。孵化后第7天,仔鱼尾部出现第1片尾下骨(Hy1)。孵化后第9天,Hy1与Hy2及Phy在尾部同时出现。孵化后第9~第15天,伴随着Hy3和Hy4的出现,脊索矿化接近尾区,同时脉棘(Mhs)和髓棘(Mns)相继出现。孵化后第15天,3片Ep已经完全分化出来。孵化后第15~第18天,Hy5在尾部分化出来,且各骨片轮廓变清晰。文章探索了卵形鲳鲹胚后发育过程中尾部骨骼发育的特征,为卵形鲳鲹骨骼发育研究奠定了基础。
3种鲣鱼背部肌肉的营养成分分析及评价
童铃, 金毅, 徐坤华, 戴志远
2014, 10(5): 51-59. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2014.05.008
摘要:
分析与评价了鲣(Katsuwonus pelamis)、东方狐鲣(Sarda orientalis)和扁舵鲣(Auxis thazard)3种鲣鱼背部肌肉的营养成分。结果显示:1)3种鲣鱼的粗蛋白质量分数为22.86%~24.65%,粗脂肪质量分数为1.41%~2.51%,3种鲣鱼均含有丰富的常量和微量元素;2)鲣和东方狐鲣背部肌肉均检出17种脂肪酸,而扁舵鲣检出23种,其PUFA/SFA分别为1.17、0.93和1.14,n-6/n-3系PUFA值分别为0.07、0.04和0.11,此外,鲣背部肌肉的多不饱和脂肪酸相对质量分数为38.98%,高于东方狐鲣的33.64%和扁舵鲣的37.93%;3)东方狐鲣背部肌肉的必需氨基酸质量分数和必需氨基酸指数(EAAI)分别为35.10%和0.90,略高于鲣的33.95%和0.89与扁舵鲣的32.51%和0.89。
东南太平洋智利竹筴鱼中心渔场的月间变动研究
陈春光, 张敏, 邹晓荣, 陆奇巍, 许啸, 梁严威
2014, 10(5): 60-67. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2014.05.009
摘要:
根据2003年~2011年中国东南太平洋智利竹筴鱼(Trachurus murphyi)大型拖网渔捞数据和海表温度(SST数据,利用 ArcGIS10.0绘制渔场产量重心时空分布图,用最短距离法对中心渔场进行聚类,对智利竹筴鱼渔场月间重心变动规律及其与SST之间的关系进行分析。结果表明,随着月份的变化,中心渔场从3月开始由南逐渐向西北方向移动,到10月之后逐渐向东南方向移动。3月~6月渔场主要分布在80W~90W、40S~45S,最适宜SST为12~14C;7月~8月渔场主要分布在80W~90W、35S~40S,SST为13~14 ℃;9~10月渔场分布为85~95W、30S~35S,SST为15~16℃;11月~12月渔场分布在90W~95W、30S~40S,SST为16~17℃;而1月~2月渔场分布在85W~95W、35S~45S,最适宜SST为16~17 ℃。
桂山牛头岛出坞航道水下爆破对游泳生物的影响评估
黄梓荣, 于杰, 范江涛, 冉娟, 郑兆勇
2014, 10(5): 68-74. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2014.05.010
摘要:
文章根据2012年12月在珠江口桂山牛头岛出坞航道水下炸礁鱼类吊笼试验,对游泳生物的影响进行分析评估。结果表明,随着距离的增加,鱼类续后死亡的个数逐渐减少。解剖得出,水下爆破对试验鱼的鱼体、鱼鳃、腔壁、耳石、内脏均有不同程度的影响,大多与爆破点距离远近关系密切,表现为离爆破点距离近的影响程度大,离爆破点距离远的影响程度小。计算得出直接损失质量和损失个体量分别为167.215 kg和29 076 尾。利用以往回归经验公式计算和实测鱼类死亡率,结合3次试验结果,通过二元线性回归对鱼类死亡率与爆破距离和炸药量之间的关系进行拟合分析,得出游泳生物死亡率经验公式。
研究简报
花刺参钙调蛋白cDNA克隆及组织分布
李五湖, 任春华, 胡超群, 江晓, 钟鸣
2014, 10(5): 75-81. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2014.05.011
摘要:
钙调蛋白(calmodulin,CaM)是一种钙离子(Ca2+)结合蛋白,在钙信号传导过程中起重要作用。文章扩增到花刺参(Stichopus monotuberculatus)钙调蛋白(命名为StmCaM)cDNA全长序列。StmCaM cDNA全长1 394 bp,其中5UTR长138 bp,3UTR长806 bp,ORF为450 bp。ORF推导出的StmCaM含149个氨基酸(包含起始蛋白酸),其预测分子量约为16.7 kD,理论等电点为4.1。StmCaM氨基酸序列与其他物种的钙调蛋白高度相似,相似度百分比为95.9%~98.0%。采用realtime PCR分析StmCaM基因在花刺参不同组织中的表达,结果显示其在呼吸树中表达量最高,体腔细胞、肠次之,而体壁中表达量最低,几乎检测不到。
南海区驯养条石鲷亲鱼的初次性成熟和产卵
区又君, 李加儿, 林锋
2014, 10(5): 82-86. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2014.05.012
摘要:
2008年4月初在广东省饶平县对2006年5月人工孵化和培育的2龄条石鲷(Oplegnathus fasciatus)成熟亲鱼进行激素诱导,研究和观察条石鲷亲鱼初次性成熟的繁殖生物学。结果显示,在南海区全人工养殖的条石鲷亲鱼初次性成熟年龄为2龄,成熟亲鱼的最小型为全长245 mm、体质量610 g,最大个体为全长300 mm、体质量1 450 g;产卵季节为4月10日~7月15日,产卵盛期为4月中旬至6月下旬;为升温产卵型鱼类,产卵温度为20.0~28.8 ℃,适宜的产卵温度为20.7~27.6 ℃;雌、雄亲鱼发育同步,个体大小和成熟年龄差别不大;雌鱼属于一年一次分批产卵类型,产卵期超过3个月;24尾初次性成熟雌性亲鱼的总产卵量为3 180.0104粒,日最高产卵量为341.5104粒;其产卵量和受精卵质量与水温的变化关系密切,受精卵的浮卵率随温度的变化而变化,在水温相对衡定时,浮卵率相对稳定并维持在80%~95%的较高水平;受精卵平均卵径为(0.8600.023)mm,油球径为(0.1910.009)mm。
草鱼-淀粉酶基因5,侧翼序列克隆与分析
朱书礼, 李新辉, 杨计平, 李跃飞, 李捷, 帅方敏, 李琳
2014, 10(5): 87-93. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2014.05.013
摘要:
应用PCR和Genome Walking技术克隆获得长度为168 bp的草鱼(Ctenopharyngodon idellus)-淀粉酶基因外显子Ⅰ序列和2 063 bp的5'侧翼序列。将草鱼-淀粉酶基因外显子Ⅰ序列与已知几种鱼类-淀粉酶基因外显子Ⅰ序列比对,相似度为68%~86%。将草鱼-淀粉酶基因5'侧翼序列进行生物信息学分析,确定了其转录起始区域及转录起始位点(TSS);在TSS上游30 bp处有1个TATA-box,-58 bp处有CCAAT-box;在5'侧翼序列中还发现有GATA-1、OCT-1、GR、HNF-3、AP1和SP1等转录因子结合位点。草鱼-淀粉酶基因5' 侧翼序列的克隆,为进一步研究不同食性鱼类-淀粉酶基因侧翼序列的差异、鱼类-淀粉酶基因的表达、功能及调控机理奠定基础。
综述
方格星虫繁育、养殖及研究开发进展
李俊伟, 朱长波, 颉晓勇, 郭永坚, 陈素文
2014, 10(5): 94-98. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2014.05.014
摘要:
方格星虫(Sipunculus nudus)是中国重要的经济类底栖动物,具有重要的食用价值和药用价值。由于近年来过度捕获造成自然资源匮乏,亟待养殖技术和繁育技术的提高以满足食用和药用研究需求。关于方格星虫的研究目前多集中在繁殖发育、营养和药用价值等方面。目前方格星虫的繁育技术已经初步成功,其养殖规模有望扩大,但是其生产方式和池塘养殖技术仍有待深入研究。文章综述了有关方格星虫分类、养殖生态、繁育、营养及其增养殖技术等方面研究,以期为方格星虫养殖产业的发展与研究开发提供参考。
里氏木霉产纤维素酶的研究及其应用
张家松, 董宏标, 段亚飞, 李卓佳, 杨莺莺
2014, 10(5): 99-104. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2014.05.015
摘要:
有机碳是加快驱动氮循环的最主要物质之一,协助降解养殖水环境中的有毒氮污染,是维护养殖水环境的重要物质。地球上分布最广、蕴藏量最丰富的可再生资源之一是纤维素,而纤维素酶能降解纤维素的-1,4-葡萄糖苷键以生成葡萄糖或其他可溶性糖,可以作为水产养殖所用的有机碳。研究表明,里氏木霉(Trichoderma reesei)所分泌的纤维素酶具有产酶量高、稳定性好、适应性强等优点,是目前应用最为广泛的纤维素酶。文章综述了里氏木霉所产纤维素酶的结构、组分及酶活机制,介绍了里氏木霉菌种人工选育及基因工程改造等研究,展望了纤维素酶在食品、纺织、饲料、农业等多种行业的应用。