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2017年  13卷  第6期

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2017, 13(6): 0-0.
摘要:
研究论文
大黄鱼gsdfamh基因的克隆及表达分析
林爱强, 谢仰杰, 徐双斌, 叶坤, 龚诗琦, 王志勇
2017, 13(6): 1-13. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2017.06.001
摘要:
该研究克隆了大黄鱼(Larimichthys croceagsdf (gonadal soma derived factor)和amh (anti-Müllerian hormone)基因的开放阅读框序列并对它们的表达进行分析。大黄鱼gsdf基因cDNA序列开放阅读框长为618 bp,可编码205个氨基酸,含有信号肽和TGF-β结构域。系统进化分析显示,大黄鱼Gsdf与其他鱼类Gsdf聚为一枝,而与TGF-β超家族其他成员分开。Amh基因cDNA序列开放阅读框为1 563 bp,可编码520个氨基酸,含有信号肽、AMH-N区域和TGF-β保守结构域。系统进化分析显示,大黄鱼Amh与舌齿鲈(Dicentrarchus labrax)Amh进化关系最近。荧光定量PCR表达分析显示,gsdfamh基因主要在大黄鱼性腺表达,在精巢中的表达量显著高于卵巢(P < 0.05),2个基因都在性腺分化前开始表达,在雄鱼精巢中表达量呈现先升高后下降的趋势,在卵巢的表达量很低。此外,相比于正常雌鱼,gsdfamh基因在伪雄鱼(遗传性雌鱼)性腺中的表达量显著上调。这些结果表明,gsdfamh基因在大黄鱼性腺分化过程中起到重要的作用。
九孔鲍α-淀粉酶基因克隆、表达分析及与生长性状相关性
栗志民, 钱佳慧, 刘建勇, 艾加林, 檀克勤
2017, 13(6): 14-21. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2017.06.002
摘要:
实验采用cDNA末端快速扩增(RACE)和反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术对九孔鲍(Haliotis diversicolor supertexta)α-淀粉酶基因cDNA进行克隆,并分析该基因的组织表达及其与生长性状的相关性。结果表明,九孔鲍α-淀粉酶基因cDNA全长为2 260 bp,其中开放阅读框长度为2 088 bp,共编码695个氨基酸。经SingalP分析,α-淀粉酶多肽链中含有信号肽结构,且长度为18个氨基酸(MWAQYGIVSALLVLSASA),由该多肽链折叠成的三级结构中含有domain A、domain C 2个结构域,并且在domain A第28~第396氨基酸处存在催化中心。该基因在九孔鲍右侧壳肌、肠、肝脏、胃、外套膜、吻、腹足7种组织中均有不同程度表达。其中在胃中表达量最高,表达量高达326.803;而在外套膜中表达量最低,表达量仅为0.35。经ANOVA分析,消化组织与非消化组织间的α-淀粉酶基因表达量存在显著差异(P < 0.05)。α-淀粉酶基因mRNA表达量与生长性状呈显著正相关(P < 0.05)。
梭子蟹肌孢虫SYBR Green I实时定量PCR检测方法的建立与应用
陈甜甜, 房文红, 王元, 李新苍, 赵姝, 周俊芳
2017, 13(6): 22-29. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2017.06.003
摘要:
梭子蟹肌孢虫(Ameson portunus)是感染三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)的常见病原之一,该研究以其SSU rRNA基因为靶标建立了SYBR Green I实时定量PCR检测方法。结果显示:该方法扩增效率为101.45%,检测灵敏度下限可达2.0×101 拷贝·μL-1,特异性、组内重复性和组间重复性均好。利用该荧光定量PCR方法对一批来自“牙膏病”流行区的养殖三疣梭子蟹样品进行检测,梭子蟹肌孢虫检出率为82.35%。检测结果显示,活蟹的每毫克肌肉平均带虫量大幅低于死蟹,表明该地区梭子蟹的死亡与肌孢虫的感染密切相关,而且,当梭子蟹肌孢虫载量达到1.0×109 拷贝·mg-1时三疣梭子蟹存在暴发疾病甚至死亡的风险。另外,通过对比检测发现,梭子蟹肌孢虫套式PCR方法对这批样品的检出率为64.71%,表明该研究建立的荧光定量PCR方法具有更高的灵敏度。
草鱼jam-a基因的克隆及表达分析
田园园, 焦真真, 董浚键, 孙成飞, 马冬梅, 叶星
2017, 13(6): 30-40. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2017.06.004
摘要:
该研究从草鱼(Ctenopharyngodon idellus)中克隆到3个jam-agcjam-a1,gcjam-a2,gcjam-a3)cDNA序列,并采用qRT-PCR分析其在健康草鱼9种组织中的表达模式以及受草鱼呼肠孤病毒(GCRV-GD108)感染后在草鱼6种组织中的表达变化。结果表明,克隆到的gcjam-a 3个分子编码294~295个氨基酸,均具有2个免疫球蛋白Ig结构域,包含典型的受体结合的D1结构域及与细胞膜结合的D2结构域。3个gcjam-a的D2结构域序列完全一致,而D1结构域序列则稍有差别。在健康草鱼9个组织中,gcjam-a1主要在血和脑中有较高表达,gcjam-a2主要在鳃中有较高表达,而在各个组织未检测到gcjam-a3表达。病毒感染后草鱼6种组织中,gcjam-a1、gcjam-a2、gcjam-a3在鳃中均出现显著上调表达,而在肝脏、脾脏、肠、肾、脑中只有gcjam-a1有不同程度诱导表达上调。该研究表明在健康草鱼组织中,3个gcjam-a中以gcjam-a1的表达量最高,且在受病毒感染后所检测的6种组织中均出现表达上调,推测其可能为GCRV-GD108的主要受体。
红鳍笛鲷放流苗种的遗传质量监测
付亚男, 林琳, 肖雅元, 李纯厚
2017, 13(6): 41-47. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2017.06.005
摘要:
目前中国的放流苗种遗传质量监测方法尚未建立,导致放流项目在苗种筛选过程中普遍未考查苗种的遗传质量。随着放流规模和范围的扩大,这一盲点将对放流海域的自然种群产生日益严重的遗传威胁。为逐步建立放流苗种遗传质量监测方法,该研究从遗传分歧度、遗传多样性水平、近交程度、遗传信息保持能力4个方面对比了红鳍笛鲷(Lutjanus erythopterus)放流苗种群体与自然群体,对其遗传质量进行了分析。结果表明,两群体间存在微弱遗传分歧(FST=0.016 1);放流苗种群体的遗传多样性水平和有效种群大小低于自然群体,而其近交系数均值与FIS大于自然群体。上述比较证明,该苗种的遗传多样性素质低于自然群体,在遗传质量方面不能满足增殖放流要求,如果将此苗种进行放流可能产生多种负面遗传影响。从各指标偏差率看,有效种群大小的偏差率最高(-35.34%)是该苗种最突出的遗传质量缺陷。
南海北部不同粒级浮游动物氮稳定同位素研究
张文博, 刘华雪, 巩秀玉, 史荣君, 黄洪辉
2017, 13(6): 48-55. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2017.06.006
摘要:
在2015年夏季和冬季开展了南海北部海域不同粒级浮游动物生物量和氮稳定同位素特征的研究。按照浮游动物粒径大小将其分成3个类群,即小型浮游动物(180~380 μm)、中型浮游动物(380~500 μm)和大型浮游动物(>500 μm)。结果显示浮游动物生物量和氮稳定同位素空间分布差异明显,高值区多分布于珠江口、东沙群岛和台湾海峡南部海域。浮游动物氮稳定同位素δ15N值出现显著的季节和粒径结构差异,其中夏季δ15N平均值高于冬季,以小型浮游动物尤为明显(P < 0.01)。各粒级浮游动物δ15N值随粒径增大而增加。小型和中型浮游动物δ15N值与浮游动物生物量有显著的相关性,而大型浮游动物与浮游动物生物量则关系不明显。
南海柘林湾海洋牧场生物碳储量研究
马欢, 秦传新, 陈丕茂, 冯雪, 袁华荣, 黎小国, 林会洁
2017, 13(6): 56-64. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2017.06.007
摘要:
文章以柘林湾海洋牧场海洋生物为研究对象,采用元素分析法,对海洋生物不同组织器官灰化前后碳(C)质量分数进行测定。在此基础上,估算灰化前柘林湾海洋生物C质量分数,探讨海洋牧场生物碳储量。结果表明,1)灰化前柘林湾海洋牧场各生物主要组织器官肌肉、骨骼/壳、内脏C质量分数均值变化分别为37.72%~47.41%、11.23%~34.91%、27.58%~33.95%,其中硬骨鱼纲、甲壳纲(虾)、腹足纲、双壳纲等固碳能力较强,但除头足纲外,总体差别不大。灰化后,主要组织器官肌肉、骨骼/壳、内脏C质量分数均值变化分别为1.83%~8.28%、1.90%~12.54%、0.62%~8.29%,其中腹足纲和双壳纲储碳能力较强;2)2013年柘林湾海洋牧场海洋生物储碳约为6.728×104 t。其中人类捕捞从海洋中移除C约0.155×104 t,占总碳储量的2.31%;沉积在海底的C约0.11×104 t,占总碳储量的1.7%;封存在海洋内的并不断进入碳循环的C约6.46×104 t,占总碳储量的95.98%。不同海洋生物碳汇特征不同,海洋牧场可有效提高区域碳汇强度。
南海北部陆坡海域粗鳞灯笼鱼耳石形态特征
王岩, 陈作志, 张俊, 张国胜, 汤勇, 徐姗楠, 江艳娥
2017, 13(6): 65-72. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2017.06.008
摘要:
根据2015年6-7月于南海北部陆坡海域采集的207尾粗鳞灯笼鱼(Myctophum asperum)样本,对其耳石形态特征及形态参数进行了初步分析。结果表明,粗鳞灯笼鱼耳石的耳石长(otolith length,L1)、耳石宽(otolith width,L2)、周长(otolith perimeter,P)和面积(otolith area,A)有明显的性别差异。耳石宽、耳石周长、耳石面积与体长呈对数函数关系(P < 0.05);耳石长与体长呈幂函数关系(P < 0.05);耳石长、耳石宽与体质量呈幂函数关系(P < 0.05);耳石周长、耳石面积与体质量呈对数函数关系(P < 0.05)。随着体长逐渐增大,耳石绝对尺寸逐渐增大,相对尺寸保持不变。耳石基叶(rostrum)长和翼叶(antirostrum)长存在线性关系。
不同鲍养殖模式下浮游植物群落结构与水质特征的比较
武宇辉, 王庆, 魏南, 刘之威, 欧林坚, 杨宇峰
2017, 13(6): 73-81. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2017.06.009
摘要:
为研究不同鲍养殖模式对浮游植物群落结构和水环境的影响,于2016年5月至6月初大型海藻龙须菜(Gracilaria lemaneiformis)收获前后,选取汕头市南澳县深澳湾海域鲍单养区(A)、鲍与龙须菜混养区(GA)、过渡海区(M)和对照海区(C),对浮游植物群落及水体理化因子进行了6次高频调查。结果表明,调查海区共记录浮游植物4门45属84种,其中硅藻为优势类群,共37属71种。时间上比较,龙须菜收获后所有调查海区浮游植物细胞密度都显著高于龙须菜收获前(P < 0.05);各养殖区域间比较,龙须菜收获前鲍单养区浮游植物细胞密度显著高于鲍-龙须菜混养区(P < 0.05)。龙须菜收获前,鲍-龙须菜混养区总氮(TN)、总磷(TP)、氨氮(NH4+-N)和叶绿素a(Chl-a)浓度最低,多样性指数(H′)及均匀度指数(J′)最高; 龙须菜收获后各区无显著差异(P>0.05)。影响浮游植物群落结构特征的理化因子为TN、TP、水温和叶绿素a。该研究表明,鲍-大型海藻复合养殖模式可降低鲍养殖水体中氮、磷的浓度,并维持浮游植物群落结构相对的稳定。
微生态制剂Bio100对虎龙斑幼鱼生长性能、消化酶活性及血清免疫、生化指标的影响
谭连杰, 林黑着, 黄忠, 赵书燕, 周传鹏, 虞为
2017, 13(6): 82-89. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2017.06.010
摘要:
文章旨在探讨饲料中不同水平的Bio100对虎龙斑(Epinephelus fuscoguttatus♀×E.lanceolatus♂)幼鱼生长性能、消化酶活性、血清免疫指标和血清生化指标的影响。配制6种实验饲料,Bio100质量分数分别为0%(对照)、0.05%(T1)、0.10%(T2)、0.15%(T3)、0.20%(T4)和0.25%(T5)。选取均体质量为(23.33±0.33)g的虎龙斑幼鱼随机分配6组,每组3个重复,每个重复20尾鱼,置于室内玻璃钢纤维桶(500 L)中喂养。每天饲喂2次,为期8周。结果显示,随着饲料中Bio100质量分数的增加,虎龙斑的增重率和特定生长率先升高后降低,T3和T4组显著高于对照组(P < 0.05);处理组的饲料系数显著低于对照组(P < 0.05);肌肉灰分含量逐渐升高,T5组显著高于T1组和对照组(P < 0.05)。胃蛋白酶活性先升高后降低,T3组显著高于T1、T5和对照组(P < 0.05);肠道脂肪酶活性先升高后降低,T4组显著高于T1、T2和对照组(P < 0.05);各组间肠道淀粉酶活性无显著性差异(P>0.05)。处理组溶菌酶、碱性磷酸酶活性和补体3含量较对照组有一定程度提高,各组间无显著性差异(P>0.05)。饲料中Bio100水平显著影响了血清中胆固醇含量和谷丙转氨酶活性。综合分析表明,虎龙斑幼鱼饲料中Bio100的适宜添加量为0.15%。
豹纹鳃棘鲈仔鱼饥饿实验和不可逆点研究
杨育凯, 虞为, 林黑着, 李涛, 黄小林, 黄忠, 戚常乐
2017, 13(6): 90-96. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2017.06.011
摘要:
采用实验生态学方法研究了饥饿对豹纹鳃棘鲈(Plectropomus leopardus)仔鱼形态发育、生长和成活的影响,并测定了饥饿仔鱼的初次摄食率和不可逆点(PNR)。结果显示,水温23~24 ℃下豹纹鳃棘鲈仔鱼2.5 DPH(孵化后天数)开口摄食,3.0 DPH卵黄囊和油球消失,混合营养期仅0.5 d,容易遭受饥饿胁迫。饥饿仔鱼最高初次摄食率为65%,出现在3.5 DPH; PNR发生在4.5~5.0 DPH,仔鱼具有初次摄食能力的时间仅2.0~2.5 d。对照组和饥饿组仔鱼在3.5 DPH前全长无明显差异(P>0.05),之后饥饿组仔鱼出现生理性萎缩,全长开始与对照组差异显著(P < 0.05)。饥饿组仔鱼在内源性营养消耗完毕后出现了一系列因饥饿所导致的形态发育特征,并于6.5 DPH全部死亡,因此豹纹鳃棘鲈仔鱼最佳投喂时间为2.5~3.5 DPH。
几种海藻多糖抗氧化活性及体外抗脂质过氧化作用的研究
马军, 侯萍, 陈燕, 黄娟华, 张洪业, 王珊宁, 黄海
2017, 13(6): 97-104. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2017.06.012
摘要:
为了探讨不同海藻多糖抗氧化活性的差异, 对琼枝(Betaphycus gelatinae)、石莼(Ulva lactuca)、匍枝马尾藻(Sargassum polycystum)、南方团扇藻(Padina australis)和棒叶蕨藻(Caulerpa sertularioides)的粗多糖的自由基清除及脂质过氧化抑制能力进行了研究。结果表明,5种海藻多糖的抗氧化活性存在明显的差异性,南方团扇藻和匍枝马尾藻多糖具有较强的还原力,对超氧阴离子和羟自由基均有较强的清除活性,其中南方团扇藻多糖对超氧阴离子清除活性较强[半抑制浓度(IC50)为(262.00±24.60) μg·mL-1],明显高于匍枝马尾藻多糖[IC50=(458.00±18.70) μg·mL-1],对羟自由基的清除活性[IC50=(388.00±45.29) μg·mL-1]与匍枝马尾藻多糖相近[IC50=(312.04±37.42) μg·mL-1],匍枝马尾藻多糖对DPPH的清除能力[IC50=(95.80±7.48) μg·mL-1]显著高于其他4种海藻多糖,而南方团扇藻多糖对DPPH的清除能力较差[IC50=(726.00±54.90) μg·mL-1]。通过体外抗脂质过氧化作用研究发现,南方团扇藻多糖对肝细胞膜脂质氧化有较高的抑制能力[IC50=(283.67±44.14) μg·mL-1],并且对过氧化氢诱导的红细胞溶解有一定的保护能力IC50=(335.50±22.47) μg·mL-1]。
低盐罗非鱼片快速腌制的工艺研究
赵志霞, 吴燕燕, 李来好, 陈胜军, 林婉玲, 邓建朝
2017, 13(6): 105-114. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2017.06.013
摘要:
为探究不同腌制方式对罗非鱼(Oreochromis mossambicus)鱼片品质的影响,获得低盐罗非鱼片的快速腌制工艺,比较了静置腌制、注射腌制、真空腌制、超声腌制4种腌制方式对鱼片食盐质量分数、水分质量分数、质量变化率、pH、蛋白质水解指数和质构的影响,并在注射腌制单因素实验基础上,采用响应面优化法考察了食盐水浓度、腌制时间、料液比对注射腌制鱼片食盐质量分数的影响,优化了注射腌制工艺条件。结果表明,注射腌制鱼片的腌制效果较静置腌制、真空腌制、超声腌制方式好,其食盐渗透速率较快,产品品质良好,产品出品率高。单因素实验表明食盐水浓度、腌制时间、料液比是主要影响因素,通过Box-Behnken响应面法优化得到的最佳注射工艺为:食盐水浓度2.26 mol·L-1、腌制时间2.5 h、料液比[鱼片质量(g):腌制液体积(mL)]1:3.4,测得优化后的鱼肉食盐质量分数为2.93%,与模型的目标预测值相对误差为2.39%,表明该模型具有实际应用价值。
南海区2种桁杆虾拖网渔获组成调查与分析
杨炳忠, 杨吝, 谭永光, 晏磊, 张鹏, 李杰
2017, 13(6): 115-122. doi: 10.3969/j.issn.2095-0780.2017.06.014
摘要:
为了分析2种桁杆虾拖网(包括单杆虾拖网和双杆虾拖网)的结构特征、渔获组成及其对渔业资源的影响,2012-2015年于南海北部渔场进行了调查,运用相对重要性指数(IRI)评价渔获组成,统计副渔获物与虾类的产量比,计算主要经济种类的幼体比例。结果表明,单杆虾拖网与双杆虾拖网的桁杆结构存在较大的差异; 单杆虾拖网副渔获与虾类的产量比平均为12.68±14.52;双杆虾拖网副渔获与虾类的产量比平均为1.79±1.02;2种虾拖网虾类优势种为刀额新对虾(Metapenaeus ensis)、周氏新对虾(M.joyneri)、日本囊对虾(Marsupenaeus japonicus)和近缘新对虾(M.affinis); 鱼类优势种为褐斑三线舌鳎(Cynoglossus trigrammus)、多齿蛇鲻(Saurida tumbil)、少鳞 (Sillago japonica)、丽叶鲹[Caranx (Atule) kalla]、黄斑篮子鱼(Siganus oramin)和六指马鲅(Thrissa dussumieri); 蟹类优势种为红星梭子蟹(Portunus sanguinolentus)、三疣梭子蟹(P.trituberculatus)和远海梭子蟹(P.pelagicus); 2种虾拖网渔获的幼体比例较高。文章还针对2种虾拖网作业对渔业资源产生的潜在影响进行了分析和探讨。